一种生物合成高活低毒素三型胶原蛋白的方法技术

本发明专利技术公开了一种生物合成高活低毒素三型胶原蛋白的方法，包括，选择和设计目的基因；构建目的基因的表达载体；将载体导入宿主细胞并转染和表达；培养优化并蛋白质纯化

【技术实现步骤摘要】
一种生物合成高活低毒素三型胶原蛋白的方法


[0001]本专利技术涉及生物工程领域，特别是一种生物合成高活低毒素三型胶原蛋白的方法
。

技术介绍

[0002]目前，胶原蛋白是动物体内含量最多
、
分布最广的蛋白质，是结缔组织的主要组成成分，三型胶原蛋白是一种间质胶原，由3条
α1三链组成，它是皮肤
、
血管等组织的主要纤维蛋白成分之一，三型胶原蛋白通常与一型胶原蛋白共生，作为一种伴生胶原蛋白，三型胶原蛋白在哺乳动物体内多以富有弹性的薄纤维层的形式与一型胶原形成纤维组织，三型胶原蛋白在人体创伤愈合
、
组织修复中发挥重要作用，在皮肤修复敷料中有良好的应用效果，三型胶原蛋白呈现出独特的三螺旋结构，三螺旋结构是三型胶原蛋白具有良好生物功能的关键因素，因此，从动物组织中提取三型胶原蛋白的关键，是在保证其纯度的前提下，在提取过程中保持三型胶原蛋白的结构完整性，防止其发生变性
。
因此，获取高活低毒素三型胶原蛋白的挑战之一是实现足够的表达水平，某些蛋白质在哺乳动物细胞中表达水平较本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种生物合成高活低毒素三型胶原蛋白的方法，其特征在于：包括，选择和设计目的基因；构建目的基因的表达载体；将载体导入宿主细胞并转染和表达；培养优化并蛋白质纯化
。2.
如权利要求1所述的生物合成高活低毒素三型胶原蛋白的方法，其特征在于：所述选择和设计目的基因具体包括，从基因数据库中获取牛的Ⅲ型胶原蛋白的基因序列
GenBank
，在选择基因之后，对基因序列进行优化，确保高效的表达和蛋白质稳定性
。3.
如权利要求2所述的生物合成高活低毒素三型胶原蛋白的方法，其特征在于：所述对基因序列进行优化具体包括，获取与目标有关的植物胶原蛋白的基因序列和蛋将基因的密码子序列优化为目标宿主细胞的常用密码子，提高翻译效率，减少折叠问题；选择适当的启动子，确保在宿主细胞中实现高水平的基因表达；在基因序列中添加稳定性元素
5'UTR
，提高信使
RNA
的稳定性；根据蛋白质结构预测，避免在基因序列中包含可能导致不稳定的区域；使用生物信息学工具来分析基因序列，预测潜在的结构问题并进行优化；在基因序列中加入可以增强蛋白质正确折叠的序列，提高蛋白质的稳定性和生物活性；使用生物信息学工具预测目标Ⅲ型胶原蛋白的结构，找出可能的不稳定或折叠问题
。4.
如权利要求1所述的生物合成高活低毒素三型胶原蛋白的方法，其特征在于：所述构建目的基因的表达载体具体包括，从
GenBank
数据库中选择一个含有多克隆位点和启动子
、
选择性标...

【专利技术属性】
技术研发人员：史海明，
申请(专利权)人：水剥离上海医疗美容有限公司，
类型：发明
国别省市：