用于治疗遗传性血管性水肿的组合物和方法技术

本发明专利技术描述编码

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗遗传性血管性水肿的组合物和方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求
2021
年1月
27
日提交的第
63/142,121
号美国临时专利申请
、2021
年4月
30
日提交的第
63/201,466
号美国临时专利申请和
2021
年9月
24
日提交的第
63/261,603
号美国临时专利申请的优先权
。
前述申请内容整体援引加入本文，包括所有文本
、
表格
、
序列表和附图
。


[0003]本专利技术涉及基因治疗领域
。
特别地，本专利技术涉及一种用于表达人
C1
抑制物的优化的盒及利用其来治疗补体介导的病症，特别是遗传性血管性水肿的方法
。
[0004]电子提交的序列表的引用
[0005]本申请包含通过
EFS
‑
Web
电子方式提交
、
文件名为“Sequence Listing5WO1”的
ASCII
格式的序列表，创建日期为
2022
年1月
27
日且大小为
727kb。
通过
EFS
‑
Web
提交的序列表是本说明书的一部分并且整体援引加入本文
。
背景技术
[0006]遗传性血管性水肿
(HAE)
，又称为
C1
酯酶抑制物缺乏
、C1
抑制物缺乏
、HANE、
奎英克
(Quincke)
水肿和继发性血管神经性水肿，是一种罕见的
、
可能危及生命的常染色体显性基因疾病，约
50,000
人中有1人发病
。HAE
的特征为反复发作的肿胀，其经常影响皮肤或上呼吸道和胃肠道的粘膜组织
(Banerji,Ann Allergy Asthma Immunol,111:329
‑
336(2013)
；
Aygoren
‑
Pursun et al.,Orphanet J Rare Dis.,9:99(2014))。
[0007]由于缓激肽过量产生，当血浆通过血管泄露至组织时
HAE
发生
。
发病机制据认为包括活化因子
XII(F12)
裂解前激肽释放酶
(PKK)
，并释放活性血浆激肽释放酶，从而激活更多
F12。
血浆激肽释放酶接着裂解激肽原，释放缓激肽，而缓激肽与内皮细胞上的
B2
缓激肽受体结合，增加内皮通透性
。
通常情况下，
C1
酯酶抑制物
(
由
SERPING1
基因编码
)
通过抑制血浆激肽释放酶和
F12
的激活来控制缓激肽的生产
(Busse et al.,N Engl JMed.,382(12):1136
‑
1148(2020))。
[0008]HAE
有
HAE
‑
C1
‑
INH
和
HAE
‑
nl
‑
C1
‑
INH
两种类型
。HAE
‑
C1
‑
INH
是由
SERPING1
基因
(
编码
C1
抑制物
)
突变所导致，其导致血液中活性
C1
抑制物低水平
。HAE
‑
C1
‑
INH
存在两种亚型：
I
型
HAE
占病例的
85
％，由突变
C1
抑制物蛋白不能分泌至血液中引起；
II
型
HAE
占其余的
15
％病例，由分泌但功能失调的突变
C1
抑制物引起的
。2000
年首次描述
HAE
‑
nl
‑
C1
‑
INH
，但尚未完全了解
。
部分
HAE
‑
nlC1
‑
INH
患者有凝血因子
XII
突变，但多数患者没有已知突变，并且
C1
抑制物基因正常
(website:www.angioedemacenter.com/patientresources/angioedema
‑
types/)。
[0009]目前，治疗剂适用于长期预防
、
急性发作治疗和短期预防
(
例如，在牙科手术之前
)
，也包括有高副作用的药剂
(
例如达那唑
)、
血浆衍生的或重组
C1
抑制物替代蛋白
、
缓激肽受体拮抗剂
(
例如艾替班特
)、
激肽释放酶抑制物
(
例如艾卡拉肽
)、
新鲜冷冻血浆和纯化
的
C1
抑制物
。
这些疗法可以减轻症状并最大限度提高生活质量；然而，疾病复发和需要长期持续给药仍然是治疗的主要障碍
(Aberer,Ann Med,44:523
‑
529(2012)
；
Charignon et al.,Expert Opin Pharmacother,13:2233
‑
2247(2012)、Papadopoulou
‑
Alataki,Curr Opin Allergy Clin Immunol,10:20
‑
25(2010)、Parikh et al.,Curr Allergy Asthma Rep,11:300
‑
308(2011)、Tourangeau et al.,Curr Allergy Asthma Rep,11:345
‑
351(2011)、Bowen et al.,Ann Allergy Asthma Immunol,100:S30
‑
S40(2008)、Frank,Immunol Allergy Clin North Am,26:653
‑
668(2006)、Cicardi et al.,J A本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
一种多核苷酸，其包含编码
C1
抑制物的核酸，其中所述核酸与
C1
抑制物的野生型编码序列相比是
CpG
减少的和
/
或密码子优化的
。2.
权利要求1的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含与
SEQ ID NO:238、236
或
243
至少
85
％相同的核酸序列，并且所述
C1
抑制物包含与
SEQ ID NO:181
至少
93
％相同的序列
。3.
权利要求2的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含与
SEQ ID NO:238
至少
85
％相同的核酸序列，所述
C1
抑制物包含与
SEQ ID NO:181
至少
95
％相同的序列
。4.
权利要求3的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含与
SEQ ID NO:238
至少
95
％相同的核酸序列，并且所述
C1
抑制物包含与
SEQ ID NO:181
至少
95
％相同的序列
。5.
权利要求4的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含与
SEQ ID NO:238
至少
97
％相同的核酸序列，所述
C1
抑制物包含
SEQ ID NO:181。6.
权利要求2‑5任一项的多核苷酸，其中所述多核苷酸进一步包含在所述核酸序列5’
末端的信号肽序列，并且所述信号肽序列与
SEQ ID NO:264
的核酸至少
95
％相同
。7.
权利要求1的多核苷酸，其中所述核酸选自：
(1)
与
SEQ ID NO:105
的序列具有至少
83
％序列相同性的多核苷酸；
(2)
与
SEQ ID NO:106
的序列具有至少
83
％序列相同性的多核苷酸；
(3)
与
SEQ ID NO:107
的序列具有至少
80
％序列相同性的多核苷酸；
(4)
与
SEQ ID NO:108
的序列具有至少
80
％序列相同性的多核苷酸；
(5)
与
SEQ ID NO:109
的序列具有至少
83
％序列相同性的多核苷酸；
(6)
与
SEQ ID NO:110
的序列具有至少
84
％序列相同性的多核苷酸；
(7)
与
SEQ ID NO:111
的序列具有至少
80
％序列相同性的多核苷酸；
(8)
与
SEQ ID NO:112
的序列具有至少
83
％序列相同性的多核苷酸；
(9)
与
SEQ ID NO:113
的序列具有至少
82
％序列相同性的多核苷酸；
(10)
与
SEQ ID NO:114
的序列具有至少
82
％序列相同性的多核苷酸；
(11)
与
SEQ ID NO:115
的序列具有至少
82
％序列相同性的多核苷酸；
(12)
与
SEQ ID NO:116
的序列具有至少
80
％序列相同性的多核苷酸；
(13)
与
SEQ ID NO:117
的序列具有至少
80
％序列相同性的多核苷酸；
(14)
与
SEQ ID NO:118
的序列具有至少
83
％序列相同性的多核苷酸；
(15)
与
SEQ ID NO:119
的序列具有至少
80
％序列相同性的多核苷酸；
(16)
与
SEQ ID NO:120
的序列具有至少
80
％序列相同性的多核苷酸；
(17)
与
SEQ ID NO:121
的序列具有至少
80
％序列相同性的多核苷酸；
(18)
与
SEQ ID NO:122
的序列具有至少
83
％序列相同性的多核苷酸；
(19)
与
SEQ ID NO:123
的序列具有至少
93
％序列相同性的多核苷酸；
(20)
与
SEQ ID NO:124
的序列具有至少
92
％序列相同性的多核苷酸；
(21)
与
SEQ ID NO:125
的序列具有至少
89
％序列相同性的多核苷酸；
(22)
与
SEQ ID NO:126
的序列具有至少
86
％序列相同性的多核苷酸；
(23)
与
SEQ ID NO:127
的序列具有至少
92
％序列相同性的多核苷酸；
(24)
与
SEQ ID NO:128
的序列具有至少
89
％序列相同性的多核苷酸；
(25)
与
SEQ ID NO:129
的序列具有至少
89
％序列相同性的多核苷酸；
(26)
与
SEQ ID NO:130
的序列具有至少
91
％序列相同性的多核苷酸；
(27)
与
SEQ ID NO:131
的序列具有至少
92
％序列相同性的多核苷酸；
(28)
与
SEQ ID NO:132
的序列具有至少
93
％序列相同性的多核苷酸；
(29)
与
SEQ ID NO:133
的序列具有至少
93
％序列相同性的多核苷酸；
(30)
与
SEQ ID NO:134
的序列具有至少
87
％序列相同性的多核苷酸；
(31)
与
SEQ ID NO:135
的序列具有至少
89
％序列相同性的多核苷酸；
(32)
与
SEQ ID NO:136
的序列具有至少
93
％序列相同性的多核苷酸；
(33)
与
SEQ ID NO:137
的序列具有至少
93
％序列相同性的多核苷酸；
(34)
与
SEQ ID NO:138
的序列具有至少
87
％序列相同性的多核苷酸；
(35)
与
SEQ ID NO:139
的序列具有至少
86
％序列相同性的多核苷酸；
(36)
与
SEQ ID NO:140
的序列具有至少
86
％序列相同性的多核苷酸；
(37)
与
SEQ ID NO:141
的序列具有至少
86
％序列相同性的多核苷酸；任选地，所述
C1
抑制物包含
SEQ ID NO:181
或
192
的氨基酸序列
。8.
权利要求1‑7任一项的多核苷酸，其中所述核酸含有少于
24
个
CpG
二核苷酸，任选地0个
CpG
二核苷酸
。9.
权利要求1的多核苷酸，其中所述核酸具有
SEQ ID NO:105
‑
142、145
‑
147、156、171
和
172
任一个的多核苷酸序列
。10.
一种多核苷酸，其包含编码变体
C1
抑制物的核酸，其中所述核酸选自
SEQ ID NO:143
‑
144、158
和
165
‑
170
，任选地，所述变体
C1
抑制物包含
SEQ ID NO:193
‑
201
任一个的氨基酸序列
。11.
一种多核苷酸，其包含编码
C1
抑制物的核酸，其中所述核酸包含
SEQ ID NO:119
的序列，并且其中所述
C1
抑制物包含
192
的氨基酸序列
。12.
权利要求1‑5和7‑
11
任一项的多核苷酸，其包含编码信号肽序列的核酸，所述核酸可操作地连接至编码
C1
抑制物或变体
C1
抑制物的多核苷酸序列的5’
末端
。13.
权利要求
12
的多核苷酸，其中所述信号肽选自
C1
抑制物信号肽
、
人胰凝乳蛋白酶原
B2
信号肽
、ALB
信号肽
、ORM1
信号肽
、TF
信号肽
、AMBP
信号肽
、LAMP1
信号肽
、BTN2A2
信号肽
、CD300
信号肽
、NOTCH2
信号肽
、STRC
信号肽
、AHSG
信号肽
、SYN1
信号肽
、SYN2
信号肽
、SYN3
信号肽和
SYN4
信号肽
。14.
权利要求
13
的多核苷酸，其中所述信号肽具有
SEQ ID NO:84
‑
103
之一的多核苷酸序列
。15.
一种表达盒，其包含权利要求1‑
14
任一项的多核苷酸，可操作地连接至表达控制元件
。16.
权利要求
15
的表达盒，其进一步包含可操作地连接至编码
C1
抑制物的核酸的3’
末端的多聚腺苷酸化序列
。17.
权利要求
15
或
16
的表达盒，其中所述表达控制元件或多聚腺苷酸化序列与野生型表达控制元件或多聚腺苷酸化序列相比是
CpG
减少的
。
18.
权利要求
15
‑
18
任一项的表达盒，其中所述表达控制元件包含
ApoE/hAAT
增强子
/
启动子序列
。19.
权利要求
15
‑
18
任一项的表达盒，其中所述多聚腺苷酸化序列包含牛生长激素
(bGH)
多聚腺苷酸化序列
。20.
权利要求
18
或
19
的表达盒，其中所述
ApoE/hAAT
增强子
/
启动子序列或
bGH
多聚腺苷酸化序列与野生型
ApoE/hAAT
增强子
/
启动子序列或
bGH
多聚腺苷酸化序列相比是
CpG
减少的
。21.
权利要求
18
‑
20
任一项的表达盒，其中所述
ApoE
增强子序列包含
SEQ ID NO:225
和
74
‑
76
之一的多核苷酸序列
。22.
权利要求
18
‑
21
任一项的表达盒，其中所述
hAAT
启动子序列包含
SEQ ID NO:79
或
80
的多核苷酸序列
。23.
权利要求
18
‑
22
任一项的表达盒，其中所述
bGH
多聚腺苷酸化序列包含
SEQ ID NO:83
的多核苷酸序列
。24.
权利要求
15
‑
23
任一项的表达盒，其进一步包含内含子
。25.
权利要求
24
的表达盒，其中所述内含子包含人血红蛋白
β
(HBB)
‑
衍生的内含子
。26.
权利要求
25
的表达盒，其中所述人血红蛋白
β
(HBB)
‑
衍生的内含子序列包含
SEQ ID NO:81
或
82
的多核苷酸序列
。27.
权利要求
15
‑
26
任一项的表达盒，其进一步包含一个或多个增强子
。28.
权利要求
27
的表达盒，其中所述增强子选自
ApoE、2xApoE、4xApoE、hAAT、WPRE3
和
WPRE。29.
权利要求
28
的表达盒，其中所述增强子序列是密码子优化的
。30.
权利要求
28
或
29
的表达盒，其中所述增强子包含
SEQ ID NO:225
和
74
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：C，
申请(专利权)人：斯帕克治疗公司，
类型：发明
国别省市：