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家蚕表达猪繁殖与呼吸综合征疫苗蛋白GP5制造技术

技术编号:3984837 阅读:240 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种用家蚕表达猪呼吸与繁殖综合征疫苗蛋白GP5,按照如下方法制备而得:1)、转座质粒pFastBacHTbORF5的构建:以PRRSV全基因组序列为模板、以pE1、pE2为引物进行扩增;扩增产物E经BamHI、KpnI酶切后克隆到pFastBacHTb的BamHI、KpnI位点之间;2)、重组病毒的获得:先以pFastBacHTbORF5转化DH10Bac感受态;然后于SOC培养基上培养;选择PCR鉴定为阳性的菌接种,提取Bacmid;所提取的Bacmid为重组病毒rBmNPVBacmid/ORF5。本发明专利技术为深入研究GP5基因的功能以及研制PRRSV的新型疫苗与诊断试剂奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
用家蚕表达猪呼吸与繁殖综合征疫苗蛋白GP5,其特征是按照如下方法制备而得:  1)、转座质粒pFastBacHTbORF5的构建:  以PRRSV全基因组序列为模板、以pE1、pE2为引物进行扩增;扩增产物E经BamHI、KpnI酶切后克隆到pFastBacHTb的BamHI、KpnI位点之间,所得重组质粒命名为pFastBacHTbORF5;  2)、重组病毒的获得:  先以pFastBacHTbORF5转化DH10Bac感受态;然后于SOC培养基上培养;选择PCR鉴定为阳性的菌接种,提取Bacmid;所提取的Bacmid为重组病毒rBmNPVBacmid/ORF5。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:王丹云涛刘光清缪云根
申请(专利权)人:浙江大学
类型:发明
国别省市:86[中国|杭州]

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