镉污染检测方法和标记物技术

本发明专利技术属于重金属检测方法技术领域，具体涉及镉污染检测方法和标记物

【技术实现步骤摘要】
镉污染检测方法和标记物


[0001]本专利技术属于重金属检测方法
，具体涉及镉污染检测方法和标记物
。

技术介绍

[0002]镉是人体非必需元素，在自然界中常以化合物状态存在，一般含量很低，正常环境状态下，不会影响人体健康
。
当环境受到镉污染后，镉可在生物体内富集，通过食物链进入人体引起慢性中毒
。
水体中镉的污染主要来自地表径流和工业废水
。
工业废水的排放使近海海水和浮游生物体内的镉含量高于远海，工业区地表水的镉含量高于非工业区
。
[0003]镉的化学分析通常可以分为3类：原子吸收光谱法
、
比色法和电感耦合等离子体发射光谱法
。
但这些方法前处理繁琐，并且使用的试剂腐蚀性强，对操作人员的安全造成威胁
。
另外，镉广泛分布于自然界中，镉检测对于限量低的痕量分析准确度低
。
亟需开发一种安全
、
检出限低
、
不易污染的检测方法
。
[0004]专利申请
CN106191247A
公开了一种用修复蛋白6（
MSH6
）基因检测水中镉污染的方法，用鱼作为监测水污染的生物样本，所述的
MSH6
基因作为监测水中镉污染的敏感生物标记物，测试
MSH6
基因的相对表达量来监测水体污染程度
。
该方法能灵敏反应出水体是否污染及污染程度，甚至能敏感地测出微量污染源；同时也能从生物的角度敏感地监测重金属镉污染的危害性和危害程度，为水体生态环境监测
、
毒理诊断
、
调控和防治提供准确
、
快速的科学方法
。
但所使用的生物为青鳉鱼，该鱼主要见于淡水中，并喜栖于水生植物浓密
、
水质清澈的静水或缓流中，因此在检测海水污染上有一定的限制
。
[0005]史氏背尖贝广泛分布于各岛屿沿岸，为习见种类
。
一般生活在高
、
中潮带岩石上和石块腹面
。
有研究表明（刘阳
, 相杰友
, 张凡顺
. 青岛近海潮间带生物体重金属含量及评价
[J]. 河北渔业
, 2019(11). ），青岛近海潮间带调查生物中重金属含量差异较大，不同生物对重金属元素富集具有偏好性，长牡蛎中
Cu
及
Zn
的含量最高，锈凹螺中
Pb、As、Hg
及
Cr
含量最高，史氏背尖贝中
Cd
的含量最高
。
但现有技术并未报道史氏背尖贝基因与水中镉含量的关系
。

技术实现思路

[0006]为了解决上述问题，本专利技术提供了一种镉污染检测方法和标记物
。
所述的标记物为史氏背尖贝中
NsWz
‑4基因，该基因的表达量与镉含量呈正相关，通过检测水体史氏背尖贝中
NsWz
‑4的表达量从而确定该水体中镉的含量
。
[0007]本文所用的“NsWz
‑4的含量”可以指
NsWz
‑4的表达量，
NsWz
‑4的表达量测定方法可以选自实时荧光定量
PCR、RNA
测序或
Northern blot
，但并不限于这些检测方法
。
[0008]一方面，本专利技术提供了一种水中镉污染检测标志物，所述的标志物为水中史氏背尖贝
NsWz
‑4基因，其序列如
SEQ ID NO.1
所示
。
[0009]另一方面，本专利技术提供了前述的标志物检测镉污染的方法，所述的方法可以是对
NsWz
‑4基因表达量的测定
。
[0010]具体地，所述的
NsWz
‑4基因表达量与水中镉的含量呈正相关
。
[0011]具体地，所述的方法可以包括以下步骤：（1）史氏背尖贝基因提取；（2）前述的
NsWz
‑4基因表达量的测定
。
[0012]具体地，步骤（1）所述的史氏背尖贝基因提取方法不限于使用
DNA
提取试剂盒
。
[0013]具体地，步骤（2）所述的测定方法包括但不限于：实时荧光定量
PCR、RNA
测序或
Northern blot
中的一种
。
[0014]优选地，步骤（2）所述的测定方法为实时荧光定量
PCR
；所述的实时荧光定量
PCR
中的逆转录引物可以是
Oligo dT
和
Random 6 mers
，扩增引物可以是
SEQ ID NO.2
‑
SEQ ID NO.3。
[0015]又一方面，本专利技术提供了前述的标志物或方法在水质监测中的应用
。
[0016]具体地，所述的水质监测可以是测定水中镉的含量
。
[0017]进一步具体地，所述的镉含量可以通过
NsWz
‑4基因的表达量确定
。
[0018]具体地，所述的镉含量与
NsWz
‑4基因的表达量呈正相关
。
[0019]具体地，所述的
NsWz
‑4基因的表达量的测定方法包括但不限于：实时荧光定量
PCR、RNA
测序或
Northern blot
中的一种
。
[0020]优选地，所述的测定方法为实时荧光定量
PCR
；所述的实时荧光定量
PCR
中的逆转录引物可以是
Oligo dT
和
Random 6 mers
，扩增引物可以是
SEQ ID NO.2
‑
SEQ ID NO.3。
[0021]进一步具体地，所述的
NsWz
‑4基因的表达量大于5时，存在镉污染
。
[0022]具体地，所述的水可以是海水
。
[0023]本专利技术所取得的的技术效果：（1）
NsWz
‑4基因表达量与水中镉的含量呈正相关，拟合方程为
y = 20.288x
ꢀ‑ꢀ
95.358
，
R2= 0.9846。
当表达量
>5
，说明存在镉污染
。
[0024]（2）与现有技术中的检测方法相比，简化了样品前处理步骤，避免了强腐蚀性试剂对检测人员的危害，具有实验方法简单
、
检测速度快
、
稳定性高等优点
。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种水中镉污染检测标志物，其特征在于，所述的标志物为水中史氏背尖贝
NsWz
‑4基因，其序列如
SEQ ID NO.1
所示
。2.
权利要求1所述的标志物检测镉污染的方法，其特征在于，所述的方法为对
NsWz
‑4基因表达量的测定
。3.
根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的
NsWz
‑4基因表达量与水中镉的含量呈正相关
。4.
根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述的方法包括以下步骤：（1）史氏背尖贝基因提取；（2）权利要求1所述的
NsWz
‑4基因表达量的测定
。5.
根据权利要求4所述的方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：王绪敏，曲江勇，王丽君，刘秀梅，邢志凯，王爽，张伟华，
申请(专利权)人：烟台大学，
类型：发明
国别省市：