【技术实现步骤摘要】
链霉亲和素阻断剂的制备和应用
[0001]本专利技术涉及生物
,具体涉及链霉亲和素阻断剂的制备和应用
。
技术介绍
[0002]链霉亲和素
(SA)
由4个相同亚基构成的四聚体蛋白质,每个亚基都有独立的生物素结合位点,每个位点对生物素都有很高的亲和力
。
链霉亲和素因其生物素结合的紧密亲和力而被普遍使用,该系统在蛋白质科学
、
纳米技术和催化等多个领域都有应用
。
蛋白质或核酸等生物大分子经生物素修饰后,可被链霉亲和素特异性捕获性偶联,故常用于大分子的固定化
、
生物标记
、
生物检测和细胞分选等研究
。
目前,生物素
‑
亲和素系统固定广泛应用于免疫测定,但容易受样本及其它成分的干扰,导致背景信号值的增加,因此需要添加阻断剂消除干扰背景
。
研究表明,生物素结合位点主要位于链霉亲和素亚基之间的界面,通过突变使生物素结合位点失活,进而导致与生物素的结合力显著下降,即可获 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
链霉亲和素变体,其特征在于,其为具有如
SEQ ID NO:1
所示的氨基酸序列中包括如下
I)
~
VI)
所示的突变中的至少一种:
I)、
第
13
位的亮氨酸突变为精氨酸或色氨酸;
II)、
第
44
位的亮氨酸突变为酪氨酸;
III)、
第
100
位的苏氨酸突变为精氨酸;
VI)、
第
15
位的丝氨酸突变为色氨酸
。2.
根据权利要求1所述的链霉亲和素变体,其特征在于,所述链霉亲和素变体的具有如
SEQ ID NO:2
~
SEQ ID NO:7
所示的氨基酸序列中的至少一种
。3.
编码权利要求1或2所述的链霉亲和素变体的核酸
。4.
根据权利要求3所述的核酸,其特征在于,具有如
SEQ ID NO:8
~
SEQ ID NO:13
所示的核苷酸序列中的至少一种
。5.
重组载体,其包括载体骨架和权利要求3或4所述的核酸中的至少一种
。6.
宿主细胞,其转染或转化权利要求5所述的重组载体
。7.
链霉亲和素阻断剂,其由如权利要求1或2所述的链霉亲和素变体和
/
或培养如权利要求6所述的宿主获得的产物经交联和透析后制得
。8.
链霉亲和素阻断剂的制备方法,其特征在于,包括:权利要求1或2所述的链霉素亲和素变体和
/
或培养如权利要求6所述的宿主获得的产物,经交联和透析,获得所述链霉亲和素阻断剂
。9.
根据权利要求8所述的制备方法,其特征在于,所述交联中,链霉亲和素变体与交联剂的摩尔比为1:
...
【专利技术属性】
技术研发人员:赵慧玲,张晓雷,苏测洋,赵巧辉,李桂林,付光宇,吴学炜,杨增利,
申请(专利权)人:郑州伊美诺生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:
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