鱼类制造技术

本发明专利技术属于水产动物基因工程技术领域，公开了鱼类

【技术实现步骤摘要】
鱼类VDAC2基因在抗水生病毒诱导炎症反应中的应用


[0001]本专利技术属于水产动物基因工程
，具体涉及一种电压依赖性阴离子通道
2(VDAC2)
在制备抗水生病毒诱导的炎症反应的药物中的应用
。

技术介绍

[0002]鲤春病毒血症
(SVC)
是由鲤春病毒血症病毒
(SVCV)
引起的一种急性高致死率传染病，已被世界动物卫生组织列为必须申报的疫病之一
。
患病鱼主要病理症状为肝
、
脾
、
肾组织出血，严重的腹膜炎及出血性肠炎等
。
根据
《2022
我国水生动物重要疫病状况分析
》
报道，
2005
‑
2021
年监测结果发现，
SVC
在我国流行分布较广，主要分布在东北的辽宁和黑龙江；华北的天津
、
河北和内蒙古；西北的陕西
、
宁夏和新疆；华中的河南
、
湖北和湖南；其中湖北连续5年监测发现
SVCV
阳性样品
。
全国每年有
10
家左右苗种场为
SVCV
阳性
。
监测到的阳性样品中鲤占
70.7
％
、
锦鲤
12.0
％
、
金鱼
8.0
％
、
鲫
5.2
％
、
草鱼
1.8
％
、
鲢
1.4
％
、
鳙
0.2
％，其他品种为
0.7
％
。
[0003]电压依赖性阴离子通道
(VDAC)
是分布在线粒体外膜上的通道蛋白，有三个亚型，分别是
VDAC1
，
VDAC2
和
VDAC3。
在哺乳动物中，
VDAC
的3种亚型之间具有
75
％的序列相似性
。
在比较它们蛋白序列时发现，哺乳动物
VDAC2
的
N
端具有一个独特的
11
‑
12
个氨基酸延伸
。
但是，该延伸在其它脊索动物中并不保守，例如鱼类
VDAC2
没有这种氨基酸延伸
。
因此，
N
端延伸可能只对哺乳动物的某些功能有重要作用
。
此外，其它两个亚型相比，
VDAC2
具有更多的半胱氨酸
(C)
，且集中在跨膜结构域之间的连接体中，它们可能在氧化还原调节
、
蛋白
‑
蛋白相互作用中发挥作用，也可能对
β
‑
折叠的稳定性和
VDAC2
与脂质环境的相互作用产生影响
。
在研究
VDAC
家族三维结构时发现，
VDAC
是由
β
桶形成的跨膜通道，
β
桶是由一个螺旋和多个
β
片组成
。VDAC
最早的晶体学研究的对象是斑马鱼
VDAC2(zfVDAC2)
，该研究表明，
zfVDAC2
也是由
19
个
β
片和一个在
N
端的
α
螺旋组成的
β
桶
。
[0004]VDAC
的主要作用是在跨线粒体外膜
(OMM)
传递溶质方面
。
该功能是线粒体生物能量学和细胞代谢的核心
。
尽管它们高度相似，但每个异构体都涉及不同的功能
。
研究表明
VDAC1、VDAC3
或双敲除
VDAC1/VDAC3
的小鼠表现出轻度表型，而
VDAC2
的全身敲除的小鼠在胚胎发育过程中就死亡
。
仅产生心脏和胸腺条件性敲除
VDAC2
的小鼠
。
且心脏特异性
VDAC2
基因敲除表现为心肌病和细胞凋亡通路功能障碍，最终导致早期死亡
。
因此，
VDAC2
在发育和生存中具有非常重要的功能
。
研究表明，
VDAC2
与
VDAC1
一样具有电压依赖性，且
VDAC2
在心肌细胞中维持正常的
Ca
2+
循环维持心脏收缩活性具有重要作用
。
此外，
VDAC
在调控细胞凋亡中发挥重要作用
。Bcl
‑
xL
与
VDAC1
相互作用，抑制线粒体
Ca
2+
摄取促进的细胞凋亡；
Bcl
‑2也通过其
N
端与
VDAC1
相互作用，抑制细胞色素
c
的释放和细胞凋亡；另有研究表明
VDAC1
与
Bax
相互作用，发挥促凋亡作用
。
值得注意的是，
VDAC
参与细胞凋亡也受到其他相互作用物的影响
。
例如，己糖激酶
1/2
已被证实通过与
VDAC
相互作用发挥抗凋亡作用
。
有文献指出
VDAC1
是己糖激酶的靶点，最近发现己糖激酶2的抗凋亡活性也与
VDAC2/3
有关
。
除了以上功能，近几年研究发现，
VDAC
在调控炎症方面也具有重要作用
。VDAC
可以调控多种刺激因子的
释放如
Ox
‑
mtDNA
，
ROS
等，这些因子可以进一步激活
NLRP3
炎症小体，进而引起强烈的炎症反应
。
此外，
VDAC
自身的寡聚化也会促进
NLRP3
炎症小体组装激活
。
所以，
VDAC
在调控机体炎症反应方面也具有重要作用
。
但是关于
VDAC2
在鱼类水生病毒感染中的研究尚未报道
。

技术实现思路

[0005]专利技术人首次发现鱼类
VDAC2
在
SVCV
感染中调控炎症反应，故本专利技术旨在提供鱼类
VDAC2
基因作为靶点在开发制备抗水生病毒诱导炎症反应的药物中的应用
。
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
鱼类
VDAC2
基因作为靶点在制备抗水生病毒诱导炎症反应的药物中的应用
。2.
根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物的活性成分为
VDAC2
基因抑制剂
。3.
根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述抑制剂
shRNA、siRNA、dsRNA、miRNA、cDNA、
反义
RNA/DNA、Morpholino
序列
、
低分子化合物
、
肽
、
抗体中的至少一种
。4.
根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抑制剂为
4,4
′‑
二异硫氰基芪
‑
2,2
′‑
二磺酸
。5.

【专利技术属性】
技术研发人员：刘学芹，赵伟杨，李陈，张玉军，张永安，叶静，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：