靶向人血清白蛋白的单域抗体及其应用制造技术

技术编号:39654123 阅读:12 留言:0更新日期:2023-12-09 11:22
本发明专利技术提供了一种靶向人血清白蛋白的单域抗体及其应用,属于生物医药领域

【技术实现步骤摘要】
靶向人血清白蛋白的单域抗体及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域,具体涉及一种靶向人血清白蛋白的单域抗体及其应用


技术介绍

[0002]人血清白蛋白
(HSA)
是一种血液中含量最丰富且化学性质较为稳定的蛋白质,其是由
585
个氨基酸组成的单链非糖基化多肽,分子质量为
66.5KD
,等电点在
4.7

4.9
之间

成熟的
HSA
是一个心形分子结构,由3个结构相似的
α

螺旋结构域组成
(Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ)
,每个结构域包含2个亚结构域
(A

B)
,其中结构域ⅡA
和ⅢA
能够与内源和外源物质相结合

氨基酸全序列含有
18
种氨基酸,
N
末端为天冬氨酸,
C
末端为亮氨酸

其中含半胱氨酸
35
个,在单链分子内形成
17
对交叉相连的二硫键从而加固了分子的稳定性,提高了对酸和热的耐受性较高,同时分子内大量极性氨基酸也使
HSA
有较高的溶解度

[0003]HSA
是血液系统的重要组分,仅由肝实质细胞合成,占血浆总蛋白的
40

60
%,分泌进入血液循环系统并发挥着非常重要的生理功能,包括维持血浆胶体渗透压,结合并运输药物和小分子物质以及消除自由基抗氧化等

此外,
HSA
是血浆中分子量最小的蛋白质,具有亲水性,可以自由通过毛细血管壁,在血液循环与细胞外液之间进行动态交换,维持血液和细胞外液的胶体渗透压的平衡

[0004]人血清白蛋白
(HAS)
由于其半衰期长

稳定性好

无免疫原性等特点,已被用于融合蛋白的构建以实现蛋白药物的长效性

结合人血清白蛋白的单域抗体及其融合蛋白则是利用其游离型和结合型在血浆内形成平衡的特点,实现缓释和长效的作用

其在增加治疗相关蛋白和多肽的半衰期的应用已通过很多研究及临床试验得到证实
(

WO04/041862

WO2006/122786

WO2008/020079

WO2008/142164

WO2009/068627

WO2009/147248

)。
尽管已有埃博灵克斯公司开发的
HAS
单域抗体应用于长效性蛋白药物开发,但对此类抗体的差异性开发,包括针对不同结合表位或是不同亲和力的抗体的获得,都会给以此为基础的长效性平台系统开发提供更多的选择

此外,由于开发方案的不同,可能通过不同的免疫动物和优化的筛选方法得到性质更为改善的单域抗体,以更好地实现预期的功能

例如,专利
CN201811314177.3
和专利
CN201811314193.2
分别公开了不同的抗人血清白蛋白单域抗体,具有良好特异性

较高亲和力和稳定性,能特异性的识别人血清白蛋白,延长生物药物的半衰期

[0005]尽管现有技术中已有针对人血清白蛋白的结合蛋白或单域抗体,但其种类较少,因此,亟需开发种属交叉特性

稳定性更好,聚体更少的人血清白蛋白单域抗体


技术实现思路

[0006]针对上述不足,本专利技术提供了一种靶向人血清白蛋白的单域抗体及其应用

本专利技术采用人血清白蛋白免疫骆驼,筛选得到了一系列抗人血清白蛋白的单域抗体,所述的单域抗体亲和力高,且种属交叉特性好,热稳定性及贮存稳定性更好,聚体较少,可有效延长
生物药物的半衰期,有利于生物药在治疗中的有益效果

[0007]为了实现上述专利技术目的,本专利技术的技术方案如下:
[0008]一方面,本专利技术提供了一种靶向人血清白蛋白的单域抗体,所述的单域抗体包含以下互补决定区:
[0009](1)
包含
SEQ ID NO:1

SEQ ID NO:2
中任一个所示的氨基酸序列或其变体序列的互补决定区
1CDR1

[0010](2)
包含
SEQ ID NO:3

SEQ ID NO:4
中任一个所示的氨基酸序列或其变体序列的互补决定区
2CDR2

[0011](3)
包含
SEQ ID NO:5

SEQ ID NO:6
中任一个所示的氨基酸序列或其变体序列的互补决定区
3CDR3

[0012]优选地,所述变体序列为与其来源的
CDR
相比具有一个或几个氨基酸的置换

缺失或添加的
CDR
序列;所述的置换为保守置换

[0013]具体地,所述的单域抗体包含:
[0014](1)

SEQ ID NO:1
所示的
CDR1
,如
SEQ ID NO:3
所示的
CDR2
,如
SEQ ID NO:5
所示的
CDR3
;和
/

[0015](2)

SEQ ID NO:2
所示的
CDR1
,如
SEQ ID NO:4
所示的
CDR2
,如
SEQ ID NO:6
所示的
CDR3。
[0016]进一步具体地,所述的单域抗体包含:
[0017](1)

SEQ ID NO:7
所示的氨基酸序列;和
/

[0018](2)

SEQ ID NO:8
所示的氨基酸序列;和
/

[0019](3)

SEQ ID NO:9
所示的氨基酸序列;和
/

[0020](4)

SEQ ID NO:10
所示的氨基酸序列

[0021]另一方面,本专利技术提供了一种融合蛋白,所述的融合蛋白为使用任一所述的单域抗体与一个或一个以上具有治疗功能的多肽分子融合在一起制备所得

[0022]具体地,所述融合蛋白由所述单域抗体与所述具有本文档来自技高网
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种靶向人血清白蛋白的单域抗体,其特征在于:所述的单域抗体包含以下互补决定区:
(1)
包含
SEQ ID NO:1

SEQ ID NO:2
中任一个所示的氨基酸序列或其变体序列的互补决定区
1CDR1

(2)
包含
SEQ ID NO:3

SEQ ID NO:4
中任一个所示的氨基酸序列或其变体序列的互补决定区
2CDR2

(3)
包含
SEQ ID NO:5

SEQ ID NO:6
中任一个所示的氨基酸序列或其变体序列的互补决定区
3CDR3
;所述变体序列为与其来源的
CDR
相比具有一个或几个氨基酸的置换

缺失或添加的
CDR
序列;所述的置换为保守置换
。2.
根据权利要求1所述的单域抗体,其特征在于:所述的单域抗体包含:
(1)

SEQ ID NO:1
所示的
CDR1
,如
SEQ ID NO:3
所示的
CDR2
,如
SEQ ID NO:5
所示的
CDR3
;和
/

(2)

SEQ ID NO:2
所示的
CDR1
,如
SEQ ID NO:4
所示的
CDR2
,如
SEQ ID NO:6
所示的
CDR3。3.
根据权利要求2所述的单域抗体,其特征在于:所述的单域抗体包含:所述的单域抗体包含:
(1)

SEQ ID NO:7
所示的氨基酸序列;和
/

(2)

SEQ ID NO:8
所示的氨基酸序列;和
/

(3)

SEQ ID NO:9
所示的氨基酸序列;和
/

(4)

SEQ ID NO:10
所示的氨基酸序列
。4.
一种融合蛋白,其特征在于:所述的融合蛋白为使用权利要求1‑3任一项所述的单域抗体与一个或一个以上具有治疗功能的多肽分子融合在一起制备所...

【专利技术属性】
技术研发人员:万云超李敏胡琛霏崔文俊
申请(专利权)人:瑞阳苏州生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1