一种制备造血干细胞和祖细胞的方法技术

本发明专利技术提供了一种制备造血干细胞和祖细胞的方法，用于从胚胎干细胞或者

【技术实现步骤摘要】
一种制备造血干细胞和祖细胞的方法


[0001]本专利技术涉及一种制备造血干细胞和祖细胞的方法
。
更具体地，本专利技术涉及通过体外培养，从胚胎干细胞（
Embryonic Sem Cell
，
ES
）细胞或者诱导的多能干细胞（
induced pluripotent stem cells
，
iPSC
）大规模生产造血干细胞和祖细胞的方法，由此制得的造血干细胞和祖细胞培养物及其用于分化成造血谱系细胞的用途
。

技术介绍

[0002]造血干细胞和祖细胞（
HSPC
）是骨髓（
BM
）细胞的一个亚群，其具有自我更新能力，并且能够产生造血谱系的所有细胞类型
。
造血干细胞移植是治疗某些恶性血液病的常用疗法，如多发性骨髓瘤
、
急性髓细胞白血病
、
骨髓增生异常综合征等
。
鉴于分化成任何血细胞的潜力，
HSPC
在产生不同的血细胞用于细胞疗法治疗不同本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1. 一种制备造血干细胞和祖细胞的方法，其中所述方法包括如下步骤：
a. 在
GSK
‑3抑制剂的存在下，诱导胚胎干细胞或诱导的多能干细胞分化成胚状体；和
b. 在包含选自下述的一种或多种因子的造血分化培养基中诱导步骤
a
中形成的
EB
分化成造血干细胞和祖细胞：
BMP4、SCF、SB431542
；其中所述步骤
a
包括步骤
a1
，所述步骤
a1
是在
GSK
‑3抑制剂的存在下，在第0天进行诱导；其中所述步骤
b
中所述诱导包含在
BMP4
存在下进行诱导步骤
b1
，在
BMP4、SCF
和
SB431542
存在下进行诱导步骤
b2
，以及在
SCF
存在下进行诱导步骤
b3。2.
根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤
a1
是在
GSK
‑3抑制剂和
ROCK
抑制剂的存在下，在第0天进行诱导
。3. 根据权利要求2所述的方法，其中所述
GSK
‑3抑制剂为
CHIR 99021
，所述
ROCK
抑制剂为
Rki。4.
根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤
a
还包括步骤
a2
，所述步骤
a2
是在
GSK
‑3抑制剂的存在下，在第1天再次进行诱导
。5. 根据权利要求4所述的方法，其中所述步骤
a2
是在
CHIR 99021
的存在下，在第1天再次进行诱导
。6.
根据权利要求1‑5中任一项所述的方法，其中所述方法包括下述步骤：
a1
）在补充了
CHIR 99021
和
Rki
的
StemScale PSC
悬浮完全培养基中悬浮培养
iPSC
；
a2
）在补充了
CHIR 99021
的
StemScale PSC
悬浮完全培养基中继续悬浮培养，以形成
EB
；
b1
）在补充了
BMP4、FGF2、VEGF
的造血分化培养基1中悬浮培养
EB
；
b2
）在补充了
BMP4、SCF、FGF2、VEGF
和
SB431542
的造血干细胞扩增培养基中继续悬浮培养；
b3
）在补充了
SCF、FGF2
和
VEGF
的造血干细胞扩增培养基中进一步悬浮培养，形成
HSPC
...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘晓东，贺智勇，周怡辰，
申请(专利权)人：苏州艾凯利元生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：