一种消毒剂或抗抑菌剂中抗病毒药物的快速净化及检测方法技术

本发明专利技术提供一种消毒剂或抗抑菌剂中抗病毒药物的快速净化及检测方法，包括：在待测试样中加入提取剂，经涡旋振荡

【技术实现步骤摘要】
一种消毒剂或抗抑菌剂中抗病毒药物的快速净化及检测方法


[0001]本专利技术涉及分析检测
，且特别涉及一种消毒剂或抗抑菌剂中抗病毒药物的快速净化及检测方法
。

技术介绍

[0002]消毒剂和抗抑菌剂因其便捷的使用方式，已经深入到人们的生活和工作中，但它们不是普通的日化产品，其产品的有效性和安全性关系着人们的身体健康，因此对于这两类消毒产品的监管显得尤为重要
。《WS/T 686—2020
消毒剂或抗抑菌剂中抗病毒药物检测方法与评价要求
》
中规定在消毒剂或抗抑菌剂中不得添加抗病毒药物
。
更昔洛韦
、
阿昔洛韦
、
喷昔洛韦和利巴韦林在消毒剂或抗抑菌剂中的含量或总量均不应超过
100mg/kg。
标准中还规定了消毒剂或抗抑菌剂中抗病毒药物的检测方法：4个组分需要分别测定，包括更昔洛韦
、
阿昔洛韦和喷昔洛韦的检测方法和利巴韦林的检测方法
。
其中，更昔洛韦
、
阿昔洛韦和喷昔洛韦的检测方法分为三法，包括高效液相色谱法
、
胶束电动毛细管色谱法
、
超高效液相色谱
‑
串联质谱
(L C/MS)
确证方法
。
利巴韦林的检测方法包括：
1.
电渗流反转的毛细管电泳法；
2.LC
‑
MS
确证方法：以甲醇水混合溶液超声提取试样中的利巴韦林，经
C18
固相萃取柱净化，以
C18
色谱柱分离，用
LC
‑
MS
进行确证
。
[0003]近年来，国内企业在研发消毒剂和抗抑菌剂产品时为使产品获得优异的性能，在产品中添加了多种中草药
、
植物提取物或表面活性剂
、
油脂等助剂，基质相当复杂，因而给产品的成分含量测定造成一定的困难
。
现行国标为能准确评价测定消毒剂或抗抑菌剂中添加的更昔洛韦
、
阿昔洛韦
、
喷昔洛韦和利巴韦林等抗病毒药物，使用各种手段提取
、
净化
、
不同仪器分别进行色谱定量和质谱定性确证
。
由于利巴韦林在
C18
色谱柱保留弱，其测定受基质干扰特别严重，还需要特别的固相萃取净化前处理单独测定利巴韦林，而且定量和定性
、
色谱分离也需要分开分别进行，并不能同时测定以上4种抗病毒药物，过程相当复杂
。
而且已报道的抗病毒药物测定以
LC
‑
MS
应用最为广泛，关于检测方法的报道主要集中在血浆和尿液等生物体液以及兽药中的非法添加领域，包括生物样品
、
食品
、
中药制剂或动物饲料等的药物残留，而对消毒剂或抗抑菌剂中违禁添加抗病毒药物的同时检测方法尚无文献报道
。
[0004]此外，复杂基质样品中的共提物的基质抑制效应强烈，会污染液相及质谱系统，从而严重影响仪器性能，进而影响方法灵敏度和痕量测定结果准确度，因此需要必要的净化手段前处理后才能进质谱测定
。
现有的前处理方法主要以固相萃取柱为主
。
但一般固相萃取柱需要活化
、
淋洗
、
洗脱和浓缩等程序，过程繁琐，影响检测效率，净化成本高，对操作人员要求高
。
虽然能够去除提取剂中的部分杂质，降低基质对目标成分离子化效率的影响，但是净化过程繁杂耗时，净化成本高，对操作人员要求高，且由于各种抗病毒药物的化学性质不同
、
极性差异，易造成某些成分的损失，从而影响定量结果的准确性
。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种消毒剂或抗抑菌剂中抗病毒药物的快速净化及检测方法，待测试验经提取剂提取后通过一步式快速净化柱进行快速净化，然后采用液相色谱串联质谱内标法可同时对消毒剂或抗抑菌剂中的抗病毒药物利巴韦林
、
更昔洛韦
、
阿昔洛韦和喷昔洛韦进行快速检测，该方法前处理过程简便，且灵敏度和精密度高
、
准确性好
、
特异性强
。
[0006]本专利技术解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的
。
[0007]本专利技术提出一种消毒剂或抗抑菌剂中抗病毒药物的快速净化及检测方法，包括以下步骤：
[0008]S1、
样品提取：在待测试样中加入提取剂，经涡旋振荡
、
超声提取
、
冷冻
、
离心后得到含待测物的上清液；
[0009]S2、
样品净化：在所述含待测物的上清液中加入混合内标工作液混匀，通过一步式快速净化柱后过滤，得到待测液；
[0010]S3、
样品检测：采用液相色谱质谱联用内标法对所述待测液进行检测；
[0011]S4、
标准曲线绘制：取待测物标准品和混合内标工作液溶于提取剂中，制成一系列浓度的待测物标准液，按照与步骤
S3
相同的条件检测各浓度的所述待测物标准液，并根据检测结果绘制标准曲线；
[0012]S5、
定性和定量：将所述待测液的检测结果与所述标准曲线比较，确定所述待测液中待测物的种类并计算所述待测试样中待测物的含量
。
[0013]本专利技术实施例的消毒剂或抗抑菌剂中抗病毒药物的快速净化及检测方法的有益效果是：
[0014]1、
本专利技术以甲醇
、
乙腈和1％甲酸水的混合溶液作为提取剂对待检测样品进行提取，然后经冷冻
、
离心，可有效释放结合的残留物及提取目标药物并沉淀部分杂质
。
冷冻离心有利于析出部分脂类成分，再过
SHIMSEN QVet
‑
NM
快速净化柱一步式净化处理，去除脂类及表面活性剂，从而可有效降低
LC
‑
MS
共流出物的基质抑制效应
。
该提取方法具有更高的提取效率，且前处理时间更短，具有较好的净化效果和较高的回收率
。
[0015]2、
本专利技术使用内标法配合一步式小柱净化，稳定快速，无需活化洗脱，样品前处理整体效率可提高
10
倍以上
。
上样后不需淋洗操作，得到的净化液无色
、
透明
、
澄清，且获得的色谱图目标峰附近无杂质干扰，能够准确定量，同时还利于色谱柱和
LC
‑
MS
仪器的长期使用
。
过柱后，不需要氮吹
、
浓缩
、
溶剂转换等常规步骤，可直接进样分析，前处理操作本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种消毒剂或抗抑菌剂中抗病毒药物的快速净化及检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、
样品提取：在待测试样中加入提取剂，经涡旋振荡
、
超声提取
、
冷冻
、
离心后得到含待测物的上清液；
S2、
样品净化：在所述含待测物的上清液中加入混合内标工作液混匀，通过一步式快速净化柱后过滤，得到待测液；
S3、
样品检测：采用液相色谱质谱联用内标法对所述待测液进行检测；
S4、
标准曲线绘制：取待测物标准品和混合内标工作液溶于提取剂中，制成一系列浓度的待测物标准液，按照与步骤
S3
相同的条件检测各浓度的所述待测物标准液，并根据检测结果绘制标准曲线；
S5、
定性和定量：将所述待测液的检测结果与所述标准曲线比较，确定所述待测液中待测物的种类并计算所述待测试样中待测物的含量
。2.
根据权利要求1所述的消毒剂或抗抑菌剂中抗病毒药物的快速净化及检测方法，其特征在于，步骤
S1
中，所述提取剂为甲醇
、
乙腈和甲酸水的混合溶液，且所述甲酸水的质量百分比为1％，所述提取剂中，所述甲醇
、
所述乙腈和所述甲酸水的体积比为
45
：
45
：
10。3.
根据权利要求1所述的消毒剂或抗抑菌剂中抗病毒药物的快速净化及检测方法，其特征在于，步骤
S1
中，所述待测试样和所述提取剂的质量体积比为1：
18
～
22(g/mL)。4.
根据权利要求1所述的消毒剂或抗抑菌剂中抗病毒药物的快速净化及检测方法，其特征在于，步骤
S1
中，所述超声提取
、
冷冻
、
离心的步骤为：加入提取剂的所述待测剂试样经涡旋振荡混匀后，在
35
～
45℃
下超声
10
～
20min
，接着在
‑
20℃
下冷冻至少
1h
后，立即以
7500
～
8500rpm
离心4～
6min。5.
根据权利要求1所述的消毒剂或抗抑菌剂中抗病毒药物的快速净化及检测方法，其特征在于，所述待测物包括利巴韦林
、
阿昔洛韦
、
更昔洛韦和喷昔洛韦
。6.
根据权利要求1所述的消毒剂或抗抑菌剂中抗病毒药物的快速净化及检测方法，其特征在于，步骤
S2
中，所述混合内标工作液为同位素内标的甲醇溶液，所述同位素内标包括利巴韦林
‑
13C5、
阿昔洛韦
‑
D4、
更昔洛韦
‑
D5
和喷昔洛韦
‑
D4
，其中，所述混合内标工作液中，所述利巴韦林
‑
13C5、
所述阿昔洛韦
‑
D4、
所述更昔洛韦

【专利技术属性】
技术研发人员：林宏琳，陈华峰，倪蕾，林国斌，傅武胜，
申请(专利权)人：福建省疾病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：