【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，具体涉及一种ntrr1基因及其在调控烟草对青枯病菌抗性的应用。
技术介绍
1、烟草青枯病作为一种世界灾难性病害，严重威胁到我国各产区烟叶生产。目前生产上被广泛采用的农业、化学和生物防治措施只能够在有限范围内减轻青枯病造成的危害，均未取得让人十分满意的效果。培育抗青枯病的烟草品种是根本性的解决措施。
2、烟草青枯病(tobacco bacterial wilt)最早在19世纪80年代在美国东南部被发现，该病是由一种青枯雷尔氏菌(ralstonia solanacearum)造成的威胁全球烟草生产的灾难性土壤传播植物病害。我国烟草青枯病多发于南方烟区，而且近年来逐渐向北扩散。青枯菌寄主众多，其中包括多种经济作物。目前采用的一系列农业、化学和生物防治等措施只能在有限范围内减轻烟草青枯病带来的危害，但都没能取得令人满意的效果，而选育抗病品种则是控制该病害最为科学有效的方法。已有研究表明烟草青枯病抗性遗传类型十分复杂，利用不同烟草类型进行的抗性遗传分析表明，其抗性在不同烟草以及同种类不同品种之间的遗传规律均有较大差异，即使抗性来源于同一抗源品种之间，其遗传规律也不完全相同，但常见的烟草青枯病抗性为多基因控制的数量性状且具有一定的加性效应。所以利用传统经验育种方法，较难完成多基因之间的聚合，同时，受表型鉴定技术和抗病亲本供体的约束，烟草青枯病抗病品种的选育进展缓慢。
3、烟草青枯病常在高温高湿的条件下发生并迅速流行，发病时烟草整株均可受害，青枯病能使烟株叶片在绿色状态下发黄萎蔫，所以很形象的称之为
4、青枯病的抗病品种选育相对其他防治措施来讲是最根本、最稳定且最经济有效的防治方法(季学军等，2008)。美国利用ti448a抗源育成了一些对青枯病抗性较高的烤烟品种，如oxford26、db101和coker139等，在美国烟草种植的历史上被作为主要抗病品种的coker319、nc95和g-28便是由coker139进一步育成的。但高抗品种往往存在一些如产量和品质等方面不可忽视的缺陷，制约了其被大面积种植。因此研究青枯病的抗病基因，为烟草青枯病抗病分子育种和抗性机理研究提供可用的分子标记及基因资源。
技术实现思路
1、本专利技术的目的提供一种对烟草对青枯病菌抗性正向调控作用的ntrr1基因。
2、本专利技术的另一个目的提供ntrr1基因在调控烟草对青枯病菌抗性应用。
3、ntrr1基因及其在调控烟草对青枯病菌抗性的应用，所述ntrr1基因的cds序列如seq.id.no.1所示，所述调控为正向调控。
4、基因ntrr1在提高烟草对青枯病菌抗性的应用，提升烟草中的ntrr1的表达水平。
5、通过分子生物学手段提高烟草中ntrr1表达。
6、进一步的，所述分子生物学手段为基因编辑载体构建、超表达载体构建、农杆菌杆菌侵染中的一种或多种。
7、本专利技术提供一种基因ntrr1在提高烟草对青枯病菌抗性中的应用，提升ntrr1功能缺失或低表达的烟草中的ntrr1的表达水平，所述ntrr1功能缺失或低表达的烟草为体内ntrr1的表达水平低于野生型烟草k326中的ntrr1的表达水平。
8、本专利技术提供一种表达载体的应用，所述表达载体含有ntrr1基因并用于提高烟草对青枯病菌抗性。
9、进一步的，所述表达载体为pcambia1300载体。
10、本专利技术提供一种农杆菌在提高烟草对青枯病菌抗性的应用，利用所述农杆菌感染烟草，以提高烟草中ntrr1基因的表达，所述农杆菌含有表达载体，表达载体含有ntrr1基因。
11、进一步的，所述ntrr1基因的cds序列如seq.id.no.1所示，该序列与ncbi数据库loc107774820序列有100％一致性，与拟南芥基因at1g59940.1同源，是一个双元信号传导系统的反应调节子，与细胞分裂素信号转导相关，我们命名为ntrr1。
12、atggcaagaaacggcgtgttttcacggcggcgaagggcggagagagtggaggagtttgaa
13、gagttgttgccgttaacggagtcaactaacgaagttcatgttcttgctgttgatgatagt
14、cttgtggacagaatagtaattgaaaggctcctcaaaattacatcttgcaaagtgactaca
15、gtggatagtgggatgagagctttgaaatatcttggattggatgaagaacagagctctgtt
16、agaattgatggtttgaaggtggatctgataattacagattattgtatgcctggaatgact
17、ggctatgatttgctcaaaaagattaagggttcatcttttagagaaattccagttgtgatc
18、atgtcttctgaaaatgttttgactagaattgacagatgtttggaagaaggtgccgaagat
19、ttcctattgaaaccagtgaaattgtcggatgtaaaacgtttgaagagttacatgttcaac
20、gaggatcgatttagggaagaagaaaaaggaatgaacaagagaaagttgccggaaacatcg
21、tccgatgagtcatcaaccccaactctctcaccttcaccgtcaatgtcaccatcaccatcg
22、ccctcgccatcgcttgatctctcatcaaccccttcaccgccatccacttcatctccttca
23、tctcccaaagcactttcgtcgtccctctctattgattcatcgacacattccaccgattct
24、tccatgccctcttcgccaacatcaccaacaagacgactcaaaatgagcagccaagatttg
25、tga
26、本专利技术的有益效果在于：本专利技术提供一种对烟草对青枯病菌抗性正向调控作用的ntrr1基因，提供ntrr1基因在提高烟草对青枯病菌抗性中的应用，对烟草生长质量和产量带来正面影响。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.NtRR1基因及其在调控烟草对青枯病菌抗性的应用，其特征在于：所述NtRR1基因的CDS序列如SEQ.ID.NO.1所示，所述调控为正向调控。
2.基因NtRR1在提高烟草对青枯病菌抗性的应用，其特征在于，提升烟草中的NtRR1的表达水平。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，通过分子生物学手段提高烟草中NtRR1表达。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述分子生物学手段为基因编辑载体构建、超表达载体构建、农杆菌杆菌侵染中的一种或多种。
5.基因NtRR1在提高烟草对青枯病菌抗性中的应用，其特征在于，提升NtRR1功能缺失或低表达的烟草中的NtRR1的表达水平，所述NtRR1功能缺失或低表达的烟草为体内NtRR1的表达水平低于野生型烟草K326中的NtRR1的表达水平。
6.一种表达载体的应用，其特征在于，所述表达载体含有NtRR1基因并用于提高烟草对青枯病菌抗性。
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述表达载体为pCAMBIA1300载体。
8.一种农杆菌在提高烟草对
9.一种NtRR1过表达突变体和基因编辑敲除植株的获得方法，其特征在于：将NtRR1的全长CDS插入由CaMV 35S启动子驱动的pCAMBIA1300中，生成NtRR1的过表达构建体(pCAMBIA1300-NtRR1)，使用在线网站CRTSPR Multi Targeter(http://www.multicrispr.net/index.html)设计NtRR1的特定sgRNA片段，然后合成并整合到pORE-Cas9/gDNA载体中，构建NtRR1的基因编辑载体，将构建的载体转化到农杆菌菌株EHA105中，通过农杆菌介导的叶盘转化法生产转基因烟草植物，获得NtRR1过表达突变体和基因编辑敲除植株。
...【技术特征摘要】
1.ntrr1基因及其在调控烟草对青枯病菌抗性的应用，其特征在于：所述ntrr1基因的cds序列如seq.id.no.1所示，所述调控为正向调控。
2.基因ntrr1在提高烟草对青枯病菌抗性的应用，其特征在于，提升烟草中的ntrr1的表达水平。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，通过分子生物学手段提高烟草中ntrr1表达。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述分子生物学手段为基因编辑载体构建、超表达载体构建、农杆菌杆菌侵染中的一种或多种。
5.基因ntrr1在提高烟草对青枯病菌抗性中的应用，其特征在于，提升ntrr1功能缺失或低表达的烟草中的ntrr1的表达水平，所述ntrr1功能缺失或低表达的烟草为体内ntrr1的表达水平低于野生型烟草k326中的ntrr1的表达水平。
6.一种表达载体的应用，其特征在于，所述表达载体含有ntrr1基因并用于提高烟草对青枯病菌抗性。
7.根据权...
【专利技术属性】
技术研发人员：文柳璎，孙艺文，程立锐，刘旦，杨爱国，肖志亮，斯欢，耿锐梅，任民，
申请(专利权)人：中国农业科学院烟草研究所中国烟草总公司青州烟草研究所，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。