一种用于猴痘病毒抗原定性检测的试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种用于猴痘病毒抗原定性检测的试剂盒。本发明专利技术用于猴痘病毒抗原定性检测的试纸条，包括样品垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和底板；沿样品流动方向，样品垫、金标条、硝酸纤维素膜、吸水垫依次固定于底板上；金标条上包被胶体金标记的抗猴痘特异性蛋白A29L抗体；硝酸纤维素膜上包括检测线和质控线；检测线包被抗猴痘病毒特异性蛋白M1R抗体；质控线包被羊抗鼠或羊抗兔IgG的二抗。本发明专利技术试剂盒包括上述试纸条和样本稀释液；样本稀释液包括如下质量百分浓度的组分：0.6％～1％的Tris，0.5％～1.0％的牛血清白蛋白，8％的氯化钠，0.8％～1.5％的混合非离子表面活性剂，0.02％防腐剂；其pH为8.0。本发明专利技术试剂盒能检测猴痘病毒，样本可为全血、血清、血浆或痘病毒分泌物。血浆或痘病毒分泌物。

【技术实现步骤摘要】
一种用于猴痘病毒抗原定性检测的试剂盒


[0001]本专利技术属于生物
中的检测试剂盒，涉及一种用于猴痘病毒抗原定性检测的试剂盒。

技术介绍

[0002]胶体金标记技术是上世纪80年代，继荧光素、放射性同位素和酶三大标记技术后发展起来的标记方法。1971年Faulk和Taylor将胶体金引入到免疫生化中，此后，该标记方法在药物检测、生物医学检测、农兽药检测、临床疾病检测等领域得到广泛的应用。目前国内外商品化的胶体金免疫层析试剂盒有数百种之多，例如常见的有：早早孕试剂盒、毒品检测的试剂盒、大便隐血检测的试剂盒、传染性疾病检测的试剂盒等。
[0003]胶体金标记技术是将胶体金作为标记示踪物，最初应用于免疫电镜中；随着免疫学的发展，逐步应用于动物凝集实验、免疫印迹、光镜染色、免疫斑点及免疫层析技术。由于胶体金表面的高电子的密集性，胶体金可以和多数蛋白牢固的结合在一起，但又不破坏蛋白的活性。
[0004]将胶体金运用于免疫检测中，主要是用胶体金标记抗原或抗体；然后将与标记的抗原或抗体能发生免疫学反应的抗体或抗原固定在基质上，从而将抗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于猴痘病毒抗原定性检测的试纸条，其特征在于，包括样品垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和底板；沿样品流动方向，所述样品垫、金标条、所述硝酸纤维素膜、所述吸水垫依次固定于所述底板上；所述金标条上包被胶体金标记的抗猴痘特异性蛋白A29L抗体；所述硝酸纤维素膜上包括检测线和质控线；所述检测线包被抗猴痘病毒特异性蛋白M1R抗体；所述质控线包被羊抗鼠或羊抗兔IgG的二抗。2.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，形对所述抗猴痘特异性蛋白A29L抗体进行胶体金标记时，所述抗猴痘特异性蛋白A29L抗体在标记体系中的终浓度为7～10μg/mL；在所述检测线处包被所述抗猴痘病毒特异性蛋白M1R抗体时，所述抗猴痘病毒特异性蛋白M1R抗体的浓度为1mg/mL；在所述质控线处包被所述二抗时，所述二抗的浓度为0.5mg/mL。3.根据权利要求1或2所述的试纸条，其特征在于，制备所述胶体金标记的抗猴痘特异性蛋白A29L抗体包括如下步骤：(1)将胶体金溶液用碳酸钾溶液调节pH至8.0，得到调节的胶体金溶液；用2mM的pH7.4的Tris缓冲液将所述胶体金标记的抗猴痘特异性蛋白A29L抗体的浓度稀释至1mg/mL；(2)将稀释后得到的1mg/mL的所述胶体金标记的抗猴痘特异性蛋白A29L抗体加入所述调节的胶体金溶中混合，得到混合溶液；(3)向所述混合溶液加入质量百分含量为2％～8.5％的BSA水溶液混合，然后加入质量百分含量为1％～2％的PEG聚集物混合；(4)将步骤(3)中溶液体系离心后去上清，然后用2mM的pH 7.4的Tris缓冲液复溶沉淀，即得到所述胶体金标记的抗猴痘特异性蛋白A29L抗体。4.根据权利要求3所述的试纸条，其特征在于，所述PEG聚集物的分子量为15000～30000；步骤(3)中，所述混合的时间为30～60分钟。5.根据权利要求1
‑
4中任一项所述的试纸条，其特征在于，所述金标条的基垫为玻璃纤维垫；所述样品垫经缓冲体系浸泡制备得到；配制所述缓冲体系包括如下步骤：1)按照每百份体积的水加入3～6份的硼砂的量称取硼砂，加入80份的水，并将烧杯放置在磁力搅拌器上，搅拌；2)向步骤1)中加入0.5份的乙二胺四乙酸盐，继续搅拌；3)向步骤2)中加入0.2份的casein盐，继续搅拌；4...

【专利技术属性】
技术研发人员：卜令杰，李扬霞，陈超，吴苑，程金放，
申请(专利权)人：江苏默乐生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：