一种全细胞脂肪酶催化剂及其制备方法和在油脂废水处理中的应用技术

本发明专利技术公开了一种全细胞脂肪酶催化剂及其制备方法和在油脂废水处理中的应用，通过

【技术实现步骤摘要】
一种全细胞脂肪酶催化剂及其制备方法和在油脂废水处理中的应用


[0001]本专利技术涉及微生物改造
，具体涉及一种全细胞脂肪酶催化剂及其构建方法和在油脂废水处理中的应用
。

技术介绍

[0002]油脂废水主要存在于餐饮业
、
食品加工业以及屠宰场等生产加工过程中，其具有含油量高
、
成分复杂
、
有机物浓度高等特点
。
未经处理直接排放到自然水体中，会严重危害水体生态系统，对环境乃至人体健康产生重要影响
。
[0003]生物处理法相比物理和化学处理法具有环境友好
、
成本低廉等特点，其主要包括厌氧和好氧两种处理方法，其中以厌氧生物法为主
。
厌氧生物处理工艺主要是在厌氧条件下，油脂被微生物作用分解生成甲烷和二氧化碳
。
然而，在实际应用中采用生物反应器处理油脂废水时，油脂通常会覆盖在活性污泥表面，降低底物转化效率，已经有报道称油脂被脂肪酶水解生成甘油和脂肪酸，这一水解步骤对反应器运行效率影响极大，已经成为了本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种全细胞脂肪酶催化剂的构建方法，其特征在于，具体为：通过地衣枯草芽孢杆菌基因组信息，经分析比对获得编码脂肪酶
lipase
的基因
Lip
的完整核苷酸序列，该核苷酸序列的
GenBank
登记号为
No.AAU24042.1
，然后从丁香假单胞菌中获得编码锚定蛋白冰晶核蛋白
InaK
的基因的
N
端结构域序列，丁香假单胞菌的
NCBI
序列号为 AF013159
，最后分别以相应的菌株为模板，通过
PCR
技术获得目的基因片段；以获得的
InaK
基因为模板，设计
Inak
‑
F
为正向引物，
InaK
‑
Lip
‑
R
为反向引物，利用重叠
PCR
技术将两者进行融合得到目的片段；选取质粒
pET
‑
23b
作为载体，使用限制性内切酶
BamHI
和
HindIII
分别对目的片段和质粒进行双酶切后，使用
T4
连接酶进行连接以重新环化质粒将脂肪酶和冰晶核蛋白的融合片段转化到质粒
pET
‑
23b
上，形成
pET
‑
23b
‑
Lip
重组质粒，然后利用氯化...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵帅，屈建航，周佳，李含嫣，
申请(专利权)人：河南工业大学，
类型：发明
国别省市：