具有新型结合亲和力的多肽构建体及其用途制造技术

本公开文本总体上涉及多肽构建体，并且特别是涉及对特定同源抗原具有结合亲和力的

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有新型结合亲和力的多肽构建体及其用途
相关申请的交叉引用
[0001]本申请要求
2021
年3月3日提交的美国临时专利申请号
63/156,026
的优先权，其公开内容通过引用以其整体
(
包括任何附图
)
并入本文
。
关于联邦政府资助研发的声明
[0002]本专利技术是在由美国国立癌症研究院授予的授权号
U54 CA232568
‑
01
下在政府支持下完成的
。
政府享有本专利技术的某些权利
。


[0003]本公开文本总体上涉及免疫学领域，并且特别涉及对特定抗原具有结合亲和力的多肽构建体
。
本公开文本还提供了可用于产生此类构建体的组合物和方法，以及用于诊断
、
预防和
/
或治疗与表达由所述多肽构建体识别的同源抗原的细胞相关的健康状况的方法
。

技术介绍

[0004]近年来，广泛使用免疫检查点阻断和基于
T
细胞的免疫疗法来治疗患有实体瘤的患者，需要对癌症中
T
细胞的特异性具有更深入的了解
。
例如，
T
细胞受体
(TCR)
近年来已经成为一种有前景的免疫治疗方法，并且在由多家制药公司和生物技术公司进行的临床试验中成为头条新闻
。
已经显示
TCR
具有治疗和诊断潜力，并且可以类似于抗体分子地加以修饰
。
特别地，
TCR
对特定抗原的亲和力使得它们对于包括过继免疫疗法在内的多种治疗策略是有价值的
。
[0005]然而，尽管免疫疗法广泛用于治疗癌症，但是对
T
细胞在癌症中的特异性的总体理解是有限的
。
例如，抗原特异性是
T
细胞功能的关键决定因素，但是由
TCR
多样性和人白细胞抗原
(HLA)
等位基因多态性造成的挑战已经成为理解由肿瘤浸润
T
细胞识别的抗原的全部范围的重大障碍
。
另外，尽管使用单细胞测序技术可以获得用于剖析
T
细胞状态和库的先进技术，但是绝大多数肿瘤浸润
T
细胞在所有实体瘤中的特异性仍然是未知的
。
这主要是由于没有用于在高度多态性人白细胞抗原
(HLA)
等位基因的背景下分析多样性
TCR
库的工具
。
例如，虽然下一代测序技术使大量
TCR
的测序变得相对简单和便宜，但是主要问题围绕着如何能够分析这些非常大的库
。
这是因为对于相同的肽
‑
MHC
特异性，可能存在成百上千个可能的
TCR
序列
。
[0006]因此，揭示肿瘤浸润性
T
细胞的特异性对于理解
T
细胞内在因素如何影响肿瘤免疫系统相互作用以及如何影响旨在利用针对癌症的
T
细胞应答的疗法具有重要意义
。

技术实现思路

[0007]本公开文本总体上涉及免疫学领域
。
更具体地，本文提供对特定抗原具有结合亲和力的新型多肽构建体
。
本公开文本还提供可用于产生此类多肽构建体的组合物和方法，以及用于诊断
、
预防和
/
或治疗与表达由所述多肽构建体识别的同源抗原的细胞相关的病症的方法
。
特别地，还提供已经被工程化以表达如本文所公开的多肽构建体并且针对目的
细胞如癌细胞的重组细胞，如淋巴细胞
T
细胞
。
[0008]在一个方面，本文提供包括至少一个互补决定区
(CDR)
的多种构建体，所述至少一个互补决定区与选自
SEQ ID NO:1
‑
106
的序列具有至少
70
％
、75
％
、80
％
、85
％
、90
％
、95
％
、96
％
、97
％
、98
％
、99
％或
100
％序列同一性
。
[0009]所公开的构建体的非限制性示例性实施方案可以包括以下特征中的一种或多种
。
在一些实施方案中，所述至少一个
CDR
与选自
SEQ ID NO:1
‑
56
的序列具有至少
70
％
、75
％
、80
％
、85
％
、90
％
、95
％
、96
％
、97
％
、98
％
、99
％或
100
％序列同一性
。
在一些实施方案中，所述至少一个
CDR
与
SEQ ID NO:18
具有至少
70
％
、75
％
、80
％
、85
％
、90
％
、95
％
、96
％
、97
％
、98
％
、99
％或
100
％序列同一性
。
在一些实施方案中，所述至少一个
CDR
与选自
SEQ ID NO:57
‑
106
的序列具有至少
70
％
、75
％
、80
％
、85
％
、90
％
、95
％
、96
％
、97
％
、98
％
、99
％或
100
％序列同一性
。
在一些实施方案中，所述至少一个
CDR
与
SEQ ID NO:64
具有至少
70
％
、75
％
、80
％
、85
％
、90
％
、95
％
、96
％
、97
％
、98
％
、99
％或
100
％序列同一性
。
在一些实施方案中，所述构建体是单链构建体或双链构建体
。
在一些实施方案中，所述构建体选自：
(a本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
一种包含至少一个互补决定区
(CDR)
的构建体，所述至少一个互补决定区与选自
SEQ ID NO:1
‑
106
的序列具有至少
70
％
、75
％
、80
％
、85
％
、90
％
、95
％
、96
％
、97
％
、98
％
、99
％或
100
％序列同一性
。2.
根据权利要求1所述的构建体，其中所述至少一个
CDR
与选自
SEQ ID NO:1
‑
56
的序列具有至少
70
％
、75
％
、80
％
、85
％
、90
％
、95
％
、96
％
、97
％
、98
％
、99
％或
100
％序列同一性
。3.
根据权利要求1所述的构建体，其中所述至少一个
CDR
与选自
SEQ ID NO:57
‑
106
的序列具有至少
70
％
、75
％
、80
％
、85
％
、90
％
、95
％
、96
％
、97
％
、98
％
、99
％或
100
％序列同一性
。4.
根据权利要求1至3中任一项所述的构建体，其中所述构建体是单链构建体或双链构建体
。5.
根据权利要求1至4中任一项所述的构建体，其中所述构建体选自：
(a)T
细胞受体
(TCR)
；
(b)
抗体；以及
(c)(a)
或
(b)
的功能性衍生物或片段
。6.
根据权利要求1至5中任一项所述的构建体，其中所述构建体是包含彼此可操作地连接的
TCR
α
链和
TCR
β
链的
TCR
构建体
。7.
根据权利要求1至6中任一项所述的构建体，其中所述构建体是在其
β
链中包含与选自
SEQ ID NO:1
‑
106
的序列具有至少
70
％
、75
％
、80
％
、85
％
、90
％
、95
％
、96
％
、97
％
、98
％
、99
％或
100
％序列同一性的
CDR3
β
的
TCR
构建体
。8.
根据权利要求7所述的构建体，其中所述构建体在其
α
链中进一步包含
CDR3
α
序列
。9.
根据权利要求1至8中任一项所述的构建体，其中构建体是选自以下的抗体构建体：抗原结合片段
(Fab)、
单链可变片段
(scFv)、
纳米抗体
、
单结构域抗体
(sdAb)、V
H
结构域
、V
L
结构域
、V
H
H
结构域
、
双抗体或其中任一种的功能性片段
。10.
一种重组核酸，所述重组核酸包含编码根据权利要求1至9中任一项所述的构建体的核酸序列
。11.
根据权利要求
10
所述的核酸，其中所述核酸序列与异源核酸序列可操作地连接
。12.
根据权利要求
10
至
11
中任一项所述的核酸，其中所述核酸分子被进一步配置为表达盒或载体
。13.
根据权利要求
12
所述的核酸，其中所述载体是质粒载体或病毒载体
。14.
根据权利要求
13
所述的核酸，其中所述病毒载体源自慢病毒
、
腺病毒
、
腺相关病毒
、
杆状病毒或逆转录病毒
。15.
一种工程化细胞，所述工程化细胞包含：
a)
根据权利要求1至9中任一项所述的构建体；和
/
或
b)
根据权利要求
10
至
14
中任一项所述的重组核酸
。16.
根据权利要求
15
所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞是真核细胞
。17.
根据权利要求
16
所述的工程化细胞，其中所述真核细胞是哺乳动物细胞
。18.
根据权利要求
17
所述的工程化细胞，其中所述哺乳动物细胞是人细胞
。19.
根据权利要求
15
至
18
中任一项所述的工程化细胞，其中所述细胞是免疫细胞
。20.
根据权利要求
19
所述的工程化细胞，其中所述免疫细胞是
B
细胞
、
单核细胞
、
自然杀伤
(NK)
细胞
、
自然杀伤
T(NKT)
细胞
、
嗜碱性粒细胞
、
嗜酸性粒细胞
、
嗜中性粒细胞
、
树突细胞
、
巨噬细胞
、
调节性
T
细胞
、
辅助性
T
细胞
(T
H
)、
细胞毒性
T
细胞
(T
CTL
)、
记忆
T
细胞
、gamma delta(
γδ
)T
细胞
、
另一种
T
细胞
、
造血干细胞或造血干细胞祖细胞
。
21.
根据权利要求
20
所述的工程化细胞，其中所述免疫细胞是淋巴细胞
。22.
根据权利要求
21
所述的工程化细胞，其中所述淋巴细胞是
T
淋巴细胞或
T
淋巴细胞祖细胞
。23.
根据权利要求
22
所述的工程化细胞，其中所述
T
淋巴细胞是
CD4+T
细胞或
CD8+T
细胞
。24.
根据权利要求
22
至
23
中任一项所述的工程化细胞，其中所述
T
淋巴细胞是选自以下的
CD8+T
细胞毒性淋巴细胞：幼稚
CD8+T
细胞
、
中枢记忆
CD8+T
细胞
、
效应记忆
CD8+T
细胞
、
效应
CD8+T
细胞
、CD8+
干细胞记忆
T
细胞和大量
CD8+T
细胞
。25.
根据权利要求
22
至
23
中任一项所述的工程化细胞，其中所述
T
淋巴细胞是选自以下的
CD4+T
辅助性淋巴细胞：幼稚
CD4+T
细胞
、
中枢记忆
CD4+T
细胞
、
效应记忆
CD4+T
细胞
、
效应
CD4+T
细胞
、CD4+
干细胞记忆
T
细胞和大量
CD4+T
细胞
。26.
一种用于制备工程化细胞的方法，所述方法包括：
a)
提供能够进行蛋白质表达的宿主细胞；以及
b)
用根据权利要求
10
至
14
中任一项所述的重组核酸转导所提供的宿主细胞以产生工程化细胞
。27.
一种工程化细胞，所述工程化细胞通过根据权利要求
26
所述的方法产生
。28.
一种细胞培养物，所述细胞培养物包含至少一种根据权利要求
15
‑
25
和
27
中任一项所述的工程化细胞和培养基
。29.
一种药物组合物，所述药物组合物包含药学上可接受的载体，以及：
a)
根据权利要求1至9中任一项所述的构建体；
b)
根据权利要求
10
至
14
中任一项所述的重组核酸；和
/
或
c)
根据权利要求
15
‑
25
和
27
中任一项所述的工程化细胞
。30.
根据权利要求
29
所述的药物组合物，其中所述组合物包含根据权利要求
10
至
14
中任一项所述的重组核酸和药学上可接受的载体
。31.
根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：S，
申请(专利权)人：小利兰，
类型：发明
国别省市：