包含变体多肽的组合物及其用途制造技术

本发明专利技术涉及变体多肽

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含变体多肽的组合物及其用途
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于
2021
年3月9日提交的美国临时申请
63/158,741、2021
年
12
月
28
日提交的美国临时申请
63/294,224
的优先权，将这些临时申请中的每一个的全部内容特此通过援引并入
。
[0003]序列表
[0004]本申请含有已以
ASCII
格式以电子方式提交且特此通过援引以其全文并入的序列表
。
创建于
2022
年3月7日的所述
ASCII
副本被命名为
A2186
‑
7046WO_SL.txt
，并且大小是
38,750
字节
。

技术介绍

[0005]成簇规律间隔短回文重复序列
(CRISPR)
和
CRISPR
相关
(Cas)
基因
(r/>统称为
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
一种变体多肽，相对于
SEQ ID NO:3
的亲本多肽，该变体多肽包含改变，其中该改变是表2的取代
。2.
如权利要求1所述的变体多肽，其中该取代是
P14R
取代
、E311R
取代
、D32R
取代
、I61R
取代
、G223R
取代
、N109R
取代
、
和
/
或
D719R
取代
。3.
如权利要求1或2所述的变体多肽，其中该变体多肽包含
a)P14R
取代
、E311R
取代
、
和
D32R
取代；
b)P14R
取代
、E311R
取代
、
和
G223R
取代；
c)P14R
取代
、E311R
取代
、D32R
取代
、
和
I61R
取代；以及
d)D32R
取代
、N109R
取代
、E311R
取代
、
和
D719R
取代
。4.
如权利要求1至3中任一项所述的变体多肽，其中该变体多肽进一步包含
K208G
取代
、D302G
取代
、D590G
取代
、E154G
取代
、D567G
取代
、L38G
取代
、D145G
取代
、C13G
取代
、T338G
取代
、P14G
取代
、D55G
取代
、K221G
取代
、K35G
取代
、
和
E736G
取代
。5.
一种变体多肽，该变体多肽包含与
SEQ ID NO:3
具有至少
95
％同一性的氨基酸序列并且相对于
SEQ ID NO:3
，包含在以下位置中的一个或多个处的取代：
P14、E311、D32、I61、G223、N109、
和
D719。6.
一种变体多肽，该变体多肽包含与
SEQ ID NO:3
具有至少
95
％同一性的氨基酸序列并且包含以下取代中的一个或多个：
P14R、E311R、D32R、I61R、G223R、N109R、
和
D719R。7.
一种变体多肽，该变体多肽包含与
SEQ ID NO:3
具有至少
95
％同一性的氨基酸序列并且相对于
SEQ ID NO:3
，包含在以下位置中的一个或多个处的取代：
K208、D302、D590、E154、D567、L38、D145、C13、T338、P14、D55、K221、K35、
和
E736。8.
一种变体多肽，该变体多肽包含与
SEQ ID NO:3
具有至少
95
％同一性的氨基酸序列并且包含以下取代中的一个或多个：
K208G、D302G、D590G、E154G、D567G、L38G、D145G、C13G、T338G、P14G、D55G、K221G、K35G、
和
E736G。9.
如权利要求1‑8中任一项所述的变体多肽，其中该变体多肽包含在
P14
处的取代
(
例如，
P14R
取代
)。10.
如权利要求1‑9中任一项所述的变体多肽，其中该变体多肽包含在
E311
处的取代
(
例如，
E311R
取代
)。11.
如权利要求1‑
10
中任一项所述的变体多肽，其中该变体多肽包含在
D32
处的取代
(
例如，
D32R
取代
)。12.
如权利要求1‑
11
中任一项所述的变体多肽，其中该变体多肽包含在
I61
处的取代
(
例如，
I61R
取代
)。13.
如权利要求1‑
12
中任一项所述的变体多肽，其中该变体多肽包含在
G223
处的取代
(
例如，
G223
取代
)。14.
如权利要求1‑
13
中任一项所述的变体多肽，其中该变体多肽包含在
N109
处的取代
(
例如，
N109R
取代
)。15.
如权利要求1‑
14
中任一项所述的变体多肽，其中该变体多肽包含在
D719
处的取代
(
例如，
D719R
取代
)。16.
如权利要求5所述的变体多肽，其中该变体多肽包含在以下位置处的取代：
P14(
例如，
P14R
取代
)、E311(
例如，
E311R
取代
)、D32(
例如，
D32R
取代
)、I61(
例如，
I61R
取代
)、G223(
例如，
G223
取代
)、N109(
例如，
N109R
取代
)、D719(
例如，
D719R
取代
)、
或其任何组合
。17.
如权利要求
16
所述的变体多肽，其中相对于
SEQ ID NO:3
，该变体多肽包含在以下
位置处的取代：
P14(
例如，
P14R
取代
)、E311(
例如，
E311R)、
和
D32(
例如，
D32R
取代
)(
例如，
P14R、E311R、D32R
变体多肽
)。18.
如权利要求
16
所述的变体多肽，其中相对于
SEQ ID NO:3
，该变体多肽包含在以下位置处的取代：
P14(
例如，
P14R
取代
)、E311(
例如，
E311R)、
和
G223(
例如，
G223R
取代
)(
例如，
P14R、E311R、G223R
变体多肽
)。19.
如权利要求
16
所述的变体多肽，其中相对于
SEQ ID NO:3
，该变体多肽包含在以下位置处的取代：
P14(
例如，
P14R
取代
)、E311(
例如，
E311R)、D32(
例如，
D32R
取代
)、
和
I61(
例如，
I61R
取代
)(
例如，
P14R、E311R、D32R
和
I61R
变体多肽
)。20.
如权利要求
16
所述的变体多肽，其中相对于
SEQ ID NO:3
，该变体多肽包含在以下位置处的取代：
D32R(
例如，
D32R
取代
)、N109(
例如，
N109R)、E311(
例如，
E311R
取代
)、
和
D719(
例如，
D719R
取代
)(
例如，
D32R、N109R、E311R
和
D719R
变体多肽
)。21.
如权利要求5‑
20
中任一项所述的变体多肽，其中该变体多肽包含在以下位置处的取代：
K208(
例如，
K208G
取代
)、D302(
例如，
D302G
取代
)、D590(
例如，
D590G
取代
)、E154(
例如，
E154G
取代
)、D567(
例如，
D567G
取代
)、L38(
例如，
L38G
取代
)、D145(
例如，
D145G
取代
)、C13(
例如，
C13G
取代
)、T338(
例如，
T338G
取代
)、P14(
例如，
P14G
取代
)、D55(
例如，
D55G
取代
)、K221(
例如，
K221G
取代
)、K35(
例如，
K35G
取代
)、
和
E736(
例如，
E736G
取代
)、
或其任何组合
。22.
如权利要求1‑
21
中任一项所述的变体多肽，其中相对于亲本多肽，该变体多肽表现出增加的与
RNA
指导物的二元复合物形成
。23.
如权利要求1‑
22
中任一项所述的变体多肽，其中相对于亲本二元复合物，包含该变体多肽的二元复合物表现出增加的稳定性
。24.
如权利要求1‑
23
中任一项所述的变体多肽，其中相对于亲本多肽，该变体多肽表现出增加的核酸酶活性
。25.
一种组合物，其包含如权利要求1‑
24
中任一项所述的变体多肽，其中该组合物进一步包含
RNA
指导物或编码该
RNA
指导物的核酸，其中该
RNA
指导物包含同向重复序列和间隔子序列
。26.
如权利要求
25
所述的组合物，其中该同向重复序列与
SEQ ID NO:4
‑
13
中的任一个具有至少
90
％同一性或者包含与
SEQ ID NO:14
或
SEQ ID NO:15
具有至少
90
％同一性的序列
。27.
如权利要求
25
所述的组合物，其中该同向重复序列与
SEQ ID NO:4
‑
13
中的任一个具有至少
95
％同一性或者包含与
SEQ ID NO:14
或
SEQ ID NO:15
具有至少
95
％同一性的序列
。28.
如权利要求
25
所述的组合物，其中该同向重复序列是
SEQ ID NO:4
‑
13
中的任一个或者包含
SEQ ID NO:14
或
SEQ ID NO:15
的序列
。29.
如权利要求
25
‑
28
中任一项所述的组合物，其中该间隔子序列的长度为约
15
个核苷酸至约
35
个核苷酸
。30.
如权利要求
25
‑
29
中任一项所述的组合物，其中该间隔子序列与靶核酸的靶链序列结合，并且其中该靶核酸序列的非靶链序列与原型间隔子相邻基序
(PAM)
序列相邻
。31.
如权利要求
30
所述的组合物，其中该
PAM
序列是5’‑
TTR
‑3’
、5
’‑
NTTR
‑3’
、5
’‑
NTTN
‑
3
’
、5
’‑
RTTR
‑3’
、5
’‑
ATTR
‑3’
、
或5’‑
RTTG
‑3’
，其中
N
是任何核苷酸，
Y
是
C
或
T
，并且
R
是
A
或
G。32.
如权利要求
31
所述的组合物，其中该
PAM
序列是5’‑
TTG
‑3’
、5
’‑
TTA
‑3’
、5
’‑
ATTG
‑3’
、5
’‑
TTTA
‑3’
、
或5’‑
TTTG
‑3’
。33.
如任一前述权利要求所述的变体多肽或组合物，其中该变体多肽进一步包含核定位信号
(NLS)。34.
如任一前述权利要求所述的变体多肽或组合物，其中该变体多肽进一步包含肽标签
、
荧光蛋白
、
碱基编辑结构域
、DNA
甲基化结构域
、
组蛋白残基修饰结构域
、
定位因子
、
转录修饰因子
、
光门控因子
、
化学诱导型因子或染色质可视化因子
。35.
一种包含核酸的组合物，该核酸编码如任一前述权利要求所述的变体多肽和
/
或
RNA
指导物
。36.
如权利要求
35
所述的组合物，其中该核酸经密码子优化以用于在细胞中表达
。37.
如权利要求
35
或
36
所述的组合物，其中该核酸可操作地连接至启动子
。38.
如权利要求
35
‑
37
中任一项所述的组合物，其中该核酸位于载体中
。39.
如权利要求
38
所述的组合物，其中该载体包括逆转录病毒载体
、<...

【专利技术属性】
技术研发人员：S，
申请(专利权)人：阿伯生物技术公司，
类型：发明
国别省市：