一种尿液样本制造技术

本发明专利技术公开一种尿液样本

【技术实现步骤摘要】
一种尿液样本RNA保存液及应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，具体为一种尿液样本
RNA
保存液及应用
。

技术介绍

[0002]性传播疾病
(Sexually Transmitted Disease,STD)
是指性接触或类似性行为引起的一组感染性疾病
。STD
的常见病原体包括，病毒
、
衣原体
、
支原体
、
螺旋体
、
细菌
、
真菌
、
原虫和寄生虫等
。
[0003]STD
主要是有涂片镜检法
、
培养法
、
胶体金和分子检测法，各种方法各有优劣势
。
相比而言，分子检测更有优势
。
分子检测技术，尤其是
RNA
检测技术，因其灵敏
、
特异和无创的明显优势，为非淋菌性尿道炎
(nongonococcal urethritis
，
NGU)
的精确诊断提供了有利的工具
。RNA
检测技术的出现，极大地提高了检测的敏感性和特异性，相比其他方法敏感性更高
。
另外，因
RNA
在死亡的病原体中很快降解，故以
RNA
为靶标可以直观反映病原体的存在状态，辅助进行疗效监测，指导临床精准用药，解决目前国内普遍存在的过度治疗，尤其是抗生素滥用问题，大幅降低整体医疗费用，缩短治疗时间，建议作为非淋菌性尿道炎的首选检测方法
。
[0004]尿液样本一般仅适用于
RNA
检测方法，其优点为无创
、
方便
、
敏感性和特异性高
。
采用尿液标本进行检测，解除了男性患者通过尿道拭子采样的痛苦，适合所有疑似患者，无论有无临床症状
。
研究表明，虽然临床推荐采集清晨第一次尿，或停止排尿后
2h
的首段尿，但实际应用中任何时候采集的尿液对检测结果都没有明显影响
。
采集尿样时尿道口也无需消毒
。
[0005]作为一种非侵入性的方法，采用尿液进行诊断检测大大提高了患者的便利性，然而，尿液中核酸含量较低，尿液中含大量的核酸酶，尿液样本分离后，其中
RNA
非常不稳定，极易被降解，通常需要在低温
(
‑
80℃)
以下保存，这就限制了尿液样本在
STD
的应用
。
因此，开发一种能有效防止尿液样本中
RNA
降解同时又不影响后续检测结果的尿液
RNA
保存试剂，对尿液样本在
STD
领域应用具有重要意义，同时也可拓展尿液样本在临床其他方面检测的应用
。
[0006]现有技术的不足：
[0007]目前，市面上针对
RNA
样本保存产品较少，且存在如下缺陷：
[0008]绝大部分专利针对的样本类型为组织
、
血液
、
拭子等
RNA
含量较高的样本，针对尿液等
RNA
含量很低的体液样本的保存液稀缺
。
且针对尿液样本，主要是用于对尿沉渣中核酸保存，尿液在保存前往往需要离心收集尿沉渣；现有的针对尿液
RNA
保存的保护剂如知名的
Norgen
的尿液保存管，保存成本高，对样本量有一定的要求；现有的保护剂中使用的还原剂如
β
‑
巯基乙醇
、
二硫苏糖醇
DTT
效果较差，一般只能维持两至三天，需要定期添加，才能保持试剂性能
。
因此，需要寻找更稳定的还原剂，延长保护剂的保存效果对样本的保存应用也有一定意义
。

技术实现思路

[0009]本专利技术的目的在于提供一种尿液样本
RNA
保存液及应用，以解决上述
技术介绍
中提出的问题
。
[0010]一种尿液样本
RNA
保存液，由以下材料组成：蛋白变性剂
、
还原剂
、
核酸酶抑制剂
、
缓冲液
、
助沉剂和表面活性剂，其中，
[0011]蛋白变性剂的浓度为
1—4mol/L
；
[0012]还原剂的浓度为
0.06—0.1mol/L
；
[0013]核酸酶抑制剂的浓度为
0.012—0.06mol/L。
[0014]作为本专利技术的进一步改进，由以下材料组成：蛋白变性剂
、
还原剂
、
核酸酶抑制剂
、
缓冲液
、
助沉剂和表面活性剂，其中，
[0015]蛋白变性剂的浓度为
2mol/L
；
[0016]还原剂的浓度为
0.08mol/L
；
[0017]核酸酶抑制剂
0.05mol/L。
[0018]作为本专利技术的进一步改进，所述蛋白变性剂为异硫氰酸胍和盐酸胍中的至少一种
。
[0019]作为本专利技术的进一步改进，所述还原剂为三
(2
‑
羰基乙基
)
磷盐酸盐
(TCEP
‑
HCl)。
[0020]作为本专利技术的进一步改进，所述核酸酶抑制剂为乙二胺四乙酸钠盐和十二烷基硫酸钠中的至少一种，其中：
[0021]乙二胺四乙酸钠盐的浓度为
0.012—0.06mol/L
；
[0022]十二烷基硫酸钠的浓度在保存液中浓度为
0.4
％
—0.8
％
。
[0023]作为本专利技术的进一步改进，所述缓冲液为柠檬酸
‑
柠檬酸钠缓冲液，所述柠檬酸
‑
柠檬酸钠缓冲液的
Ph
范围为3‑
6.6。
[0024]作为本专利技术的进一步改进，所述助沉剂为
PEG8000
和异丙醇，其中：
[0025]PEG8000
在保存液中浓度为6％
—10
％；
[0026]异丙醇在保存液中浓度为4％
—12
％
。
[0027]作为本专利技术的进一步改进，所述表面活性剂为吐温
20
，所述吐温
20
在保存液中浓度为2％
—6
％
。
[0028]作为本专利技术的进一步改进，所述蛋白变性剂
、
还原剂
、
核酸酶抑制剂
、
缓冲液
、
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种尿液样本
RNA
保存液，其特征在于：由以下材料组成：蛋白变性剂
、
还原剂
、
核酸酶抑制剂
、
缓冲液
、
助沉剂和表面活性剂，其中，蛋白变性剂的浓度为
1—4mol/L
；还原剂的浓度为
0.06—0.1mol/L
；核酸酶抑制剂的浓度为
0.012—0.06mol/L。2.
根据权利要求1所述的尿液样本
RNA
保存液，其特征在于：由以下材料组成：蛋白变性剂
、
还原剂
、
核酸酶抑制剂
、
缓冲液
、
助沉剂和表面活性剂，其中，蛋白变性剂的浓度为
2mol/L
；还原剂的浓度为
0.08mol/L
；核酸酶抑制剂
0.05mol/L。3.
根据权利要求1所述的尿液样本
RNA
保存液，其特征在于：所述蛋白变性剂为异硫氰酸胍和盐酸胍中的至少一种
。4.
根据权利要求1所述的尿液样本
RNA
保存液，其特征在于：所述还原剂为三
(2
‑
羰基乙基
)
磷盐酸盐
(TCEP
‑
HCl)。5.
根据权利要求1所述的尿液样本
RNA
保存液，其特征在于：所述核酸酶抑制剂为乙二胺四乙酸钠盐和十二烷基硫酸钠中的至少一种，其中：乙二胺四乙酸钠盐的浓度为
0.012—0.06mol/L
；十二烷基硫酸钠的浓度在保存液中浓度为
0.4

【专利技术属性】
技术研发人员：何伟，杨义兵，陈世兴，谯梦婷，
申请(专利权)人：上海格诺生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：