靶向EGFRvⅢ分泌PD1单域抗体的CAR-T细胞及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及靶向EGFRvⅢ分泌PD1单域抗体的CAR‑T细胞及其制备方法和应用。所述CAR‑T细胞表达嵌合抗原受体并能将PD1单域抗体分泌到细胞外，所述嵌合抗原受体包括胞外抗原识别区EGFRvⅢ单域抗体序列和PD1单域抗体序列等。所述制备方法包括：构建重组慢病毒载体、包装慢病毒、慢病毒感染T细胞从而获得所述CAR‑T细胞。本发明专利技术还涉及所述CAR‑T细胞在制备治疗肿瘤的制剂中的应用。本发明专利技术制得的CAR‑T细胞在对EGFRvⅢ阳性肿瘤细胞具有较好的杀伤作用，为肿瘤的过继性免疫治疗提供了新策略。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于肿瘤生物制品领域，涉及过继免疫治疗中的靶向egfrvⅲ分泌pd1单域抗体的car-t细胞(egfrvⅲ/pd1 nb car-t细胞)及其制备方法和应用。

技术介绍

1、t细胞可以通过表达嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,car)靶向肿瘤细胞。嵌合抗原受体通过将可以特异性识别肿瘤抗原的单链抗体与可活化t细胞的受体胞内结构域“免疫受体酪氨酸活化基序”用人工方法融合成重组基因来制备。car-t细胞疗法是目前肿瘤免疫治疗的当下最热门最有研究价值的治疗方法。目前car-t治疗在血液肿瘤中取得了很好的进展，但是由于实体肿瘤微环境复杂，car-t对实体瘤的杀伤效果有限，因此需要探索新的方法来提高car-t治疗实体肿瘤的活性。

2、car的基础设计中包括肿瘤相关抗原结合区、胞内信号区、跨膜区、胞外铰链区等。car-t目前已经发展到第四代，在血液肿瘤中取得了很好的进展，而对于实体瘤治疗，car-t细胞疗法的效果一直不佳，其中重要原因是肿瘤特异性t细胞难以突破实体肿瘤微环境的免疫抑制作用。除此之外，目前大多数car识本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种靶向EGFRvⅢ分泌PD1单域抗体的CAR-T细胞，其特征在于：

2.根据权利要求1所述的CAR-T细胞，其特征在于：

3.根据权利要求1或2所述的CAR-T细胞，其特征在于：

4.根据权利要求1至3所述的CAR-T细胞，其特征在于：

5.一种制备权利要求1至4中任一项所述的CAR-T细胞的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：

7.一种根据权利要求1至4中任一项所述的CAR-T细胞或根据权利要求5或6所述方法制备的CAR-T细胞在制备治疗肿瘤的制剂中的应用；...

【技术特征摘要】

1.一种靶向egfrvⅲ分泌pd1单域抗体的car-t细胞，其特征在于：

2.根据权利要求1所述的car-t细胞，其特征在于：

3.根据权利要求1或2所述的car-t细胞，其特征在于：

4.根据权利要求1至3所述的car-t细胞，其特征在于：

5.一种制备权利要求1至4中任一项所述的car-t细胞的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：

7.一种根据权利要求1至4中任一项所述的car-...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢小玲，杨晓梅，李海霞，王旋，强航标，
申请(专利权)人：广西医科大学，
类型：发明
国别省市：