【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物化工领域，具体涉及一种五氯酚钠半抗原、人工抗原及其在免疫检测中的应用。
技术介绍
1、五氯酚钠，即五氯酚酸钠(sodium pentachloro phenoxide，pcp-na)，是一类具有五氯苯氧基结构特征的化合物，常作为杀菌剂、除草剂、杀虫剂和木材防腐剂被广泛使用。五氯酚钠化学性质稳定，不易发生降解，可通过生物富集作用进入食物链。五氯酚钠具有致畸、致癌、致突变作用，人体在长期摄入五氯酚钠后，会对人体免疫功能、神经功能造成损伤，具有极大的危害性。在世界范围内，大部分国家及地区、组织均建立相关法律法规，将五氯酚钠列入食品动物禁用的兽药中，禁止在水生动物养殖中使用，在动物源性食品中不得检出。
2、目前常规的仪器检测法不仅设备仪器昂贵，检测时间长，且需专业人员操作，无法实现现场快速抽查检测；另一检测方法为免疫学检测技术，此方法具有高特异性和高选择性的特点，非常适用于复杂基质痕量组分的检测。免疫检测产品的性能优劣是由抗原和抗体的性能决定的，而抗原和抗体的关键又是半抗原，因此，要得到性能优异的抗原和抗体，半抗原的结构设计就显得尤为重要。因此，开发高特异性的五氯酚钠半抗原或人工抗原对于五氯酚钠快速、高灵敏度、低成本检测方法具有至关重要的意义。
3、cn113754532a中公开了一种五氯酚钠半抗原，其结构式为使用专利技术中的五氯酚钠半抗原制备得到的人工抗原和抗体的ic50值可达到1.07μg/l，对五氯酚钠的实际检测灵敏度至少为1μg/l。
4、cn105116148a中公开了一种
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于克服现有技术的至少一个不足，提供一种五氯酚钠半抗原、人工抗原及其在免疫检测中的应用。
2、本专利技术所采取的技术方案是：
3、第一个方面，本专利技术提供一种五氯酚钠半抗原，所述半抗原具有式i所示的结构：
4、
5、第二个方面，本专利技术提供的五氯酚钠半抗原的制备方法包括以下步骤：化合物1和化合物2进行取代反应得到化合物3；然后化合物3水解得到五氯酚钠半抗原；其中，化合物1的结构式为化合物2的结构式为化合物3的结构式为
6、在一些实例中，化合物1的摩尔用量为化合物2的5倍以上，化合物1和化合物2反应的温度为20～30℃。
7、第三个方面，本专利技术提供一种五氯酚钠人工抗原，所述五氯酚钠人工抗原由五氯酚钠半抗原与蛋白载体偶联得到。
8、在一些实例中，本专利技术的第三个方面所述的五氯酚钠人工抗原的结构式如式ii所示：其中，protein为蛋白载体。
9、在一些实例中，所述蛋白载体选自牛血清白蛋白、卵清蛋白、人血清白蛋白或血蓝蛋白中的至少一种。
10、第四个方面，本专利技术提供的五氯酚钠人工抗原的制备方法包括以下步骤：将式i所示的半抗原、碳二亚胺和n-羟基琥珀酰亚胺混合，活化反应得到半抗原活化酯；然后将载体蛋白与半抗原活化酯混合，酰胺化反应得到所述五氯酚钠人工抗原。
11、在一些实例中，所述活化反应时间为3～5h，所述酰胺化反应时间为16～24h。
12、第五个方面，本专利技术提供的五氯酚钠人工抗原在五氯酚钠elisa检测方法中的应用。
13、第六个方面，本专利技术提供一种检测五氯酚钠的检测试纸或检测试剂，该检测试纸或检测试剂中含有所述五氯酚钠人工抗原。
14、本专利技术的有益效果是：
15、1、本专利技术设计的五氯酚钠半抗原引入的手臂不仅具有活性基团，还完整保留了待测目标物的苯酚类结构，增强了识别位点，由于本专利技术的识别位点较多，产物五氯酚钠半抗原的含量得到了极大提升；
16、2、本专利技术中的五氯酚钠人工抗原及单克隆抗体用于elisa检测特异性强，ic50值为0.87μg/l，优于现有抗原；
17、3、本专利技术中的五氯酚钠人工抗原及单克隆抗体用于胶体金免疫层析技术，可快速、便捷地实现五氯酚钠的检测，并且本专利技术中制备的胶体金免疫层析试纸条对五氯酚钠检测灵敏度为0.8μg/l，能检测到更加微量的五氯酚钠，灵敏度更高。
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1.一种五氯酚钠半抗原，其特征在于，所述半抗原具有式I所示的结构：
2.如权利要求1所述五氯酚钠半抗原的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，化合物1的摩尔用量为化合物2的5倍以上，化合物1和化合物2进行取代反应的温度为20～30℃。
4.一种五氯酚钠人工抗原，其特征在于，所述五氯酚钠人工抗原由权利要求1所述的五氯酚钠半抗原与蛋白载体偶联得到。
5.根据权利要求4所述五氯酚钠人工抗原，其特征在于，所述五氯酚钠人工抗原的结构式如式II所示：其中，protein为蛋白载体。
6.根据权利要求4或5所述五氯酚钠人工抗原，其特征在于，所述蛋白载体选自牛血清白蛋白、卵清蛋白、人血清白蛋白或血蓝蛋白中的至少一种。
7.如权利要求4～6任一项所述五氯酚钠人工抗原的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述活化反应时间为3～5h，所述酰胺化反应时间为16～24h。
9.如权利要求4～6任一项所述五氯酚钠人工抗原
10.一种检测五氯酚钠的检测试纸或检测试剂，其特征在于，所述检测试纸或检测试剂中含有如权利要求4～6任一项所述五氯酚钠人工抗原。
...【技术特征摘要】
1.一种五氯酚钠半抗原，其特征在于，所述半抗原具有式i所示的结构：
2.如权利要求1所述五氯酚钠半抗原的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，化合物1的摩尔用量为化合物2的5倍以上，化合物1和化合物2进行取代反应的温度为20～30℃。
4.一种五氯酚钠人工抗原，其特征在于，所述五氯酚钠人工抗原由权利要求1所述的五氯酚钠半抗原与蛋白载体偶联得到。
5.根据权利要求4所述五氯酚钠人工抗原，其特征在于，所述五氯酚钠人工抗原的结构式如式ii所示：其中，protein为蛋白载体。
6.根...
【专利技术属性】
技术研发人员：袁利鹏，刘波，华彦涛，梁铃渝，文锦谦，伍惠冰，姚楷淳，吴芷茗，戴蕤，
申请(专利权)人：广东农工商职业技术学院，
类型：发明
国别省市：
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