包含干细胞外泌体的药物组合物及其制备方法技术

本发明专利技术涉及包含干细胞外泌体的药物组合物及其制备方法，所述外泌体通过负载化疗药物之后，能够有效的用于卵巢癌的治疗

【技术实现步骤摘要】
包含干细胞外泌体的药物组合物及其制备方法


[0001]本专利技术涉及生物领域，具体的涉及一种包含干细胞外泌体的药物组合物及其制备方法
。

技术介绍

[0002]外泌体
(Exosomes)
是细胞分泌到胞外的一种囊泡
(Extracellular Vesicles
，
EVs)
，其大小为
30
‑
150nm
，具有双层膜结构，外泌体中携带有母细胞的多种蛋白质
、
脂类
、DNA
和
RNA
等重要信息，参与细胞间的分子传递
。
外泌体广泛存在于细胞培养上清以及各种体液中，包括血液
、
淋巴液
、
唾液
、
尿液
、
精液
、
乳汁等，同时也存在于组织样本中，如脑组织
、
肌肉组织
、
脂肪组织等
。
[0003]外泌体的内容物主要取决于其细胞来源，内容繁多且成分复杂，通常包括一些生物活性物质，已知存在不同组织及细胞的外泌体内含有
194
种脂类，
4563
种蛋白质，
1639
种
mRNAs
和
764
种
microRNAs。
其中核内体分类转运复合物和四分子交联体家族成员
(
如
CD9、CD63、cD81、cD82、cDl51)
参与外泌体形成过程的分类转运
。
而且，有研究发现外泌体既可以表达一些
MHcI
类分子，
HSP70、HSP90、HER2/neu
和
Manl
，同时还可以招募多种来自于非浆膜的细胞蛋白，包括
MHc
分跨膜四蛋白
、
黏附分子和金属蛋白酶
。
外泌体介导细胞间的蛋白质
、
脂质
、
核酸的转运，调节受体细胞的多种生物活动，如影响基因表达
。
研究发现乳腺癌来源的外泌体可以调节巨噬细胞的促炎反应
。
在免疫系统中，一方面，树突状细胞或者肿瘤细胞的外泌体可以诱导抗肿瘤活动；另一方面，又可诱导生理状态下的免疫耐受，比如妊娠，以及在肿瘤的进展中的免疫耐受
。
外泌体与靶细胞膜融合后，一方面能促进供体细胞向受体细胞转运细胞表面的分子和受体；另一方面外泌体上表达的配体可以干扰细胞表面受体一配体结合，甚至可以重组受体细胞，导致受体细胞的转变
。
近年来研究发现外泌体在肿瘤的发生发展中发挥着重要作用，比如肿瘤的形成
、
进展和转移
、
免疫调节
、
免疫逃逸
、
血管生成
、
调节肿瘤转移的微环境
、
促进上皮
‑
间质转化
(EMT)。
[0004]外泌体也可以作为疾病治疗和药物运输的工具
。
基于
RNA
的治疗药物通过递送小干扰
RNA(smallinterferingRNA
，
siRNA)
沉默病理基因或通过将外源
mRNA
递送至细胞来表达治疗性蛋白质，在治疗各种疾病方面具有巨大潜力
。
在
mRNA/siRNA
输送方面，传统载体如脂质体和纳米颗粒具有无传染性，材料来源广泛，易于大量制备等优点，有着病毒载体不可替代的优势，但是它们输送效率较低
、
难以通过生物屏障到达病灶部位，并且易引发免疫反应被机体快速清除掉
。
与传统载体不同的是，一方面，外泌体包含可增强内吞作用的跨膜蛋白和膜锚定蛋白，从而促进其内部携带物质的传递；另一方面，外泌体也含有一些抑制吞噬作用的跨膜蛋白而不被循环系统快速清除，如外泌体蛋白
CD47
，它是一种广泛表达于细胞表面的整合素相关蛋白，可向巨噬细胞发出一种“不要吃我”的信号，保护细胞免受吞噬
。
学者开发了一种生物相容性肿瘤细胞
‑
外泌体护套
PSiNPs
，作为靶向癌症化学疗法的药物载体
。
当肿瘤细胞与载有阿霉素的
PSiNPs(DOX@PSiNPs)
一起孵育时，肿瘤细胞便会分泌载有
DOX@PSiNPs
的外泌体
(DOX@E
‑
PSiNPs)
，
DOX@E
‑
PsiNPs
对大量的癌细胞和癌症干细胞具有杀
伤作用，从而起到抗肿瘤作用
。
外泌体也具有很多传统药物载体不具备的通过血脑屏障的能力
。
研究表明，脑内皮细胞产生的外泌体可作为治疗脑肿瘤药物的载体
。
在斑马鱼原发性脑癌模型中，装载抗癌药物的外泌体可通过血脑屏障发挥抗肿瘤作用，显著缩小肿瘤病灶大小并降低异种移植癌细胞的荧光强度和肿瘤生长标志物含量
。
利用基因修饰的外泌体来特异性地传递
siRNA
，阻止
KRAS
基因突变，从而使患有胰腺癌的小鼠病情得到缓解，提高小鼠的存活率，证实外泌体能够作为一种高效的
RNA
干扰
(RNAi)
载体发挥作用，运送特异性地靶向
KRAS
的
siRNA
和短发夹
RNA
分子，比脂质体更加高效，且没有明显的免疫反应
。
[0005]卵巢癌是常见的致死性妇科恶性肿瘤之一，在女性死亡相关的癌症病因中排名第5，常常因早期诊断困难
、
复发率高及化疗药物的耐药性，使卵巢癌患者预后较差，5年生存率仅约
30
％
。
外泌体作为一种生物活性物质的载体，在卵巢癌的治疗中具有很大的应用前景
。
首先外泌体作为细胞外的一种小囊泡，可以自由循环于生物体液中，比如血液
、
尿液
、
腹水
、
唾液和脑脊液中
。
其次外泌体的膜成分中还具有细胞膜的一个性能：最佳膜融合性能，在某些情况下还具有独特的细胞趋向性
。
并且来源于卵巢癌患者的外泌体在体外的聚乙二醇脂质体中，能够更好地发生免疫逃逸
。
通过进行体内外实验，利用纳米追踪分析和免疫印迹法分析外泌体，发现利用外泌体作为多柔比星的载体，相比单独多柔比星，心肌内皮细胞的外渗动力学相对缓慢；并且在存在免疫缺陷和具有免疫能力的小鼠中，对外泌体作为载体的多柔比星的容受剂量高于单纯的多柔比星
。
由此研究认为外泌体作为多柔比星载体，可以在不影本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
特异性针对
PI3K
的单克隆抗体
P
‑
6F17
，其特征在于所述抗体的轻链可变区序列如
SEQ ID NO
：1所示，其重链可变区如
SEQ ID NO
：2所示
。2.
特异性针对
PI3K
的单克隆抗体
P
‑
6F17
通过抑制
PI3K
信号通路在制备治疗卵巢癌的药物中的用途
。3.
负载化疗药物顺铂的脐带间充质干细胞外泌体和特异性针对
PI3K
的单克隆抗体
P
‑
6F17
在制备治疗卵巢癌的药物组合物中的用途，其中特异性针对
PI3K
的单克隆抗体
P
‑
6F17
的轻链可变区序列如
SEQ ID NO
：1所示，其重链可变区如
SEQ ID NO
：2所示
。4.
特异性针对
PI3K
的单克隆抗体
P
‑
6F17
通过抑制
PI3K
信号通路进而提高化疗药物顺铂药物对离体的卵巢癌细胞敏感性的药物中的用途；其中特异性针对
PI3K
的...

【专利技术属性】
技术研发人员：张光华，于易涛，朱景轩，
申请(专利权)人：济南姚盛成达生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：