【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及动物基因工程领域，具体而言，涉及一种ifnar1基因敲除动物模型的构建方法及相关应用。
技术介绍
1、干扰素是宿主为抵御病毒入侵由宿主天然免疫应答产生的细胞因子，可诱导宿主的强抗病毒状态。在病毒感染初期，生物个体本身分泌大量的干扰素来应对急性病毒感染。ⅰ型干扰素受体(ifnar1)是干扰素的通用受体。人i型干扰素受体基因定位于第21号染色体上，分布于细胞表面，至少含有两个亚单位，命名为α(ifnar-1)和β(ifnar-2)，它们属于ii类细胞因子受体家族。ifnar1是抗病毒感染的第一道防线，其本身是不发挥直接“抑杀”或者“中和”病毒的作用的，间接地依靠自分泌或旁分泌途径抗病毒感染。当配受体结合后会激活下游的蛋白激酶jak1与tyk2，触发效应蛋白发生酪氨酸磷酸化(包括jaks、tyk2、stat蛋白等)激活胞浆内的转录因子stat1与stat2，二者聚合后进入细胞核内协助irf9转录下游的一些效应基因，诱导细胞产生抗病毒蛋白，从而抑制病毒的复制，达到抗病毒的作用。如果将动物ifnar1基因敲除，体内的ifn无法与其受体ifnar1结合激活对调节生长、存活、分化、病原体抗性和抗病毒免疫至关重要的jak-stat信号通路，导致免疫反应降低，显著增加丙型肝炎、黄热病、麻疹、乳头状瘤、病毒感染性疾病的易感性，产生与人体相近的表型。
2、目前，缺乏有效的ifnar1基因敲除动物模型的研究和报道。
3、鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
1、本
2、本专利技术是这样实现的：
3、第一方面，本专利技术实施例提供了一种ifnar1基因敲除动物模型的构建方法，其包括：敲除目标动物的基因组上的目的序列，以获得ifnar1基因敲除动物；所述目的序列包括ifnar1基因的第2外显子～第10外显子。
4、第二方面，本专利技术实施例提供了如前述实施例所述的构建方法构建的ifnar1基因敲除动物模型在筛选免疫缺陷疾病或感染性疾病的药物中的应用。
5、第三方面，本专利技术实施例提供了用于ifnar1基因敲除的sgrna，所述sgrna的靶点序列选自seq id no:1～2中的至少一种。
6、第四方面，本专利技术实施例提供了一种用于构建ifnar1基因敲除动物模型的试剂或试剂盒，其包括前述实施例所述的sgrna。
7、本专利技术具有以下有益效果：
8、本专利技术提供了一种构建方法，该方法能够稳定、有效地构建ifnar1基因敲除动物模型，相对于其他动物模型而言，本专利技术构建的动物模型的寿命更长，药物代谢与人类更为相似，更有利于感染疾病机制的研究，可作为相关新药有效性和安全性评价研究的理想模型。
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1.一种Ifnar1基因敲除动物模型的构建方法，其特征在于，其包括：敲除目标动物的基因组上的目的序列，以获得Ifnar1基因敲除动物；所述目的序列包括Ifnar1基因的第2外显子～第10外显子。
2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述敲除目标动物的基因组上的目的序列的步骤包括：将针对所述目的序列的sgRNA与Cas9混合的混合物注射至入目标动物的受精卵，并移植到假孕动物中，以获得F0代的Ifnar1基因敲除动物；所述Cas9包括Cas9mRNA和Cas9蛋白中的至少一种。
3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述sgRNA的靶序列包括SEQ ID NO:1～2所示序列中的至少一种。
4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述sgRNA包括SEQ ID NO:3～4所示序列中的至少一种；
5.根据权利要求1～4任一项所述的构建方法，其特征在于，所述构建方法还包括：将所述Ifnar1基因敲除动物与野生型背景动物交配，以获得杂合子Ifnar1基因敲除动物。
6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征
7.根据权利要求1～4任一项所述的构建方法，其特征在于，所述目标动物包括大鼠。
8.如权利要求1～7任一项所述的构建方法构建的Ifnar1基因敲除动物模型在筛选疾病的药物或研究疾病的致病机制中的应用；
9.用于Ifnar1基因敲除的sgRNA，其特征在于，所述sgRNA的靶点序列选自SEQ ID NO:1～2中的至少一种；
10.一种用于构建Ifnar1基因敲除动物模型的试剂或试剂盒，其特征在于，其包括：权利要求9所述的sgRNA；
...【技术特征摘要】
1.一种ifnar1基因敲除动物模型的构建方法，其特征在于，其包括：敲除目标动物的基因组上的目的序列，以获得ifnar1基因敲除动物；所述目的序列包括ifnar1基因的第2外显子～第10外显子。
2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述敲除目标动物的基因组上的目的序列的步骤包括：将针对所述目的序列的sgrna与cas9混合的混合物注射至入目标动物的受精卵，并移植到假孕动物中，以获得f0代的ifnar1基因敲除动物；所述cas9包括cas9mrna和cas9蛋白中的至少一种。
3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述sgrna的靶序列包括seq id no:1～2所示序列中的至少一种。
4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述sgrna包括seq id no:3～4所示序列中的至少一种；
5.根据权利要求1...
【专利技术属性】
技术研发人员：高翔，史培良，吴正中，宁椿游，梁娟，琚存祥，
申请(专利权)人：江苏集萃药康生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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