一种人源化纳米抗体及其在制备制造技术

本发明专利技术提供了一种人源化纳米抗体及其在制备

【技术实现步骤摘要】
一种人源化纳米抗体及其在制备TGF
β
抑制剂中的用途


[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种人源化纳米抗体及其在制备
TGF
β
抑制剂中的用途
。

技术介绍

[0002]转化生长因子
(transforming growth factor
β
，
TGF
β
)
是
1978
年
DeLarco
与
Todaro
从培养小鼠肉瘤病毒细胞株的培养基中鉴定出来的，因其具有细胞转化的特性而命名为转化生长因子
。
目前
TGF
β
共发现5种亚型，其中在哺乳动物体内发现3种：
TGF
β
1、TGF
β2和
TGF
β
3。
研究发现，
TGF
β
作为一种肿瘤促进因子，刺激组织纤维化和细胞外基质沉积，扰乱免疫功能，刺激血管生成和促进上皮
‑
间质转化
。
在胃癌
、
结肠癌
、
肝癌等癌症患者中，
TGF
β
表达水平与肿瘤细胞转移能力以及病人的死亡率呈正相关
。
[0003]TGF
β
在体内参与许多生理过程，如胚胎发育
、
伤口愈合
、
趋化作用和细胞周期调控等，阻断
TGF
β
受体或下游信号通路能够对很多疾病起到治疗效果，如癌症
、
肾纤维化
、
肝纤维化
、
肺纤维化等
。
目前
TGF
β
抑制剂的作用机制，主要概括有以下几个方面
:
①
抑制
TGF
β
及其受体的表达；
②
阻断
TGF
β
与受体的结合；
③
干扰受体激酶信号传递
。
开发靶向
TGF
β
信号通路的抑制剂对肿瘤治疗具有重要意义
。
[0004]基于免疫相关的
TGF
‑
β
/TGF
‑
β
R
通路，全球现已进行了深入的研究
。
但是，目前临床研究中针对
TGF
β
的单抗药物的主要来源是经鼠源抗体改造的抗体，例如
Fresolimumab(
非苏木单抗
)
，它是
Genzyme
公司基于
1D11
鼠源抗体经嵌合改造获得的人源性抗
TGF
β
的单克隆抗体，可同时靶
TGF
β
1、TGF
β
2、TGF
β3三种亚型
。Fresolimumab
是一种分子量为
150KDa
的单链抗体，其分子量较大不利于穿透血脑屏障，且由于该抗体是一种人源化鼠抗，存在一定的免疫风险
。
为了解决上述问题，亟需开发出一种抗
TGF
β
的人源化纳米抗体
。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种人源化纳米抗体及其在制备
TGF
β
抑制剂中的用途
。
[0006]本专利技术提供了一种人源化纳米抗体，它包括互补决定区
CDR1
‑
CDR3
，
CDR1
的氨基酸序列为
FTFSGYA
，
CDR2
的氨基酸序列为
ITPIAHT
，
CDR3
的氨基酸序列为
ADLHRMYTY。
[0007]进一步地，所述人源化纳米抗体还包括与互补决定区
CDR1
‑
CDR3
交替连接的四个框架区
FR1
‑
FR4
，
FR1
的氨基酸序列为
QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASG
，
FR2
的氨基酸序列为
LGWFRQAPGQEREAVAA
，
FR3
的氨基酸序列为
YYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC
，
FR4
的氨基酸序列为
WGQGTLVTVSS。
[0008]进一步地，所述人源化纳米抗体的氨基酸序列为：
[0009]QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSGYALGWFRQAPGQERE AVAAITPIAHTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCA DLHRMYTYWGQGTLVTVSS。
[0010]本专利技术还提供了一种制备上述人源化纳米抗体的方法，所述方法包括以下步骤：
[0011](1)
将核苷酸序列如
SEQ ID NO:9
所示的核苷酸分子连接至表达载体中获得阳性
质粒；
[0012](2)
将阳性质粒转化宿主细胞，诱导表达人源化纳米抗体
。
[0013]本专利技术还提供了一种核苷酸分子，它的核苷酸序列如
SEQ ID NO:9
所示
。
[0014]本专利技术还提供了一种表达载体，它包含核苷酸序列如
SEQ ID NO:9
所示的核苷酸分子
。
[0015]本专利技术还提供了一种宿主细胞，它包含上述的表达载体
。
[0016]本专利技术还提供了上述人源化纳米抗体在制备
TGF
β
抑制剂中的用途
。
[0017]进一步地，所述
TGF
β
抑制剂为治疗肿瘤或纤维化疾病的药物
。
[0018]本专利技术还提供了一种药物，它是以上述人源化纳米抗体为活性成分，加上要学上可接受的辅料制备而成的制剂
。
[0019]进一步地，所述肿瘤为胃癌
、
胶质瘤
、
黑色素瘤
、
肾细胞癌
、
胰腺癌
、
乳腺癌
、
肺癌
、
前列腺癌
、
胆管癌
、
头颈部鳞状细胞癌或子宫颈癌
。
[0020]本领域技术人员公知的，
TGF
β
抑制剂可以治疗的肿瘤包括：晚期胃癌
、
胶质瘤
、
恶性黑色素瘤
、
肾细胞癌<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种人源化纳米抗体，其特征在于，它包括互补决定区
CDR1
‑
CDR3
，
CDR1
的氨基酸序列为
FTFSGYA
，
CDR2
的氨基酸序列为
ITPIAHT
，
CDR3
的氨基酸序列为
ADLHRMYTY。2.
根据权利要求1所述的人源化纳米抗体，其特征在于，它还包括与互补决定区
CDR1
‑
CDR3
交替连接的四个框架区
FR1
‑
FR4
，
FR1
的氨基酸序列为
QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASG
，
FR2
的氨基酸序列为
LGWFRQAPGQEREAVAA
，
FR3
的氨基酸序列为
YYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC
，
FR4
的氨基酸序列为
WGQGTLVTVSS。3.
根据权利要求2所述的人源化纳米抗体，其特征在于，它的氨基酸序列为：
QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTF...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘东，余鼎，梁洪，曾金杰，王雨，
申请(专利权)人：成都蓉生药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：