分离的环状制造技术

本发明专利技术涉及一种分离的环状

【技术实现步骤摘要】
分离的环状RNA及其用途


[0001]本专利技术涉及生物工程领域，具体地，本专利技术涉及一种分离的环状
RNA
及其用途，更具体地，本专利技术涉及一种分离的环状核酸分子
、
分离的肽段
、
构建体
、
重组细胞
、
试剂在制备药物中的用途
、
药物组合物及其用途
、
提高细胞线粒体呼吸链功能的方法
、
促进细胞产生
ATP
的方法和降低细胞活性氧的方法
。

技术介绍

[0002]线粒体是哺乳动物最重要的细胞器，负责细胞内约
90
％的
ATP
生成，并且与细胞凋亡，钙信号调控，氧化应激以及细胞衰老等基本生理活动都有密切关系
。
线粒体功能异常是一个非常严重的威胁公共健康的问题
。
除了与衰老
、
衰老相关疾病相关，线粒体功能异常还与多种线粒体遗传疾病等密切相关，包括脑疾病
、
心肌病和神经退行性疾病等
。
这些病人生活状况非常糟糕，生活几乎不能自理，给病人本人和家属带来了巨大影响，而目前一直没有特效的治疗这一类疾病的方法
。
线粒体功能异常与人们的健康密切相关，调控线粒体功能，对于治疗线粒体疾病，意义重大，将极大的改善人们的健康状况
。
[0003]因此，亟需提供一种治疗线粒体功能异常的药物
。

技术实现思路
<br/>[0004]本专利技术旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一
。
为此，本专利技术提供了一种分离的
CircND3、
分离的肽段
、
构建体
、
重组细胞
、
促进或抑制
CircND3
表达或活性的试剂在制备药物中的用途
、
药物组合物及其用途
、
提高细胞线粒体呼吸链功能的方法
、
促进细胞产生
ATP
的方法和降低细胞活性氧的方法
。
[0005]本专利技术是基于专利技术人的下列发现而完成的：
[0006]人的
ND3
基因位于线粒体基因组上
(
位置：
10049..10394)
，编码呼吸链蛋白
ND3
蛋白
。
专利技术人经过实验首次发现，在人体多个细胞
(
如上皮细胞
、
癌细胞和
GZF2
成纤维细胞
)
中，
ND3
基因可通过转录形成一个首尾相连的长度为
246bp
的环状
RNA
，即为环状
ND3(
又称
Circ
‑
ND3)。
专利技术人通过实验惊喜地发现，敲低细胞中
Circ
‑
ND3
的表达水平，可促进
ATP
生成，且可抑制
ROS
的产生
。
因此，通过调节细胞中
Circ
‑
CYTB
的表达水平，可以特异性调控细胞的呼吸链功能，可有效地治疗和预防线粒体功能异常相关疾病
。
人的
ND3
基因序列具有如
SEQ ID NO:3
所示的核苷酸序列，其中划线部分为
CircND3
序列
。
[0007]ATAAACTTCGCCTTAATTTTAATAATCAACACCCTCCTAGCCTTACTACTAATAATTATTACATTTTGACTACCACAACTCAACGGCTACATAGAAAAATCCACCCCTTACGAGTGCGGCTTCGACCCTATATCCCCCGCCCGCGTCCCTTTCTCCATAAAATTCTTCTTAGTAGCTATTACCTTCTTATTATTTGATCTAGAAATTGCCCTCCTTTTACCCCTACCATGAGCCCTACAAACAACTAACCTGCCACTAATAGTTATGTCATCCCTCTTATTAATCATCATCCTAGCCCTAAGTCTGGCCTATGAGTGACTACAAAAAGGATTAGACTGAACCGAAT(SEQ ID NO:3)。
[0008]在本专利技术的一个方面，本专利技术提出了一种分离的环状核酸分子
。
根据本专利技术的实施例，所述分离的环状核酸分子具有
SEQ ID NO:1
所示的核苷酸序列
。
专利技术人经过实验发
现，上述分离得到的环状核酸分子在调控呼吸链功能中起到重要作用
。
[0009]需要说明的是，分离的环状核酸分子的结构为
SEQIDNO
：1所示的核苷酸序列转录后经剪接形成的首尾相连的环状结构
。
[0010]ACAACTCAACGGCTACATAGAAAAATCCACCCCTTACGAGTGCGGCTTCGACCCTATATCCCCCGCCCGCGTCCCTTTCTCCATAAAATTCTTCTTAGTAGCTATTACCTTCTTATTATTTGATCTAGAAATTGCCCTCCTTTTACCCCTACCATGAGCCCTACAAACAACTAACCTGCCACTAATAGTTATGTCATCCCTCTTATTAATCATCATCCTAGCCCTAAGTCTGGCCTATGAGTGACT(SEQ ID NO:1)。
[0011]在本专利技术的另一方面，本专利技术提出了一种分离的肽段
。
根据本专利技术的实施例，由前述的分离的环状核酸分子编码
。
由此，采用前述的分离的环状核酸分子可编码得到分离的环状核酸分子
。
[0012]在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了一种构建体
。
根据本专利技术的实施例，所述构建体携带前述的分离的环状核酸分子
。
利用该构建体可以有效地用于表达前述分离的肽段，尤其是在原核生物或者低等真核生物表达体系中可以有效地表达前述分离的肽段
。
[0013]根据本专利技术的实施例，所述构建体的载体为非致病性病毒载体
。
[0014]根据本专利技术的实施例，所述构建体的载体为腺病毒载体
、
慢病毒载体或逆转录病毒载体
。
[0015]在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了一种重组细胞
。
根据本专利技术的实施例，所述重组细胞携带前述的分离的环状核酸分子
、
前述的构建体；或表达前述的分离的肽段
。
根据本专利技术实施例的重组细胞可用于前述的肽段体外表达和大量获得
。
[0016]在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了一种试剂在本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种分离的环状核酸分子，其特征在于，具有
SEQ ID NO:1
所示的核苷酸序列
。2.
一种分离的肽段，其特征在于，由权利要求1所述的分离的环状核酸分子编码
。3.
一种构建体，其特征在于，携带权利要求1所述的分离的环状核酸分子；任选地，所述构建体的载体为非致病性病毒载体；任选地，所述构建体的载体为腺病毒载体
、
慢病毒载体或逆转录病毒载体
。4.
一种重组细胞，其特征在于，携带权利要求1所述的分离的环状核酸分子
、
权利要求3所述的构建体；或表达权利要求2所述的分离的肽段
。5.
试剂在制备药物中的用途，所述试剂用于抑制环状核酸分子的表达或活性，所述环状核酸分子具有如
SEQ ID NO:1
所示的核苷酸序列，所述药物用于治疗或预防线粒体功能异常相关疾病；任选地，所述线粒体功能异常相关疾病包括
ROS
产生过多相关疾病
、ATP
产生过少相关疾病和呼吸链功能异常相关疾病；任选地，所述线粒体功能异常相关疾病包括脑疾病
、
心肌病
、
衰老相关疾病
、
神经退行性疾病或心血管疾病；任选地，所述神经退行性疾病包括选自阿尔茨海默病
、
帕金森病
、
亨廷顿氏病
、
肌萎缩性侧索硬化症
、
脊髓小脑共济失调
、
脑叶硬化症
、
脑缺血
、
脑损伤和癫痫中的至少之一；任选地，所述心血管疾病包括选自糖尿病
、
动脉粥样硬化
、
心衰和缺血再灌注损伤中的至少之一；任选地，所述试剂包括用于敲降所述环状核酸分子的
shRNA
或
siRNA
；任选地，所述试剂包括具有
SEQ ID NO:2
所述的核苷酸序列
。6.
一种药物组合物，其特征在于，包括：抑制环状核酸分子表达或活性的试剂，所述环状核酸分子具有如
SEQ ID NO:1
所示的核苷酸序列；任选地，进一步包括：药学上可接受的辅料；任选地，所述试剂包括用于敲降所述环状核酸分子的
shRNA
或
siRNA
；任选地，所述
shRNA
具有如
SEQ ID NO:2
所示的核苷酸序列
。7.
权利要求6所述的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于预防和
/<...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘兴国，杨亮，王昊，唐海特，
申请(专利权)人：中国科学院广州生物医药与健康研究院，
类型：发明
国别省市：