一种重组RSV F蛋白及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，具体涉及一种重组RSV F蛋白及其在制备呼吸道合胞病毒疫苗中的应用。该重组RSV F蛋白在不改造野生型RSV F蛋白天然的弗林蛋白酶切割位点和pep27的前提下以组合突变的形式提供。本发明专利技术的重组RSV F蛋白表达量高、稳定性好，可用于制备疫苗、呼吸道合胞病毒抗体、抗呼吸道合胞病毒血清和诊断抗原等产品。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药，特别涉及一种重组rsv f蛋白、其制备方法及在制备呼吸道合胞病毒疫苗中的应用。

技术介绍

1、人呼吸道合胞病毒（human respiratory syncytial virus，hrsv）是婴幼儿和老年人发生严重呼吸道疾病的主要病因之一，自20世纪50年代hrsv被发现以来，国内外科研人员对hrsv疫苗进行了大量的研发，hrsv疫苗一直面临安全性不足或免疫原性弱等巨大挑战，已有多种进入临床试验阶段的hrsv疫苗宣布“失败”。2013年，融合前f蛋白（prefusionf protein, pre-f）构象成功解析后，以pre-f为基础的hrsv疫苗展现出良好的应用前景。尽管已有大量关于rsv f蛋白融合前构象稳定性的研究，但其作为疫苗使用的安全性和有效性仍面临巨大的挑战。

2、因此，提供一种安全性好、表达量高且具有增强的免疫原性和改善的稳定性的rsvpre-f蛋白，以及包含其的疫苗成为本领域技术人员急需解决的技术问题。

技术实现思路

1、为解决上述技术问题，本专利技术公开本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组呼吸道合胞病毒(RSV)蛋白，其包含可溶性F蛋白多肽，该F蛋白多肽包含至少一种选自下组的修饰：

2.如权利要求1所述的重组RSV蛋白，其特征在于，所述至少一种修饰包含F蛋白多肽的F1亚基和/或F2亚基中至少一对氨基酸残基被半胱氨酸取代。

3.如权利要求1或2所述的重组RSV蛋白，其特征在于，所述被半胱氨酸取代的氨基酸残基包含野生型RSV F蛋白氨基酸序列的第159+291、176+190和89+231位中的至少一对。

4.如权利要求1所述的重组RSV蛋白，其特征在于，所述至少一个空腔填充突变是野生型RSV F蛋白氨基酸序列第67位的天冬酰胺...

【技术特征摘要】

1.一种重组呼吸道合胞病毒(rsv)蛋白，其包含可溶性f蛋白多肽，该f蛋白多肽包含至少一种选自下组的修饰：

2.如权利要求1所述的重组rsv蛋白，其特征在于，所述至少一种修饰包含f蛋白多肽的f1亚基和/或f2亚基中至少一对氨基酸残基被半胱氨酸取代。

3.如权利要求1或2所述的重组rsv蛋白，其特征在于，所述被半胱氨酸取代的氨基酸残基包含野生型rsv f蛋白氨基酸序列的第159+291、176+190和89+231位中的至少一对。

4.如权利要求1所述的重组rsv蛋白，其特征在于，所述至少一个空腔填充突变是野生型rsv f蛋白氨基酸序列第67位的天冬酰胺突变。

5.如权利要求4所述的重组rsv蛋白，其特征在于，所述第67位的天冬酰胺突变为苯丙氨酸或色氨酸。

6.如权利要求1所述的重组rsv蛋白，其特征在于，f蛋白多肽的融合肽部分缺失。

7.如权利要求1所述的重组rsv蛋白，其特征在于，所述重组rsv f蛋白相较于野生型呼吸道合胞病毒f蛋白存在以下突变：

8.如权利要求7所述的重组rsv f蛋白，其特征在于，所述半胱氨酸取代选自h159c+i291c、k176c+s190c和a89c+l231c中的一种或多种。

9.如权利要求7所述的重组rsv f蛋白，其特征在于，所述融合肽缺失的部分至少包括野生型呼吸道合胞病毒f蛋白的第137～144位氨基酸残基。

10.如权利要求7-9中任一项所述的重组rsv f蛋白，其特征在于，所述半胱氨酸取代为h159c+i291c，f蛋白氨基酸序列第67位的天冬酰胺突变为色氨酸，所述融合肽缺失的部分包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈吉，柏浩，李菡，龚秋婷，胡颖嵩，姚文荣，杨克俭，洪坤学，刘勇，
申请(专利权)人：江苏瑞科生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：