【技术实现步骤摘要】
一种液滴数字PCR定量方法及系统
[0001]本专利技术属于微流控
、
液滴数字
PCR
系统开发
、
生物医学图像处理及生命科学仪器
,涉及一种液滴数字
PCR
定量方法及系统
。
技术介绍
[0002]聚合酶链式反应
(Polymerase chain reaction
,简称
PCR)
是基于
DNA
分子的双螺旋和半保留复制规律发展的一种在生物体外复制特定
DNA
片段的核酸合成技术
。PCR
扩增的主要流程是通过在体外提供合适的反应温度,把核酸分子扩增需要的物质加入到反应室中,包括模板
DNA
分子,脱氧核糖核苷酸,引物和
DNA
聚合酶,通过控制温度的变化来控制
PCR
扩增过程中的三个步骤,分别为变性,退火和延伸
。
请参阅图1和图2,分别显示为体内
DNA
分子复制的示意图和 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种液滴数字
PCR
定量方法,其特征在于,包括以下步骤:液滴产生步骤:采用液滴发生器生成多个作为微反应腔室的液滴,并将液滴注入微流道板内,多个液滴在所述微流道板内呈单层排布;图像获取步骤:采用光学模块对多个液滴在明场通道和荧光通道下进行成像以获取明场图像和荧光图像;明场图像处理步骤:在所述明场图像中确定液滴的位置和大小信息;荧光图像处理步骤:对所述荧光图像进行图像增强处理;液滴信号强度统计与计数步骤:基于所述明场图像处理步骤得到的液滴的位置信息和尺寸信息在所述荧光图像中分割出每个液滴,并在掩膜图像中画出分割出来的液滴,统计分割出的每个液滴的灰度值信息并进行分类,定量阳性液滴数目和阴性液滴数目
。2.
根据权利要求1所述的液滴数字
PCR
定量方法,其特征在于:所述图像增强处理包括去噪处理
、
渐晕矫正处理及自适应均衡化处理中的至少一种
。3.
根据权利要求2所述的液滴数字
PCR
定量方法,其特征在于:所述渐晕矫正处理包括利用多项式曲面拟合方法对荧光图像进行暗角补偿
。4.
根据权利要求1所述的液滴数字
PCR
定量方法,其特征在于:所述液滴发生器包括热泡式喷墨打印头
。5.
根据权利要求1所述的液滴数字
PCR
定量方法,其特征在于,所述光学模块包括
CCD
摄像头,所述图像获取步骤包括:摄像头第一次移动定位步骤:基于光学模块提供的流道板每张图像的
x
轴和
y
轴位置信息移动摄像头以在
x
‑
y
平面上定位欲拍摄位置,并调节
z
轴以使摄像头对焦,更新并记录
z
轴坐标以获得每张对焦良好的图像的
x
轴
、y
轴
、z
轴位置;摄像头第二次移动成像步骤:基于更新的位置坐标信息移动摄像头对流道板分别在...
【专利技术属性】
技术研发人员:祝明杰,吴炫烨,
申请(专利权)人:上海新微技术研发中心有限公司,
类型:发明
国别省市:
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