针对制造技术

本公开提供了结合人

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】针对artemin的人抗体及其使用方法


[0001]本公开涉及特异性结合
artemin
的人抗体和人抗体的抗原结合片段，及其使用方法
。
[0002]序列表
[0003]序列表的正式副本以
ASCII
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EFS
‑
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以电子方式提交，文件名为
10907WO01_Sequence_Listing_ST25
，创建日期为
2022
年4月
19
日，大小为约
69,632
字节
。
包含在此
ASCII
格式文档中的序列表是说明书的一部分，并且通过引用整体并入本文
。

技术介绍

[0004]Artemin(ARTN)
是一种神经营养因子，所述神经营养因子是神经胶质细胞系衍生的神经营养因子
(GDNF)
配体家族的成员
。
每个
GDNF
家族配体结合与质膜相关的糖基磷脂酰肌醇
(GPI)
锚定的受体
。
这个受体家族被称为
GDNF
家族受体
(GFR
α
)
家族，并且由四种不同的受体
GFR
α1‑4构成
。ARTN
优先结合受体
GFR
α3，并且是
GFR
α3的唯一已知配体
。ARTN
和其他
GDNF
家族配体通过
RET(“转染期间重排”)
受体酪氨酸激酶发出信号，所述激酶最初作为原癌基因被发现
。
只有当配体首先结合其
GFR
α
受体时，
RET
才被
GDNF
家族成员活化
(Airaksinen
等人
,Nature Reviews Neuroscience(2002),3:383
‑
394)。
[0005]ARTN
和
GFR
α3在发育期间高度表达，并且参与交感神经系统的发育
。
在成年小鼠中，
ARTN
在睾丸
、
子宫
、
甲状腺
、
前列腺和附睾以及嗅球和肠及肠系膜中的小动脉中表达
(Airaksinen
等人
,Nature Reviews Neuroscience(2002),3:383
‑
394
；
Airaksinen
等人
,Brain,Behavior and Evolution,(2006),68:181
‑
190)。GFR
α3在成人中的表达主要限于背根神经节
(DRG)
的感觉神经元
(Orozco
等人
,European J.Neuroscience,(2001),13:2177
‑
2182)。
缺乏
ARTN
或
GFR
α3的小鼠在交感神经系统的迁移和轴突投射模式中表现出异常，导致靶组织的异常神经支配
(onma
等人
,Neuron,(2002),35:267
‑
282)。
[0006]ARTN
和
GFR
α3在疼痛和热感知中的潜在作用已经在几项研究中显示
。
例如，已经证明将
artemin
蛋白注射到啮齿动物的后爪中导致热痛觉过敏，并且当
artemin
与
NGF
共注射时，这种伤害感受增强
(Malin
等人
,J.Neuroscience,(2006),26(33):8588
‑
8599)。
其他研究显示，
artemin mRNA
表达在鼠炎性模型中上调，并且
artemin
转基因小鼠具有
TRPV1
和
TRPA1
的高表达以及对热和冷的高行为敏感性
(Elitt
等人
,J.Neuroscience,(2006),26(33):8578
‑
8587)。
此外，
artemin
和
GFR
α3表达在偏头痛的大鼠模型中增加
(Shang
等人
,J Headache Pain,(2016),17(1):81)
并且在用放射疗法治疗的狗中增加
(Nolan
等人
,Radiat Res,(2020),193(3):241
‑
248)。Artemin
表达也在灼口综合征患者的舌粘膜和灼口综合征的小鼠模型中增加
(Shinoda
等人
,PAIN,(2015),156(12):2528
‑
2537)。

技术实现思路

[0007]在一个方面，提供了特异性结合
artemin
的分离的抗体或其抗原结合片段
。
在一些
实施方案中，抗体是结合人
artemin
的单克隆抗体或其抗原结合片段
。
在一些实施方案中，抗体或其抗原结合片段以如在
25℃
下通过表面等离子体共振测量的小于
5nM
的
K
D
与结合人
artemin。
[0008]在一些实施方案中，抗体或其抗原结合片段：
[0009](a)
如通过
ELISA
测量，阻断至少
65
％的人
artemin
与包被有人
GFR
α3的固体支持物的结合；
[0010](b)
通过
GFR
α3和
RET
受体酪氨酸激酶抑制或减少
artemin
活化的信号传导；和
/
或
[0011](c)
在体内抑制或减少
artemin
诱导的热痛觉过敏
。
[0012]在一些实施方案中，抗体或其抗原结合片段与来自至少一种非人类物种的
artemin
交叉反应
。
在一些实施方案中，抗体或其抗原结合片段与猴
artemin
交叉反应
。
在一些实施方案中，抗体或其抗原结合片段与小鼠
artemin
交叉反应
。
[0013]在一些实施方案中，抗体或其抗原结本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
一种分离的单克隆抗体或其抗原结合片段，其特异性结合人
artemin。2.
如权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体以如在
25℃
下通过表面等离子体共振测量的小于
5nM
的
K
D
结合人
artemin。3.
如权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体：
(i)
如通过
ELISA
测量，阻断至少
65
％的人
artemin
与包被有人
GFR
α3的固体支持物的结合；
(ii)
通过
GFR
α3和
RET
受体酪氨酸激酶抑制或减少
artemin
活化的信号传导；和
/
或
(iii)
在体内抑制或减少
artemin
诱导的热痛觉过敏
。4.
如权利要求1至3中任一项所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：
(a)
包含选自由
SEQ ID NO:4、24、44
和
64
组成的组的氨基酸序列的重链互补决定区
1(HCDR1)
；
(b)
包含选自由
SEQ ID NO:6、26、46
和
66
组成的组的氨基酸序列的重链互补决定区
2(HCDR2)
；
(c)
包含选自由
SEQ ID NO:8、28、48
和
68
组成的组的氨基酸序列的重链互补决定区
3(HCDR3)
；
(d)
包含选自由
SEQ ID NO:12、32、52
和
72
组成的组的氨基酸序列的轻链互补决定区
1(LCDR1)
；
(e)
包含选自由
SEQ ID NO:14、34、54
和
74
组成的组的氨基酸序列的轻链互补决定区
2(LCDR2)
；和
(f)
包含选自由
SEQ ID NO:16、36、56
和
76
组成的组的氨基酸序列的轻链互补决定区
3(LCDR3)。5.
如权利要求1至4中任一项所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：
(a)
包含
SEQ ID NO:4
的氨基酸序列的
HCDR1、
包含
SEQ ID NO:6
的氨基酸序列的
HCDR2、
包含
SEQ ID NO:8
的氨基酸序列的
HCDR3、
包含
SEQ ID NO:12
的氨基酸序列的
LCDR1、
包含
SEQ ID NO:14
的氨基酸序列的
LCDR2
和包含
SEQ ID NO:16
的氨基酸序列的
LCDR3
；或
(b)
包含
SEQ ID NO:24
的氨基酸序列的
HCDR1、
包含
SEQ ID NO:26
的氨基酸序列的
HCDR2、
包含
SEQ ID NO:28
的氨基酸序列的
HCDR3、
包含
SEQ ID NO:32
的氨基酸序列的
LCDR1、
包含
SEQ ID NO:34
的氨基酸序列的
LCDR2
和包含
SEQ ID NO:36
的氨基酸序列的
LCDR3
；或
(c)
包含
SEQ ID NO:44
的氨基酸序列的
HCDR1、
包含
SEQ ID NO:46
的氨基酸序列的
HCDR2、
包含
SEQ ID NO:48
的氨基酸序列的
HCDR3、
包含
SEQ ID NO:52
的氨基酸序列的
LCDR1、
包含
SEQ ID NO:54
的氨基酸序列的
LCDR2
和包含
SEQ ID NO:56
的氨基酸序列的
LCDR3
；或
(d)
包含
SEQ ID NO:64
的氨基酸序列的
HCDR1、
包含
SEQ ID NO:66
的氨基酸序列的
HCDR2、
包含
SEQ ID NO:68
的氨基酸序列的
HCDR3、
包含
SEQ ID NO:72
的氨基酸序列的
LCDR1、
包含
SEQ ID NO:74
的氨基酸序列的
LCDR2
和包含
SEQ ID NO:76
的氨基酸序列的
LCDR3。
6.
如权利要求1至5中任一项所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变区
(HCVR)
，其包含与选自由
SEQ ID NO:2、22、42
和
62
组成的组的氨基酸序列具有至少
85
％序列同一性的氨基酸序列
。7.
如权利要求1至6中任一项所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含轻链可变区
(LCVR)
，所述轻链可变区包含与选自由
SEQ ID NO:10、30、50
和
70
组成的组的氨基酸序列具有至少
85
％序列同一性的氨基酸序列
。8.
如权利要求1至7中任一项所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：
(a)
包含
SEQ ID NO:2
的氨基酸序列的
HCVR
和包含
SEQ ID NO:10
的氨基酸序列的
LCVR
；或
(b)
包含...

【专利技术属性】
技术研发人员：S，
申请(专利权)人：瑞泽恩制药公司，
类型：发明
国别省市：