一种基于模拟漆酶纳米酶快速检测天麻硫熏标志物的方法技术

技术编号:39731048 阅读:12 留言:0更新日期:2023-12-17 23:34
本发明专利技术涉及化学分析检测技术领域,具体为一种基于模拟漆酶纳米酶快速检测天麻硫熏标志物的方法

【技术实现步骤摘要】
一种基于模拟漆酶纳米酶快速检测天麻硫熏标志物的方法


[0001]本专利技术涉及化学分析检测
,具体为一种基于模拟漆酶纳米酶快速检测天麻硫熏标志物的方法


技术介绍

[0002]硫磺熏蒸具有增白

快速干燥

防虫防霉的作用,且工艺简便

成本低,已被广泛应用在中药材的产地加工中

大量研究发现硫磺熏蒸会导致药材化学成分

药理活性发生改变,存在安全隐患

但大量研究已证实硫熏不仅会影响药材质量,残留过量的二氧化硫还会危害人体健康,尤其是药材进入人体后,对肝和肾脏等重要代谢器官的影响较大

研究表明,对羟基苄基亚硫酸氢盐
(p

HS)
作为硫熏天麻中丰度较高且专属性较好的硫熏标志物,是判断天麻硫熏成功与否的重要质控指标

目前检测
p

HS
的方法主要为
UPLC

MS/MS
,需要大型仪器设备及专门技术人员,难以进行硫熏天麻的现场快速质量控制

[0003]纳米酶是指具有天然酶催化活性的纳米材料

其成本低

易储存

酶活性可调节控制

其中,漆酶是一种以铜离子为催化中心的多酚氧化酶,它可以通过电子的转移来催化酚类和酚胺类底物氧化并产生无害的水,独特的环保特性使其在纳米酶的研究中备受瞩目

近年来纳米酶包括漆酶模拟酶已在食品分析

生物传感

医学诊断和工业生产中得到广泛的应用

但由于漆酶纳米酶与天然漆酶相比,仍然存在催化活性较低

对底物特异性差,并非所有酚类和酚胺类底物都能被氧化,研究高催化活性漆酶纳米酶,拓展其应用是十分必要的

[0004]本专利技术以
Zr
为金属源,中


(4

羧基苯基
)
卟吩
(TCPP)
为配体,苯甲酸及乙酸作为调节剂,铜掺杂碳点
(Cu

CDs)
作为异相成核位点可以与
Zr
4+
离子结合,合成了具有均匀的二维片状形貌的卟啉基金属

有机框架化合物
(PCN

222/Cu

CDs)

Pt
纳米粒子
(PtNPs)
被嵌入到
PCN

222/Cu

CDs
的介孔中形成
Pt@PCN

222/Cu

CDs

Pt@PCN

222/Cu

CDs
表现出高的拟漆酶纳米酶活性,碳点的引入提供特定的吸附位点,降低传质势垒,提高了底物的吸附能力

天麻硫熏标志物对羟基苄基亚硫酸氢盐
(p

HS)
作为漆酶底物,能被
Pt@PCN

222/Cu

CDs
氧化,在4‑
安替比林
(4

AP)
存在下,产生红色偶联氧化产物从而建立了
p

HS
比色快速检测新方法

建立的方法具有共存物质不干扰测定

特异性强,灵敏度高

检出限达
0.05mg/kg
,操作简单

快速的特点


技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种基于模拟漆酶纳米酶快速检测天麻硫熏标志物的方法,利用
Pt@PCN

222/Cu

CDs
拟漆酶活性,建立
p

HS
检测新方法

[0006]一种基于模拟漆酶纳米酶快速检测天麻硫熏标志物的方法,其特征在于,包括以下步骤:
[0007](1)
在检测体系中加入
Pt@PCN

222/Cu

CDs
纳米酶
、4

安替比林
(4

AP)
溶液,加入
pH 5.0
乙酸

乙酸钠缓冲溶液,反应5‑
10
分钟,加入天麻硫熏标志物对羟基苄基亚硫酸氢盐
(p

HS)
标准溶液,用乙酸

乙酸钠缓冲溶液定容,摇匀,静置5‑
10
分钟,离心,取上清液,于
505nm
波长处测定吸光度,建立吸光度与
p

HS
浓度的定量关系,绘制标准曲线,得到回归方程;
[0008](2)
提取检测样品中
p

HS
,获得样品测定液,在
Pt@PCN

222/Cu

CDs
纳米酶
、4

安替比林
(4

AP)
溶液,加入
pH 5.0
乙酸

乙酸钠缓冲溶液,反应5‑
10
分钟,加入样品测定液,加入乙酸

乙酸钠缓冲溶液定容,摇匀,静置5‑
10
分钟,离心,取上清液,于
505nm
波长处测定吸光度,吸光度代入步骤
(1)
回归方程中,获得样品中
p

HS
含量;
[0009]所述
Pt@PCN

222/Cu

CDs
纳米酶制备包括:
[0010]①
Cu

CDs
的合成:取
0.40

0.50g
柠檬酸
、0.1

0.2g
多巴胺
、0.1

0.2mL
乙二胺及
30

40mL
去离子水混合后,加入
0.2

0.3g
的氯化铜,超声处理
15

20
分钟,转入马弗炉
200℃
烧制
10

12
小时,冷却至室温后,
8000

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...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种基于模拟漆酶纳米酶快速检测天麻硫熏标志物的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)
在检测体系中加入
Pt@PCN

222/Cu

CDs
纳米酶
、4

氨基安替比林
(4

AP)
溶液,加入
pH 5.0
乙酸

乙酸钠缓冲溶液,反应5‑
10
分钟,加入天麻硫熏标志物
——
对羟基苄基亚硫酸氢盐
(p

HS)
标准溶液,用乙酸

乙酸钠缓冲溶液定容,摇匀,静置5‑
10
分钟,离心,取上清液,于
505nm
波长处测定吸光度,建立吸光度与
p

HS
浓度的定量关系,绘制标准曲线,得到回归方程;
(2)
提取检测样品中
p

HS
,获得样品测定液,在
Pt@PCN

222/Cu

CDs
纳米酶
、4

AP
溶液,加入
pH 5.0
乙酸

乙酸钠缓冲溶液,反应5‑
10
分钟,加入样品测定液,加入乙酸

乙酸钠缓冲溶液定容,摇匀,静置5‑
10
分钟,离心,取上清液,于
505nm
波长处测定吸光度,吸光度代入步骤
(1)
回归方程中,获得样品中
p

HS
含量;所述
Pt@PCN

222/Cu

CDs
纳米酶制备包括:

Cu

CDs
的合成:取
0.40

0.50g
柠檬酸
、0.1

0.2g
多巴胺
、0.1

0.2mL
乙二胺及
30

40mL
去离子水混合后,加入
0.2

0.3g
的氯化铜,超声处理
15

20
分钟,转入马弗炉
200℃
烧制
10

12
小时,冷却至室温后,
8000

10000rpm
离心
15

20
分钟,取上清液,过
0.22
μ
m
滤膜除去大颗粒杂质,将溶液进一步真空干燥,得到铜掺杂碳点
Cu

CDs


PCN

222/Cu
...

【专利技术属性】
技术研发人员:杨亚玲李秋兰杨德志
申请(专利权)人:云南伦扬科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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