一种提高子宫蜕膜干细胞外泌体分泌和应用效果的方法技术

本发明专利技术提供了一种提高子宫蜕膜干细胞外泌体分泌和应用效果的方法，属于干细胞技术领域

【技术实现步骤摘要】
一种提高子宫蜕膜干细胞外泌体分泌和应用效果的方法


[0001]本专利技术属于干细胞
，尤其涉及一种提高子宫蜕膜干细胞外泌体分泌和应用效果的方法
。

技术介绍

[0002]子宫蜕膜干细胞
(Endometrial Stem Cells
，
ESC)
是存在于女性子宫内膜组织中的一种干细胞，也被称之为子宫内膜干细胞
。
子宫内膜是女性生殖系统中的一层组织，它在每个月的月经周期中会经历一次周期性的脱落和再生
。
子宫蜕膜干细胞具有自我更新和多向分化的能力
。
它们可以通过不同的分化路径产生成纤维细胞
、
平滑肌细胞
、
内皮细胞等多种细胞类型
。
这些细胞可以在子宫蜕膜内完成修复和再生，维持子宫内膜的正常功能
。
[0003]外泌体是一种小型的
、
由细胞膜包裹的囊泡，它们可以从一个细胞中分泌出来，然后被其他细胞吸收
。
外泌体中包含了各种生物分子，如蛋白质
、
脂质
、RNA
等，这些分子可以影响接收细胞的行为和功能
。
一些研究发现，子宫蜕膜干细胞分泌的外泌体可以促进皮肤伤口的愈合，并且可能用于治疗烧伤和创伤等皮肤疾病
。
此外，其还可能用于治疗心血管疾病
、
神经退行性疾病等，通过促进受损组织的修复和再生
。
因此，其在再生医学和组织工程中具有潜在的应用价值
。
然而，细胞所分泌的外泌体总体的量较低，因此如何有效的提高外泌体的分泌量是目前需要解决的问题
。
[0004]老药新用是指将原本用于治疗某种疾病的药物，应用于其他疾病的治疗上
。
通过老药新用可以有效的扩宽疾病治疗的选择并且减少研发成本
。
柽柳黄素是一种植物提取物，主要存在于柽柳属植物中
(
如柽柳
、
柳树等
)。
它是一种淡黄色结晶固体，具有一定的生物活性和药用价值，被广泛应用于医药
、
食品
、
化妆品等领域
。
然而，关于柽柳黄素在外泌体分泌中的用途尚不清楚
。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种提高子宫蜕膜干细胞外泌体分泌的方法，从而有效的提高外泌体的分泌量
。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供了如下了技术方案：
[0007]第一方面，本专利技术提供了一种提高子宫蜕膜干细胞外泌体分泌水平的方法，所述方法包括如下步骤：
[0008](1)
将子宫蜕膜干细胞接种于培养皿中，待细胞生长至
70
‑
100
％融合；
[0009](2)
更换培养基为含有柽柳黄素的培养基处理
6h
；
[0010](3)
更换为新的培养基继续培养
48h
，提取外泌体
。
[0011]进一步地，所述柽柳黄素的浓度为
50
μ
g/ml。
[0012]进一步地，所述培养基为
DMEM/F12
培养基
。
[0013]第二方面，本专利技术提供了柽柳黄素在制备提高子宫蜕膜干细胞外泌体分泌水平的药物中的应用
。
[0014]优选地，所述液体药物制剂中柽柳黄素的浓度为
50
μ
g/ml。
[0015]第三方面，本专利技术提供了柽柳黄素在制备提高子宫蜕膜干细胞外泌体分泌水平的培养基中的应用
。
[0016]优选地，所述培养基中柽柳黄素的浓度为
50
μ
g/ml。
[0017]第四方面，本专利技术提供了一种提高子宫蜕膜干细胞外泌体分泌水平的培养基，其特征在于，所述培养基为
DMEM/F12
培养基，所述培养基的有效成分为柽柳黄素
。
[0018]第五方面，本专利技术提供了柽柳黄素在制备提高子宫蜕膜干细胞外泌体的皮肤修复效果的制剂中的应用，其特征在于，所述制剂通过提高子宫内膜外泌体对于皮肤成纤维细胞的增殖促进作用来提高皮肤修复效果
。
[0019]进一步地，所述制剂中柽柳黄素的浓度为
50
μ
g/ml。
[0020]本专利技术的有益效果在于：
[0021]本专利技术的研究发现柽柳黄素能够显著的增加子宫蜕膜干细胞外泌体的分泌水平
。
同时，本专利技术发现使用柽柳黄素处理后所获得的外泌体处理皮肤成纤维细胞能够更加有效的促进皮肤成纤维细胞的增殖，从而可以更加有助于皮肤损伤修复
。
通过本专利技术不仅有助于提高子宫蜕膜干细胞的外泌体产量，而且扩宽了柽柳黄素的应用范围
。
附图说明
[0022]图1为本专利技术提取的外泌体
a
和外泌体
b
的扫描电镜图；
[0023]图2为本专利技术提取的外泌体
a
和外泌体
b
的外泌体表面标志物的表达水平
。
具体实施方式
[0024]实施例1柽柳黄素对于子宫蜕膜干细胞增殖的影响
[0025]实验步骤：
[0026]将本公司所冻存的子宫蜕膜干细胞放入
37℃
水浴锅中快速解冻后，离心加入新鲜培养基重悬，添加至培养瓶中进行培养；将培养至第三代的细胞使用胰酶消化后，调整细胞悬液浓度；将细胞添加于
96
孔板中，每孔加入
5000
个细胞，置于细胞培养箱中设定培养条件为
37℃
，5％
CO2，培养
24h
使细胞完全贴壁；吸弃培养基后，对照组添加
DMEM/F12
培养基，处理组1和2分别加入浓度为
25
μ
g/mL
，
50
μ
g/ml
柽柳黄素的
DMEM/F12
培养基，处理
6h
；吸弃培养基后，加入新的
DMEM/F
培养基继续培养
48h
；培养结束后，加入
10
μ
L CCK
‑8溶液，继续孵育
4h
后，用酶标仪测定在
450nm
处的吸光度
。
[0027]实验结果：
[0028]实施例1所得到的结果如表1所示
。
[0029]表1柽柳黄素对于子宫蜕膜干细胞增殖的影响
[0030]分组吸光度
P
值对照组
0.931
±
0.039 处理组
10.924
±
0.0340.本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种提高子宫蜕膜干细胞外泌体分泌水平的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
(1)
将子宫蜕膜干细胞接种于培养皿中，待细胞生长至
70
‑
100
％融合；
(2)
更换培养基为含有柽柳黄素的培养基处理
6h
；
(3)
更换为新的培养基继续培养
48h
，提取外泌体
。2.
根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述柽柳黄素的浓度为
50
μ
g/ml。3.
根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养基为
DMEM/F12
培养基
。4.
柽柳黄素在制备提高子宫蜕膜干细胞外泌体分泌水平的药物中的应用
。5.
根据权利要求4所述的应用，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏鲁云，高禹，高井华，曲云蕾，
申请(专利权)人：承德合润生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：