一种抑制制造技术

本发明专利技术提供了一种靶向

【技术实现步骤摘要】
一种抑制TOP1基因表达的干扰RNA及其应用


[0001]本专利技术涉及分子生物学与生物医药
，具体涉及一种抑制
TOP1
表达的干扰
RNA
，特别是
siRNA
，及其应用
。

技术介绍

[0002]拓扑异构酶
(Topoisomerases)
是高等真核生物细胞中必不可少的一种酶
。
拓朴异构酶
I(TOP1)
属于
I
型拓朴异构酶，可以与
DNA
形成
TOP1
‑
DNA
切割复合体
(TOP1
‑
DNA cleavage complex
，
TOP1cc)
，催化
DNA
形成瞬时的单链断裂，且作用过程无需
ATP
水解提供能量
。TOP1
对磷酸骨架的剪切
、
重新连接作用可以在
DNA
复制
、/>转录
、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种靶向
TOP1
基因的干扰
RNA
，其特征在于，所述干扰
RNA
的靶位点序列包含
SEQ ID NO
：1‑
15
中的任一个或两个以上所示的核苷酸序列
。2.
根据权利要求1所述的干扰
RNA
，其特征在于，所述的干扰
RNA
包含
siRNA、dsRNA、shRNA、aiRNA
或
miRNA
中一种或两种以上的组合；优选的，所述的干扰
RNA
为
siRNA。3.
根据权利要求1或2所述的干扰
RNA
，其特征在于，所述干扰
RNA
还包括悬挂碱基；优选的，所述的干扰
RNA
包含1‑
10
个悬挂碱基
。4.
根据权利要求3所述的干扰
RNA
，其特征在于，所述的悬挂碱基位于所述的干扰
RNA
的正义链和
/
或反义链的3’
末端
。5.
根据权利要求3或4所述的干扰
RNA
，其特征在于，所述的悬挂碱基为脱氧核苷；优选的，所述的悬挂碱基为
dTdT、dTdC
或
dUdU。6.
根据权利要求1‑5任一所述的干扰
RNA
，其特征在于，所述的干扰
RNA
包含正义链和
/
或反义链；优选的，所述的正义链包含
SEQ ID NO
：
16
‑
30
中的任一个或两个以上所示的核苷酸序列；优选的，所述的反义链包含
SEQ ID NO
：
31
‑
45
中的任一个或两个以上所示的核苷酸序列
。7.
根据权利要求1‑6任一所述的干扰
RNA
，其特征在于，所述干扰
RNA
还包括至少一个修饰；所述的修饰包括在碱基
、
糖环和
/
或磷酸盐的化学结构上进行的修饰；优选的，碱基的修饰包括但不限于5位嘧啶修饰
、8
位嘌呤修饰和
/
或5‑
溴尿嘧啶取代；优选的，所述的糖环的修饰包括但不限于
2'
‑
OH
被
H、OZ、Z、halo、SH、SZ、NH2、NHZ、NZ2或
CN
基团取代，其中
Z
为烷基基团；优选的，所述的磷酸骨架修饰包括但不限于硫代磷酸修饰
。8.
根据权利要求7所述的干扰
RNA
，其特征在于，所述的修饰还包括具有肌苷
、
辫苷
、
黄嘌呤
、2'
‑
甲基核糖
、
非天然磷酸二酯键
(
如甲基膦酸酯
、
硫代膦酸酯
)
和
/
或肽的核苷酸
。9.
一种权利要求1‑8任一所述的干扰
RNA
的递送系统，其特征在于，所述的递送系统包含权利要求1‑8任一所述的干扰
RNA
和载体
。10.
根据权利要求9所述的递送系统，其特征在于，所述的载体为病毒载体或非病毒载体；优选的，所述病毒载体包括：慢病毒载体
、
逆转录病毒载体
、
腺病毒载体
、
腺相关病毒载体
、
痘病毒载体或疱疹病毒载体中一种或两种及以上的组合；优选的，所述非病毒载体包括：脂质体
、
脂质纳米颗粒
、
聚合物
、
多肽
、
抗体
、
适配体或
N
‑
乙酰半乳糖胺
(GalNAc)
中任一种或两种及以上的组合
。11.
根据权利要求
10
所述的递送系统，其特征在于，所述脂质纳米颗粒
/
脂质体包括：阳离子脂质
、
中性脂质
、
聚乙二醇脂质
、
甾族脂质或阴离子脂质中的一种或两种以上组合
。12.
根据权利要求
11
所述的递送系统，其特征在于，所述阳离子脂质包括：十八酰胺
(SA)、
溴化月桂基三甲基铵
、
溴化十六烷基三甲基铵
、
溴化肉豆蔻基三甲基铵
、
溴化二甲基二
‑
十八铵
(DDAB)、[(4
‑
羟基丁基
)
氮杂二烷基
]
双
(
己烷
‑6，1‑
二基
)
双
(2
‑
己基癸酸酯
)(ALC
‑
0315)、1,2
‑
二油酰基氧基
‑3‑
(
三甲基铵基
)
丙烷
(DOTAP)、1,2
‑
二
‑
(9Z
‑
十八烯酰基
)
‑
3
‑
三甲基铵
‑
丙烷和
1,2
‑
二
‑
十六酰基
‑3‑
三甲基铵
‑
丙烷
、3
β
‑
[N
‑
(N',N'
‑
二甲基氨基乙烷
)
‑
氨基甲酰基
]
胆固醇
(DC
胆固醇
)、
二甲基二十八烷基铵
(DDA)、1,2
‑
二肉豆蔻酰基
‑3‑
三甲基铵丙烷
(DMTAP)、
二棕榈酰
(C16:0)
三甲基铵丙烷
(DPTAP)、
二硬脂酰基三甲基铵丙烷
(DSTAP)、N
‑
[1
‑
(2,3
‑
二烯丙氧基
)
丙基
]
‑
N,N,N
‑
三甲基氯化铵
(DOTMA)、N,N
‑
二油酰基
‑
N,N
‑
二甲基氯化铵
(DODAC)、1,2
‑
二油酰基
‑
sn
‑
丙三氧基
‑3‑
乙基磷酸胆碱
(DOEPC)、1,2
‑
二油酰基
‑3‑
二甲基铵丙烷
(DODAP)、1,2
‑
二亚油基氧基
‑3‑
二甲基氨基丙烷
(DLinDMA)、1,2
‑
二
‑
十四酰基
‑3‑
二甲基铵
‑
丙烷
、1,2
‑
二
‑
十六酰基
‑3‑
二甲基铵
‑
丙烷和
1,2
‑
二
‑
十八酰基
‑3‑
二甲基铵
‑
丙烷
、1,2
‑
二油酰基
‑
c
‑
(4'
‑
三甲基铵
)
‑
丁酰基
‑
sn
‑
甘油
(DOTB)、
二
‑
十八酰胺
‑
丙氨酰基精胺
、SAINT
‑
2、
聚阳离子脂质
2,3
‑
二油酰基氧基
‑
N
‑
[2(
精胺
‑
羧酰氨基
)
乙基
]
‑
N,N
‑
二甲基
‑1‑
丙铵三氟乙酸盐
(DOSPA)、
(JK
‑
0315
‑
CA)
中的一种或两种以上的组合
。13.
根据权利要求
11
所述的递送系统，其特征在于，所述中性脂质包括：
1,2
‑
二硬脂酰
‑
sn
‑
甘油
‑3‑
磷酸胆碱
(DSPC)、1,2
‑
二棕榈酰
‑
sn
‑
甘油
‑3‑
磷酸胆碱
(DPPC)、1,2
‑
二油酰
‑<...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨脉，林美娜，贾宏丽，陈晓萌，郭军，王庆彬，赵宣，
申请(专利权)人：北京键凯科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：