SP10/ACP/PSA制造技术

本发明专利技术公开了一种

【技术实现步骤摘要】
SP10/ACP/PSA三联检试纸条及其制备工艺


[0001]本专利技术涉及快速诊断的
，尤其是涉及一种
SP10/ACP/PSA
三联检试纸条及其制备工艺
。

技术介绍

[0002]男性不育症往往表现为精液异常，因此精液检验在临床上占有重要地位
。
它对男性不育症的诊断和治疗有重要指导作用，是估计生育能力，指导治疗
、
判断预后不可缺少的办法
。
[0003]精子浓度是衡量男性不育的一项重要指标，当精子的浓度少于
15
×
106个
/mL
时，被认为生育困难
。
基于解剖学
、
遗传学和生化特征，
SP10
蛋白已被证实可用作指示男性精子浓度的生物标志物，其仅在睾丸中有表达，是精子生成历程中最后一步才分化的标志物
。
据研究表明，
SP10
蛋白的浓度呈现出一定的线性关系，即可通过检测
SP10
蛋白的浓度来定量分析出精子的数量
。
[0004]在精子的排放
、
存活
、
活力
、
运送和受精中，精浆的各种成分起着关键性作用，精浆中约
30
％为前列腺液，因此前列腺的分泌功能状态影响精子质量
。
酸性磷酸酶
(ACP)
和前列腺特异抗原
(PSA)
是前列腺的特征性分泌物，是精浆的重要成分
。ACP
和
PSA
可作为反映精子密度和精子活力降低以及精液黏度的实验性指标
。
[0005]ACP
作为前列腺分泌功能的指标，此水平可反映前列腺分泌功能状态
。ACP
参与精子的代谢和调控
。
若精子活力
、
精液黏度和密度异常，
ACP
均明显减低
。
[0006]人类精液射出体外后会立即发生凝固，并在短时间内液化，
PSA
在液化过程中起着主要作用，其生理功能为降解精液凝胶中主要蛋白，使精液在5～
15min
内液化，释放精子
。
当精子黏度增高，
PSA
含量会明显降低
。PSA
亦可通过其激肽释放酶作用使精液中缓激肽或缓激肽样代谢物增加，使精子活力增强
。
精子活力降低，
PSA
明显降低
。
总之，精浆中
ACP
和
PSA
含量与精子质量密切相关，可作为不育症的实验诊断指标
。
目前在临床上，以上三个指标只能逐一进行，检测效率低，还会造成耗材浪费，增加检测成本
。

技术实现思路

[0007]基于上述缺陷，本专利技术公开了一种
SP10/ACP/PSA
三联检试纸条及其制备工艺，可同时检测三种指标，且产品结构简单
、
操作方便
、
便捷，节约人工成本和时间成本
。
[0008]第一方面，本专利技术提供了一种
SP10/ACP/PSA
三联检试纸条，采用如下技术方案：一种
SP10/ACP/PSA
三联检试纸条，包括底板
、
样品垫
、
结合垫
、
硝酸纤维素膜和吸水膜，所述样品垫
、
结合垫
、
硝酸纤维素膜和吸水膜顺次搭接粘贴在底板上，所述硝酸纤维素膜上设置第一检测线
T1、
第二检测线
T2、
第三检测线
T3
和质控线
C
；所述第一检测线
T1
上划有
SP10
单克隆抗体1；所述第二检测线
T2
上划有
ACP
单克隆抗体1；所述第三检测线
T3
上划有
PSA
单克隆抗体1；所述质控线
C
上划有亲和素
SA
；所述结合垫上有标记
SP10
单克隆抗体
2、ACP
单克隆抗体
2、PSA
单克隆抗体2的量子点微球
。
[0009]第二方面，本专利技术提供一种
SP10/ACP/PSA
三联检试纸条的制备工艺，采用如下技术方案：一种
SP10/ACP/PSA
三联检试纸条的制备工艺，在量子点微球标记的偶联过程中加入含有生物素
Biotin
‑
BSA
的竞争抑制剂；在量子点微球标记的封闭过程中加入含有乙醇胺的猝灭剂
。
[0010]在一些具体实施方式中，所述量子点微球标记包括如下步骤：
(1)
将量子点微球加入活化液中，形成溶液1，再将
EDC
和
NHS
分别加入活化液中形成溶液2和溶液3，将溶液
1、
溶液2和溶液3进行混匀，得混合溶液；
(2)
向混合溶液中加入偶联液混匀，然后加入
SP10
单克隆抗体
2、ACP
单克隆抗体
2、PSA
单克隆抗体2，偶联
20
～
40min
，再加入竞争抑制剂混匀，继续偶联
1.5
～
2h
，偶联后得微球溶液；
(3)
向微球溶液中加入猝灭剂，反应
30
～
60min
，离心弃上清，再加入封闭液，继续反应1～
1.5h
，得标记的量子点微球
。
[0011]在一些具体实施方式中，所述竞争抑制剂是在羟乙基哌嗪乙硫磺酸的溶液中加入生物素
Biotin
‑
BSA
和
tergitol NP9。
[0012]此溶液中的生物素
Biotin
‑
BSA
可参与标记，当量子点微球与标记抗体结合时，会有一部分微球上的羧基未及时与标记抗体结合，此时加入进去的生物素
Biotin
‑
BSA
会与微球上的羧基结合，从而形成量子点微球
‑
标记抗体
‑
biotin
‑
BSA
的结合物
。
生物素
Biotin
‑
BSA
和亲和素
SA
亲和力高，可不受样本干扰，可形成独立的
C
线系统
。
[0013]此溶液含有
tergitol NP9
为非离子表面活性剂，它不会干扰量子点微球的活性和共价键的结合但是可本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种
SP10/ACP/PSA
三联检试纸条，包括底板
、
样品垫
、
结合垫
、
硝酸纤维素膜和吸水膜，所述样品垫
、
结合垫
、
硝酸纤维素膜和吸水膜顺次搭接粘贴在底板上，其特征在于：所述硝酸纤维素膜上设置第一检测线
T1、
第二检测线
T2、
第三检测线
T3
和质控线
C
；所述第一检测线
T1
上划有
SP10
单克隆抗体1；所述第二检测线
T2
上划有
ACP
单克隆抗体1；所述第三检测线
T3
上划有
PSA
单克隆抗体1；所述质控线
C
上划有亲和素
SA
；所述结合垫上有标记
SP10
单克隆抗体
2、ACP
单克隆抗体
2、PSA
单克隆抗体2的量子点微球
。2.
如权利要求1所述的一种
SP10/ACP/PSA
三联检试纸条的制备工艺，其特征在于：在量子点微球标记的偶联过程中加入含有生物素
Biotin
‑
BSA
的竞争抑制剂；在量子点微球标记的封闭过程中加入含有乙醇胺的猝灭剂
。3.
如权利要求1所述的一种
SP10/ACP/PSA
三联检试纸条的制备工艺，其特征在于，所述量子点微球标记包括如下步骤：（1）将量子点微球加入活化液中，形成溶液1，再将
EDC
和
NHS
分别加入活化液中形成溶液2和溶液3，将溶液
1、
溶液2和溶液3进行混匀，得混合溶液；（2）向混合溶液中加入偶联液混匀，然后加入
SP10
单克隆抗体
2、ACP
单克隆抗体
2、PSA
单克隆抗体2，偶...

【专利技术属性】
技术研发人员：缪佳颖，童坤，肖潇，黄磊，
申请(专利权)人：南京申基医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：