一种检测斑马鱼中外源性制造技术

本发明专利技术涉及荧光探针合成及其光谱性能与应用，主要解决现有荧光探针合成步骤繁琐

【技术实现步骤摘要】
一种检测斑马鱼中外源性Ni
2+
的高灵敏度比色荧光探针及其制备方法


[0001]本专利技术涉及一种检测斑马鱼中外源性
Ni
2+
的高灵敏度比色荧光探针及其制备方法
。

技术介绍

[0002]镍，是一种硬而有延展性并具有铁磁性的金属元素并被广泛应用于日常生活中，如军工
、
航空航天
、
建筑和包装材料等
。
镍及其合金由于耐腐蚀
、
密度小
、
延展性好等优点被广泛应用在各行业中
。
然而，作为人体中重要的非必需元素之一，过量
Ni
2+
会对人体产生危害，如引起过敏反应
。
根据世界卫生组织
(WHO)
报道，过量
Ni
2+
在饮用水中的标准含量应低于
0.34
μ
M。
因此，准确并且定量定性检测水中的
Ni
2+
含量具有重要意义
。
在目前检测过量
Ni
2+
的诸多方法中，荧光分析法因高灵敏度和高选择性等特点受到研究者们的关注
。
荧光光谱分析法主要是通过研究荧光分子探针与特定金属离子相互结合时荧光发射光谱发生的变化进而实现对金属离子的检测
。
目前报道的比色和荧光探针仍存在一些问题，包括选择性和灵敏度较差
、
合成步骤复杂
、/>对生物体毒性较大等
。
总之，建立具有高选择性
、
高灵敏度
、
合成简单
、
生物体兼容性好的
Ni
2+
荧光探针是本领域技术人员亟需解决的
。

技术实现思路

[0003]本专利技术主要解决现有荧光探针合成步骤繁琐
、
提纯方法复杂等问题，同时解决现有
Ni
2+
荧光探针检测过程复杂
、
检测时易受到其他外界环境干扰
、
检测不灵敏等问题，提供一种可以实现裸眼检测
、
检测不受外界环境影响
、
具有低检出限的
Ni
2+
荧光探针及其光谱性能与应用
。
本专利技术的一种检测斑马鱼中外源性
Ni
2+
的高灵敏度比色荧光探针的结构式为：
[0004][0005]上述用于检测斑马鱼中外源性
Ni
2+
的高灵敏度比色荧光探针
(Y1)
的制备方法，按以下步骤进行：
[0006]一
、
依次向带有回流装置的反应容器中加入5‑
噻吩
‑1，3，4‑
噁二唑酮
‑3‑
甲酰肼和4‑
(
二乙氨基
)
‑
水杨醛
、
无水乙醇；升温至
75
‑
85℃
保持回流进行反应，在反应过程中采用薄层层析法跟踪反应进程，当硅胶板上出现新的产物点，且两种原料点消失时，停止反应；其中薄层层析法是以石油醚与乙酸乙酯的体积比为
1∶1
的混合液作为展开剂
。
[0007]二
、
将反应容器中的反应物浓缩至
30mL
，冷却至室温，析出淡黄色晶体，用无水乙醇进行重结晶，干燥
6h
后，得到对斑马鱼中外源性
Ni
2+
具有比色识别的荧光探针，该探针为淡黄色固体，缩写为
Y1。
[0008]本专利技术的合成过程如下所示：
[0009][0010]本专利技术的检测斑马鱼中外源性
Ni
2+
的高灵敏度比色荧光探针合成步骤少，合成过程中使用的溶剂无毒，提纯方法简单，既可实现裸眼检测水相体系中的
Ni
2+
，也可以通过荧光光谱法检测水相体系中的
Ni
2+
，并且不受水相体系中其它金属离子干扰
。
裸眼检测具有直观性，检测方法简单
、
价格低廉，可实现
Ni
2+
的定性检测；荧光光谱检测方法灵敏并且准确，可实现
Ni
2+
的定量检测
。
本专利技术的荧光探针在检测斑马鱼体内外源性
Ni
2+
具有极高的应用价值
。
附图说明
[0011]图1是实施例1制备的检测斑马鱼中外源性
Ni
2+
的高灵敏度比色荧光探针在
EtOH/HEPES
缓冲溶液
(v/v
＝
3/7
，
pH
＝
7.4)
中加入不同金属阳离子
(K
+
、Ca
2+
、Na
+
、Mg
2+
、Zn
2+
、Ba
2+
、Cu
2+
、Hg
2+
、Cd
2+
、Al
3+
、Co
2+
、Cr
3+
、Ag
+
和
Ni
2+
)(10
μ
M)
后的紫外
‑
可见吸收光谱图及裸眼识别图
(
λ
ex
＝
415nm)。
横坐标为波长，纵坐标为吸光度
。
[0012]图2是实施例1制备的检测斑马鱼中外源性
Ni
2+
的高灵敏度比色荧光探针在
EtOH/HEPES
缓冲溶液
(v/v
＝
3/7
，
pH
＝
7.4)
中加入不同金属阳离子
(K
+
、Ca
2+
、Na
+
、Mg
2+
、Zn
2+
、Ba
2+
、Cu
2+
、Hg
2+
、Cd
2+
、Al
3+
、Co
2+
、Cr
3+
、Ag
+
和
Ni
2+
)(10
μ
M)
后的荧光发射光谱图及裸眼识别图
(
λ
ex
＝
415nm
，狭缝宽度为
12/8)。
横坐标为波长，纵坐标为荧光强度
。
[0013]图3是实施例1制备的检测斑马鱼中外源性...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
本发明的一种检测斑马鱼中外源性
Ni
2+
的高灵敏度比色荧光探针的结构式为：
2.
制备权利要求1所述的一种检测斑马鱼中外源性
Ni
2+
的高灵敏度比色荧光探针，其特征在于该方法按以下步骤进行：一
、
依次向带有回流装置的反应容器中加入5‑
噻吩
‑1，3，4‑
噁二唑酮和4‑
(
二乙氨基
)
‑
水杨醛
‑3‑
甲酰肼
、
无水乙醇；升温至
75
‑
85℃
保持回流进行反应，在反应过程中采用薄层层析法跟踪反应进程，当硅胶板上出现新的产物点，且两种原料点消失时，停止反应；其中薄层层析法是以石油醚与乙酸乙酯的体积比为
1∶1
的混合液作为展开剂
。
二
、
将反应容器中的反应物浓缩至
30mL<...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄超伯，张莹莹，陈志远，
申请(专利权)人：南京林业大学，
类型：发明
国别省市：