高灵敏度免疫学测定试剂及测定方法技术

本发明专利技术提供一种即使是健康个体水准的血液中的

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】高灵敏度免疫学测定试剂及测定方法


[0001]本专利技术涉及一种高灵敏度地测定生物试样中的物质的试剂及方法
。

技术介绍

[0002]现在，在临床诊断检查的实践中，关于多种检体，要求在短时间内高精度地测定作为疾病诊断的指标的多种物质，并将其结果迅速且准确地反馈至治疗现场
。
例如，多通过在颗粒表面结合了生理活性物质
(
抗体
、
酶
、
受体等蛋白质
、
抗原
、DNA
或
RNA
等核酸物质
、
或者糖链等
)
的测定体系或者利用抗原抗体反应的免疫学测定来实施微量的测定对象物质的准确定量
。
[0003]通常，临床诊断检查所使用的体外诊断试剂的性能主要依赖于主原料的性能
。
主原料大致分为两种
。
一种为以识别目标物质的抗体为代表的生理活性物质，另一种为担载该生理活性物质的颗粒
。
然而，仅依靠具有目标反应性
·
性质的生理活性物质
、
颗粒并不能构建足够的测定方法
。
[0004]在所述利用了使用抗体的抗原抗体反应的体外诊断试剂中，除了像抗体这样的生理活性物质
、
担载该生理活性物质的颗粒以外，还会使用表面活性剂
、
盐
、
人抗体
、
防腐剂
、
增敏剂之类的各种各样的添加剂，这些添加物也是影响体外诊断试剂性能的原因
。
[0005]作为这种高精度的测定所需的试剂的一个实例，以
sCLEC
‑2测定试剂为例进行说明
。C
型凝聚素样受体
2(C
‑
type lectin
‑
like receptor 2
，
CLEC
‑
2)
作为血小板活化蛇毒蛋白
(rhodocytin)
的受体，已在血小板上被鉴定出
。CLEC
‑2在人体内基本上在血小板
·
巨核细胞
(megakaryocyte)
特异地表达，可以说是对血小板特异的分子
。
有文献报告了该
CLEC
‑2在血小板活化时，会以可溶型
CLEC
‑
2(soluble CLEC
‑2，以下缩写为
sCLEC
‑
2)
的形式被释放到血液中
(
专利文献
1、
非专利文献
1)。
[0006]当血液中的
sCLEC
‑2浓度显示高值时，存在表现出某种病情的可能性，为了迅速地掌握这样的情况，高灵敏度且高特异性的测定方法也必不可少
。
[0007]目前为止，血液中的
sCLEC
‑2是通过
ELISA
法而测定的
(
专利文献
1)(
非专利文献1～
3)
，很难说其具有足够的灵敏度，在实际应用于临床现场方面仍然存在技术问题
。
例如，在专利文献1中，考虑到血液中存在的阻害物质的影响，将检体稀释5倍来实施了测定
。
现有技术文献专利文献
[0008]专利文献1：日本特开
2014
‑
070942
号公报专利文献2：日本特愿
2021
‑
003671
号公报非专利文献
[0009]非专利文献1：
F.Kazama et al.,Platelets 2015
；
26(8):711
‑
719
非专利文献2：
Y.Yamashita et al.,Thrombosis Research 178(2019)54
‑
58
非专利文献3：
X.Zhang et al.,Stroke.2019
；
50:45
‑
52

技术实现思路

本专利技术要解决的技术问题
[0010]血液中的
sCLEC
‑2测定已被证明有可能对诊断脑梗塞或心肌梗塞
、
深静脉血栓症
、
肺血栓栓塞症
、
血栓性微血管病
(thrombotic microangiopathy)、
弥散性血管内凝血
(disseminated intravascular coagulation)
等是有用的
。
就这些疾病的患者群体而言，症状非常重且需要重症监护的病例多，死亡率也高，因此早期诊断是重要的
。
为了准确地诊断这些疾病，明确地区分健康个体与血栓症患者最为重要，因此能够进一步准确地测定健康个体的血液中的
sCLEC
‑2浓度是极为重要的
。
[0011]有文献暗示了血液中的
sCLEC
‑2浓度的测定在疾病诊断用途以及治疗效果的监测或预后判定用途中的有用性
(
专利文献
1、2)。
通过对血栓症患者给药抗血小板药，可期待使患者血液中的
sCLEC
‑2的浓度降低至健康个体的
sCLEC
‑2浓度区域
。
因此，即使在作为血栓症患者的治疗效果监测的用途的情况下，能够在健康个体的血液中的
sCLEC
‑2的浓度区域内实施准确的测定也是极为重要的
。
[0012]上述的诊断用途或治疗效果监测及预后判定用途均可通过进一步准确地测定健康个体的血液中的
sCLEC
‑2浓度而实现
。
因此，本专利技术的技术问题在于，提供一种即使是健康个体水准的血液中的
sCLEC
‑2浓度，也能够准确且简便地测定的高灵敏度测定试剂及测定方法
。
解决技术问题的技术手段
[0013]为了准确地测定健康个体的血液中的
sCLEC
‑2浓度，首先需要提高测定灵敏度以便能够测定更低浓度的
sCLEC
‑
2。
此外，需要排除存在于血液中的与
sCLEC
‑2相关的妨碍物质的影响以便能够测定准确的
sCLEC
‑2浓度
。
[0014]本申请的专利技术人为了解决所述技术问题而进行了深入研究
。
其结果发现了通过向血液中的
sCLEC
‑2的测定体系中添加疏水性部分包含以碳原子数为6～
12
的方式构成的直链状
、
支链状或环状的饱和或不饱和烃基<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
一种生理活性物质测定试剂，其包含固定有与生物试样中所含的生理活性物质结合的第一免疫学配偶体的载体
、
与该生理活性物质结合的第二免疫学配偶体，所述测定试剂进一步含有两亲性物质或离液物质，所述两亲性物质的疏水性部分包含以碳原子数为6～
12
的方式构成的直链状
、
支链状或环状的饱和或不饱和烃基
、
以碳原子数为6～
12
的方式构成的芳香族烃基
、
或者类固醇骨架
。2.
根据权利要求1所述的测定试剂，其中，所述疏水性部分包含以碳原子数为6～
12
的方式构成的直链状
、
支链状或环状的烃基
、
以碳原子数为6～
12
的方式构成的芳香族烃基
、
或者类固醇骨架的两亲性物质为具有阴离子性官能团
、
阳离子性官能团
、
两性离子官能团
、
吡喃糖苷基
、
葡糖胺基
、
氧化乙烯基
、
任选被取代的芳香环中的任意一种的化合物
。3.

【专利技术属性】
技术研发人员：松下周平，
申请(专利权)人：美迪恩斯生命科技株式会社，
类型：发明
国别省市：