甲型肝炎病毒抗体及其应用制造技术

本发明专利技术涉及抗体技术领域，具体涉及一种甲型肝炎病毒抗体

【技术实现步骤摘要】
NO.6
所示的氨基酸序列
。
[0007]优选地，所述甲型肝炎病毒抗体或其抗原结合片段的重链可变区具有如
SEQ ID NO.7
所示的氨基酸序列
。
轻链可变区具有如
SEQ ID NO.8
所示的氨基酸序列
。
[0008]本专利技术中，所述抗原结合片段可选自
Fab、Fab'、F(ab')2、Fd、Fv、dAb、
互补决定区片段
、
单链抗体
、
人源化抗体
、
嵌合抗体
、
双特异抗体或多特异抗体
。
[0009]本专利技术提供含有所述甲型肝炎病毒抗体或其抗原结合片段的双特异抗体或多特异抗体
。
[0010]基于上述抗体，本专利技术提供一种核酸分子，其编码所述甲型肝炎病毒抗体或其抗原结合片段
。
[0011]根据上述提供的甲型肝炎病毒抗体或其抗原结合片段的氨基酸序列，本领域技术人员可以确定编码所述甲型肝炎病毒抗体或其抗原结合片段的核酸分子的核苷酸序列，并根据宿主细胞的密码子偏好性选择不同的核酸分子的核苷酸序列
。
[0012]本专利技术还提供一种生物材料，其含有编码所述甲型肝炎病毒抗体或其抗原结合片段的核酸分子，所述生物材料为表达盒
、
载体或宿主细胞
。
[0013]以上所述的表达盒是指将所述核酸分子的上游或下游连接用于转录
、
翻译的调控元件得到的重组核酸分子
。
[0014]以上所述的载体是指可将核酸分子插入其中的一种核酸运载工具，包括但不限于质粒
、
人工染色体
、
噬菌体
、
动物病毒等，可以为表达载体，也可以为克隆载体或非复制型载体
。
[0015]以上所述的宿主细胞可以为微生物细胞（如：大肠杆菌
、
酵母细胞等）或动物细胞（如：昆虫细胞
、CHO
细胞
、BHK
细胞，
HEK293
细胞等用于表达
、
制备抗体的细胞），其中，动物细胞为不能够繁殖成为动物个体的细胞
。
[0016]基于上述甲型肝炎病毒抗体或其抗原结合片段的功能，本专利技术提供所述甲型肝炎病毒抗体或其抗原结合片段
、
所述核酸分子或所述生物材料的如下任一种应用：（1）在制备用于检测甲型肝炎病毒的试剂或试剂盒中的应用；（2）在制备用于预防或治疗甲型肝炎病毒感染或甲型肝炎病毒感染引起疾病的药物中的应用；（3）在制备用于中和甲型肝炎病毒毒力的产品中的应用
。
[0017]以上（1）中所述的检测甲型肝炎病毒包括检测甲型肝炎病毒的存在或其水平
。
[0018]以上（2）中所述的甲型肝炎病毒感染引起疾病包括流行性乙型脑炎及其相关疾病
。
[0019]基于上述甲型肝炎病毒抗体或其抗原结合片段，本专利技术提供一种抗体偶联物，其为由所述甲型肝炎病毒抗体或其抗原结合片段与载体或药物偶联得到，或者由所述甲型肝炎病毒抗体或其抗原结合片段与经化学或生物标记得到
。
[0020]以上所述的载体可为任意可与蛋白质偶联的载体或药物载体
。
[0021]以上所述的化学标记包括同位素
、
胶体金
、
荧光素
、
生物素标记等
。
[0022]以上所述的生物标记包括蛋白标记
、
酶标记等
。
[0023]本专利技术提供一种检测试剂，其含有所述甲型肝炎病毒抗体或其抗原结合片段或含有所述抗体偶联物
。
[0024]以上所述的试剂盒还可包含免疫学检测
、
流式细胞检测等所需的其它试剂
。
[0025]本专利技术提供一种药物组合物，其含有所述甲型肝炎病毒抗体或其抗原结合片段或含有所述抗体偶联物
。
[0026]以上所述的药物组合物还可包含药学上可接受的载体或赋形剂
。
所用载体或赋形剂的类型可根据药物组合物的剂型和给药方式进行选择
。
所述药物组合物还可包含具有其它功效的抗体或药物活性成分
。
[0027]本专利技术的有益效果在于：本专利技术提供一种针对甲型肝炎病毒的单克隆抗体
23E3
，该抗体能够与甲型肝炎病毒特异性结合，具有高度特异性和高结合能力，可用于甲型肝炎病毒的免疫荧光染色和流式细胞染色等检测，即使在较高稀释度时，仍然具有较好的检测效果
。
同时，该抗体对甲型肝炎病毒具有高效的中和能力
。
该抗体为甲型肝炎病毒的检测和诊断提供了有效的工具
。
附图说明
[0028]图1为本专利技术抗体
23E3
对甲肝病毒1的
IC
50
结果图（横轴抗体浓度，纵轴抑制率）；图2为本专利技术抗体
23E3
对甲肝病毒2的
IC
50
结果图（横轴抗体浓度，纵轴抑制率）；图3为本专利技术抗体
23E3
对甲肝病毒3的
IC
50
结果图（横轴抗体浓度，纵轴抑制率）
。
具体实施方式
[0029]下文将结合具体实施方式和实施例，具体阐述本专利技术，本专利技术的优点和各种效果将由此更加清楚地呈现
。
本领域技术人员应理解，这些具体实施方式和实施例是用于说明本专利技术，而非限制本专利技术
。
[0030]实施例
1、
杂交瘤细胞和单克隆抗体的筛选和制备免疫原为甲肝病毒抗原
‑‑‑
TZ84
株
。
将病毒接种
2BS
细胞，培养
、
收获后经
PEG
沉淀与三氯甲烷抽提进行纯化，然后进行超滤浓缩及灭活以制备纯化病毒液
。
[0031]采用甲肝病毒纯化液进行
BALB/c
小鼠初次免疫和加强免疫，通过双后肢足垫免疫
BALB/c
小鼠，剂量为成人剂量的
1/10
；间隔三周，共计免疫三次
。
末次免疫1周后，取小鼠脾脏，分离脾细胞与
SP2/0
细胞进行融合，制备杂交瘤细胞
。
[0032]克隆化后，经
ELISA
初筛，筛选到4株对甲肝具有结合能力的单克隆抗体，编号分别为
a
‑
d
，其中，
a
和
b
对甲肝具有较好的结合能力，
a
的杂交瘤克隆号记为
23E1
，
b
的杂交瘤克隆号记为
23E3
，其抗体类型为
IgG。
[0033]将
23E3本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
甲型肝炎病毒抗体，其特征在于，其重链可变区的互补决定区
CDR1
的氨基酸序列如
SEQ ID NO.1
所示，
CDR2
的氨基酸序列如
SEQ ID NO.2
所示，
CDR3
的氨基酸序列如
SEQ IDNO.3
所示；轻链可变区的互补决定区
CDR1
的氨基酸序列如
SEQ ID NO.4
所示，
CDR2
的氨基酸序列如
SEQ ID NO.5
所示，
CDR3
的氨基酸序列如
SEQ ID NO.6
所示
。2.
根据权利要求1所述的甲型肝炎病毒抗体，其特征在于，其重链可变区的氨基酸序列如
SEQ ID NO.7
所示；轻链可变区的氨基酸序列如
SEQ ID NO.8
所示
。3.
核酸分子，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄启宽，朱国振，刘国卿，
申请(专利权)人：上海精翰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：