促进哺乳动物细胞表达蛋白正确折叠的分子伴侣质粒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种促进哺乳动物细胞表达蛋白正确折叠的分子伴侣质粒，其特征在于含有P4HB‑IRES‑HSPA8融合基因，其中P4HB基因的核酸序列如SEQ ID No.1所示，HSPA8基因的核酸序列如SEQ ID No.3所示，IRES的核酸序列如SEQ ID No.5所示。还公开了其在促进哺乳动物细胞表达蛋白正确折叠中的应用。本发明专利技术还公开了P4HB蛋白与HSPA8蛋白联合在促进哺乳动物细胞表达蛋白正确折叠中的应用。本发明专利技术的分子伴侣质粒可以有效帮助FAP蛋白实现正确折叠。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种促进哺乳动物细胞表达蛋白正确折叠的分子伴侣质粒及其应用，属于蛋白表达。

技术介绍

1、重组蛋白表达技术是指将编码目标蛋白的外源基因通过分子克隆的方法插入表达载体，随后使用表达载体侵染宿主细胞，通过宿主细胞自身的转录和翻译机制进行蛋白表达生产，再通过分离纯化获得目标蛋白的方法，至今已有50多年的历史。常用的表达用的宿主细胞包括大肠杆菌、酵母、昆虫和哺乳动物细胞等。

2、驯化后的哺乳动物细胞是现代重组蛋白生物技术的重要组成部分，常用的此类表达系统包括hek293和cho。由于哺乳动物细胞具有高度复杂的蛋白折叠和翻译后修饰的机制，通过其表达的重组蛋白具备正确折叠和修饰，以及最接近体内的天然形式等特点。哺乳动物细胞通常用于生产分泌蛋白、跨膜蛋白胞外区、重组抗体等，为现代生物医药的发展奠定了基础。然而对于某些结构极其复杂的蛋白，哺乳动物细胞在蛋白大量表达的模式下也无法完成全部目标蛋白的正确折叠，造成纯化后获得构象不正确的蛋白，影响蛋白的收率和后期的使用。

3、分子伴侣是一类可促进蛋白正确折叠的辅助蛋白，以热休克蛋白和二硫键异本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.P4HB蛋白与HSPA8蛋白联合在促进哺乳动物细胞表达蛋白正确折叠中的应用，其特征在于所述P4HB蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，所述HSPA8蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述表达的蛋白为FAP蛋白。

3.一种促进哺乳动物细胞表达蛋白正确折叠的分子伴侣质粒，其特征在于含有P4HB-IRES-HSPA8融合基因，其中P4HB基因的核酸序列如SEQ ID No.1所示，HSPA8基因的核酸序列如SEQ ID No.3所示，IRES的核酸序列如SEQ ID No.5所示。

4.根...

【技术特征摘要】

1.p4hb蛋白与hspa8蛋白联合在促进哺乳动物细胞表达蛋白正确折叠中的应用，其特征在于所述p4hb蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示，所述hspa8蛋白的氨基酸序列如seq id no.4所示。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述表达的蛋白为fap蛋白。

3.一种促进哺乳动物细胞表达蛋白正确折叠的分子伴侣质粒，其特征在于含有p4hb-ires-hspa8融合基因，其中...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈宇宁，张学娇，朱小冬，毕鸿燕，李亚楠，何群香，常淑英，周勇，宫元伟，姜威，张旭，张杰，徐文涛，岳守琴，
申请(专利权)人：义翘神州泰州科技有限公司，
类型：发明
国别省市：