基于制造技术

本发明专利技术公开了一种基于

【技术实现步骤摘要】
基于P
‑
ERCA的赭曲霉毒素A可视化检测方法及试剂盒


[0001]本专利技术涉及一种赭曲霉毒素
A
的检测方法，具体涉及一种基于挂锁式指数级滚环扩增
(P
‑
ERCA)
的赭曲霉毒素
A
可视化检测方法及试剂盒，属于生化检测

。

技术介绍

[0002]赭曲霉毒素
A(OTA)
广泛存在于被霉菌污染的大麦
、
玉米
、
燕麦和大豆等农作物中，当动物摄入了霉变的饲料后，赭曲霉毒素
A
会在动物体内积累并随着被加工咸肉制品后，进入人体进而侵害肝脏和肾脏，同时还对人体的免疫力造成损害
。
由于赭曲霉毒素
A
在真菌毒素中的毒性最强
、
分布最广
、
与人类健康关系最密切，所以具有高灵敏度的
OTA
微量检测方法对监测动物饲料质量安全以及保护人类健康具有重大的意义
。
[0003]目前检测粮食和饲本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种基于
P
‑
ERCA
的赭曲霉毒素
A
可视化检测方法，其特征在于，包括：
S1、
使修饰在赭曲霉毒素
A
适配体上的第一修饰物与固定在固相载体的第二修饰物特异性结合，之后使所述赭曲霉毒素
A
适配体与单链
DNA
引物杂交结合，获得第一液相反应体系；
S2、
在所述第一液相反应体系中加入赭曲霉毒素
A
，并使赭曲霉毒素
A
与所述赭曲霉毒素
A
适配体特异性结合，以使至少部分的所述单链
DNA
引物与所述赭曲霉毒素
A
适配体分离，并游离于液相反应体系中，从而获得第二液相反应体系；
S3、
从所述第二液相反应体系中分离出上清液，并基于所述上清液构建挂锁式指数级滚环扩增反应体系，再进行挂锁式指数级滚环扩增，获得含有目标
DNA
的第三液相反应体系；
S4、
以修饰有显色标记的信号探针和固定有检测探针的试纸条对所述第三液相反应体系进行检测，从而实现对赭曲霉毒素
A
的可视化检测，其中所述信号探针
、
检测探针的核苷酸序列分别与所述目标
DNA
的部分核苷酸序列互补
。2.
根据权利要求1所述的可视化检测方法，其特征在于，所述赭曲霉毒素
A
适配体的核苷酸序列如
SEQ ID NO.1
所示；所述单链
DNA
引物的核苷酸序列如
SEQ ID NO.2
所示
。3.
根据权利要求1所述的可视化检测方法，其特征在于，所述挂锁式指数级滚环扩增反应体系还包含
DNA
连接酶
、
脱氧核苷酸三磷酸
、DNA
聚合酶和挂锁式模板探针
。4.
根据权利要求3所述的可视化检测方法，其特征在于，所述挂锁式模板探针的5′
端修饰有磷酸基团，且所述挂锁式模板探针的核苷酸序列中有三个切刻内切酶酶切位点
。5.
根据权利要求3或4所述的可视化检测方法，其特征在于，所述挂锁式模板探针的核苷酸序列如
SEQ ID NO.3<...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈伟，王师沂，陈琦，姚丽，吴倩，姚帮本，陈赵然，陆华进，
申请(专利权)人：合肥工业大学，
类型：发明
国别省市：