一种应用冷热骤变循环处理筛检盐藻品系生产性状优劣的方法技术

本发明专利技术公开了一种应用冷热骤变循环处理筛检盐藻品系生产性状优劣的方法

【技术实现步骤摘要】
一种应用冷热骤变循环处理筛检盐藻品系生产性状优劣的方法


[0001]本专利技术涉及了一种筛检盐藻品系生产性状优劣的方法，涉及盐藻开发应用，具体涉及一种应用冷热骤变循环处理筛检盐藻品系生产性状优劣的方法
。

技术介绍

[0002]盐藻
(Dunaliella salina)
也称盐生杜氏藻，隶属于绿藻门
、
绿藻纲
、
团藻目
、
盐藻科
、
盐藻属
,
是一种形体微小
、
无细胞壁的经济微藻
。
盐藻中含有丰富的天然类胡萝卜素，不仅包括全反式
β
‑
胡萝卜素，还有9顺式
β
‑
胡萝卜素，以及
α
‑
胡萝卜素
、
叶黄素
、
玉米黄素
、
γ
‑
胡萝卜素等，这些类胡萝卜素都具有超强的抗氧化作用，被广泛应用于生物医药
、
食品
、
化工等诸多行业
。
已有众多科学研究与生产实践表明，盐藻的生长受温度
、
光照，以及培养液的盐度
、pH
和营养成分等诸多生长因素影响，但在目前国内外普遍采用的跑道形循环池或玻璃管道工厂化培植盐藻的生产模式中，随气候变化的温度则是最难以人为调控的生长因素，且温度直接影响着生命活动的全过程
。
所以，与其它农业与生物技术产业一样，选育对温度等生长因素适应性好的品种
(
系
)
，是有效提升当前盐藻产业经济效益
、
切实解决生产实际问题的最直接和重要的途径之一
。
[0003]目前国内外筛选适合大规模生产盐藻品系的常规方法如下：
1、
对新分离到的品系进行编号；
2、
在实验室条件下做如温度等多种环境因素的交叉组合培养试验，并根据所测定的生长曲线
、
光合放氧和生化组成等指标进行初步筛选；
3、
对实验室初筛到有生产养殖潜力的候选品系在不同季节
、
气候等条件下进行培植小试
、
中试及生产性试验，再筛选出目标品系
。
这一方法虽然实用
、
有效，但程序繁琐
、
工作量大
、
周期长，且成本高
。
因此，迫切需要建立一种简单
、
高效
、
低成本的评价与筛选方法，以满足当前国内外盐藻产业不断发展的实际需要
。

技术实现思路

[0004]为了解决
技术介绍
中存在的问题，本专利技术所提供一种应用冷热骤变循环处理筛检盐藻品系生产性状优劣的方法，来检测盐藻品系生产性状优劣
。
[0005]本专利技术采用的技术方案是：
[0006]本专利技术的应用冷热骤变循环处理筛检盐藻品系生产性状优劣的方法，包括：
[0007]1)
以已知生产性状好的和已知生产性状差的各至少3株盐藻品系为材料，测定各盐藻品系处于对数生长期的藻液的浊度
T
，当浊度大于
0.5
时，则使用改良的人工海水
(artifical seawater)
培养液将藻液的浊度稀释至
0.5。
[0008]2)
将步骤
1)
中的每个盐藻品系的藻液分装到聚合酶链反应
PCR(Polymerase Chain Reaction)
管中，然后放入具管内温度传感器及控温功能的聚合酶链反应
PCR
仪上进行冷
/
热骤变循环处理
30
次，取出置于
20℃
下光照静置培养
5h
后，再重复上述冷
/
热骤变循环处理及光照培养，共进行6次；将盐藻藻液置于
25℃
下黑暗静置培养
30min
后，用调制叶绿
素荧光仪在
25℃
下测定盐藻藻液光系统
II
的最大光化学量子产量
F
v
/F
m
，其中，
F
v
表示可变荧光产量，
F
m
表示最大荧光产量
。
文本后续出现的
F
v
/F
m
均表示藻液光系统
II
的最大光化学量子产量
。
[0009]3)
将待测盐藻品系进行步骤
1)
和
2)
中的相同的操作，获得待测盐藻品系的
F
v
/F
m
；将待测盐藻品系的
F
v
/F
m
与步骤
2)
中测得的生产性状好的和差的盐藻品系的
F
v
/F
m
进行显著性差异分析，当待测盐藻品系的
F
v
/F
m
与生产性状好的盐藻品系的
F
v
/F
m
之间无显著性差异，则检测出待测盐藻品系的生产性状是好的；当待测盐藻品系的
F
v
/F
m
与生产性状差的盐藻品系的
F
v
/F
m
之间无显著性差异，则检测出待测盐藻品系的生产性状是差的，从而实现盐藻品系生产性状的检测
。
[0010]所述的步骤
1)
中，使用分光光度计测定盐藻藻液的浊度
T
用于表征盐藻生物量，测定过程中，设定分光光度计的波长为
560nm、
使用
10mm
比色皿
、
以改良的人工海水
(artifical seawater)
培养液作空白对照
。
[0011]所述的步骤
1)
中，盐藻藻液和改良的人工海水
(artifical seawater)
培养液的取用体积具体如下：
[0012]设盐藻藻液的起始浊度为
T1，体积为
V1；拟配制目标藻液的浊度为
T2，体积为
V2；拟添加改良的人工海水
(artifical seawater)
培养液的体积为
V2‑
V1；依据线性稀释原理，由
T1×
V1＝
T2×
V2，得
V1＝
(T2×
V2)/T1，再由
V2‑
V1求出添加改良的人工海水
(artifical seawater)
培养液的量
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种应用冷热骤变循环处理筛检盐藻品系生产性状优劣的方法，其特征在于，包括：
1)
以已知生产性状好的和已知生产性状差的各至少3株盐藻品系为材料，测定各盐藻品系处于对数生长期的藻液的浊度
T
，当浊度大于
0.5
时，则使用改良的人工海水
(artifical seawater)
培养液将藻液的浊度稀释至
0.5
；
2)
将步骤
1)
中的各盐藻品系的藻液分装到聚合酶链反应
PCR(Polymerase Chain Reaction)
管中，然后放入具管内温度传感器及控温功能的聚合酶链反应
PCR
仪上进行冷
/
热骤变循环处理
30
次，取出置于
20℃
下光照静置培养
5h
后，再重复上述冷
/
热骤变循环处理及光照培养，共进行6次；将盐藻藻液置于
25℃
下黑暗静置培养
30min
后，用调制叶绿素荧光仪在
25℃
下测定盐藻藻液光系统
II(PSII)
的最大光化学量子产量
F
v
/F
m
，其中，
F
v
表示可变荧光产量，
F
m
表示最大荧光产量；
3)
将待测盐藻品系进行步骤
1)
和
2)
中的相同的操作，获得待测盐藻品系藻液光系统
II
的最大光化学量子产量；将待测盐藻品系藻液光系统
II
的最大光化学量子产量与步骤
2)
中测得的生产性状好的和差的盐藻品系藻液光系统
II
的最大光化学量子产量进行显著性差异分析，当待测盐藻品系藻液光系统
II
的最大光化学量子产量与生产性状好的盐藻品系藻液光系统
II
的最大光化学量子产量之间无显著性差异，则检测出待测盐藻品系的生产性状是好的；当待测盐藻品系藻液光系统
II
的最大光化学量子产量与生产性状差的盐藻品系藻液光系统
II
的最大光化学量子产量之间无显著性差异，则检测出待测盐藻品系的生产性状是差的，从而实现盐藻品系生产性状的检测
。2.
根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪志平，汪凡越，王丰仪，边永亮，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：