【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药，具体而言，涉及一种慢病毒载体保存液、慢病毒载体制剂及其制备方法。
技术介绍
1、慢病毒载体(lentiviral vector)具有广泛的宿主范围，其能够有效感染非周期性和有丝分裂后的细胞，并整合进宿主细胞基因组，从而实现在多种类型的细胞和转基因小鼠中特异而稳定的基因功能性表达或沉默，为细胞标记、基因治疗及在原代的人或动物细胞组织中快速而高效地研究基因功能提供了可能性。
2、由于慢病毒是一种包膜病毒，其稳定性较低。慢病毒载体一般在灌装后储存于-80℃条件下，在使用时需要经历冻融并在37℃条件下感染细胞。但是目前用于保存慢病毒载体的常规生理缓冲液中，慢病毒载体的稳定性较差，在-80℃及37℃保存或反复冻融过程中，慢病毒载体的活性会快速下降，从而提高了慢病毒载体的成本并限制了其应用。
技术实现思路
1、本专利技术解决的问题是如何提供一种能够提高慢病毒载体活力，并保证稳定性的慢病毒载体保存制剂。
2、为解决上述问题中的至少一个方面，本专利技术提供一种慢病毒载体保存液，包括：
3、pipes：10-50mm；
4、氯化钠：50-300mm；
5、糖：质量体积比为0.5-3.5％；
6、葡聚糖：质量体积比为0.1-2％；
7、人血白蛋白：体积比为1-20％；
8、250×胆固醇脂质浓缩液：体积比为0.1-0.48％；
9、其中，所述糖包括蔗糖、海藻糖、乳糖和甘露
10、优选地，所述糖包括蔗糖和甘露醇中的至少一种。
11、优选地，该慢病毒载体保护液包括：
12、pipes：20mm；
13、氯化钠：75mm；
14、蔗糖：质量体积比为1％；
15、甘露醇：质量体积比为1％；
16、葡聚糖：质量体积比为0.5％；
17、人血白蛋白：体积比为10％；
18、250×胆固醇脂质浓缩液：体积比为0.32％。
19、优选地，所述慢病毒载体保存液的ph为6.1-7.3。
20、优选地，所述慢病毒载体保存液的ph为6.7。
21、本专利技术通过pipes、氯化钠、糖、葡聚糖、人血白蛋白(hsa)和250×胆固醇脂质浓缩液复配得到慢病毒载体保存液，其中，糖包括蔗糖、海藻糖、乳糖和甘露醇中至少一种，制得的慢病毒载体保存液能够提高慢病毒载体在37℃条件下的稳定性，并提高慢病毒载体在反复冻融中的稳定性，保证慢病毒载体的活性，提高慢病毒载体对靶细胞的转导效率。此外，本专利技术所提供的慢病毒载体保存液中所采用的试剂成分简单、容易获取，且成本较低，有利于实现工业化大规模生产和应用。
22、本专利技术还提供了一种慢病毒载体制剂，包括慢病毒载体和如上所述的慢病毒载体保存液。
23、本专利技术提供的慢病毒载体制剂相对于现有技术的有益效果，与慢病毒载体保存液相同，在此不再赘述。
24、本专利技术还提供一种慢病毒载体制剂的制备方法，用于制备如上所述的慢病毒载体制剂，包括：
25、步骤t1、采用超滤膜包对慢病毒储备液进行超滤浓缩，得到浓缩液；
26、步骤t2、按照如上所述的慢病毒载体保存液中的配方，配制pipes缓冲液、氯化钠、糖和葡聚糖的混合液；
27、步骤t3、使用所述混合液对所述浓缩液进行洗滤，然后过滤除菌，再按照如上所述的慢病毒载体保存液中的配方，加入人血清白蛋白和250×胆固醇脂质浓缩液，得到慢病毒载体制剂。
28、优选地，所述步骤t3中，所述混合液与所述浓缩液的体积比为5-15：1，使用0.22μm过滤器进行过滤除菌。
29、本专利技术提供的慢病毒载体制剂的制备方法，通过超滤换液方式，能够保证慢病毒载体在37℃和反复冻融条件下的稳定性，保证慢病毒载体活性，提高慢病毒载体对靶细胞转导效率之外，能够应用于慢病毒载体的大规模生产。
30、本专利技术还提供了另外一种慢病毒载体制剂的制备方法，用于制备如上所述的慢病毒载体制剂，包括：
31、步骤s1、按照如上所述的慢病毒载体保存液中的配方制得所述慢病毒载体保存液；
32、步骤s2、将慢病毒载体储备液与所述慢病毒载体保存液混合，得到慢病毒载体制剂。
33、优选地，所述步骤s2中，所述慢病毒载体储备液与所述慢病毒载体保存液的体积比为1：7。
34、本专利技术提供的慢病毒载体制剂的制备方法相对于现有技术的有益效果，与慢病毒载体保存液相同，在此不再赘述。
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1.一种慢病毒载体保存液，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的慢病毒载体保存液，其特征在于，所述糖包括蔗糖和甘露醇中的至少一种。
3.根据权利要求2所述的慢病毒载体保存液，其特征在于，包括：
4.根据权利要求1所述的慢病毒载体保存液，其特征在于，所述慢病毒载体保存液的pH为6.1-7.3。
5.根据权利要求4所述的慢病毒载体保存液，其特征在于，所述慢病毒载体保存液的pH为6.7。
6.一种慢病毒载体制剂，其特征在于，包括慢病毒载体和如权利要求1-5任一项所述的慢病毒载体保存液。
7.一种慢病毒载体制剂的制备方法，用于制备如权利要求6所述的慢病毒载体制剂，其特征在于，包括：
8.根据权利要求7所述的慢病毒载体制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤T3中，所述混合液与所述浓缩液的体积比为5～15:1，使用0.22μm过滤器进行过滤除菌。
9.一种慢病毒载体制剂的制备方法，用于制备如权利要求6所述的慢病毒载体制剂，其特征在于，包括：
10.根据权利要求9所述的慢病毒载体制剂
...【技术特征摘要】
1.一种慢病毒载体保存液，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的慢病毒载体保存液，其特征在于，所述糖包括蔗糖和甘露醇中的至少一种。
3.根据权利要求2所述的慢病毒载体保存液，其特征在于，包括：
4.根据权利要求1所述的慢病毒载体保存液，其特征在于，所述慢病毒载体保存液的ph为6.1-7.3。
5.根据权利要求4所述的慢病毒载体保存液，其特征在于，所述慢病毒载体保存液的ph为6.7。
6.一种慢病毒载体制剂，其特征在于，包括慢病毒载体和如权利要求1-5任一项所述的慢病毒载体...
【专利技术属性】
技术研发人员：鲁薪安，何霆，贾生华，胡彦新，
申请(专利权)人：北京艺妙神州医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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