分子标志物在诊断干燥综合征中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，具体涉及分子标志物在诊断干燥综合征中的应用。具体地，本发明专利技术提供了检测分子标志物的试剂在制备诊断干燥综合征的产品中的应用，所述分子标志物选自PTK6、SIL1、ST3GAL1或其组合。ST3GAL1或其组合。ST3GAL1或其组合。

【技术实现步骤摘要】
分子标志物在诊断干燥综合征中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体涉及分子标志物在诊断干燥综合征中的应用。

技术介绍

[0002]干燥综合征是一种长期的自身免疫性疾病，会影响身体产生水分的腺体(泪腺和唾液腺)，并且经常严重影响其他器官系统，例如肺、肾和神经系统。主要症状是干燥(口干和眼睛干涩)、疼痛和疲劳。其他症状可能包括皮肤干燥、阴道干燥、慢性咳嗽、手臂和腿部麻木、感觉疲倦、肌肉和关节疼痛以及甲状腺问题。虽然发病原因尚不清楚，但根据目前的研究干燥综合征的专利技术涉及遗传因素和环境因素的结合，例如接触病毒或细菌。它可以独立于其他健康问题(原发性干燥综合征)或由于另一种结缔组织疾病(继发性干燥综合征)而发生。
[0003]虽然干燥综合征是最常见的自身免疫性疾病之一，但它没有特异性和非侵入性的诊断测试，往往容易误诊。
[0004]对于诊断干燥综合征，需要有明显的临床症状。干燥综合征往往表现为反复口干眼干，牙齿片状脱落被称为猖獗牙齿。患者口干症状往往表现为吞咽干粮难以咽下，需要用水顺服。眼干主要表现为眼睛干涩明显，泪液减少，严重会出现反复角膜炎。部分患者会出现反复无痛性腮腺以及颌下腺肿大。少部分会出现间质性肺炎，肾小管酸中毒，血小板减少等。除了临床症状，血清学检查对于诊断干燥综合征尤其重要，比如自身抗体显示抗核抗体，抗SSA，SSB，RO52抗体阳性，血沉增快，免疫球蛋白升高。对于确诊干燥综合征，最重要的检查是小唇腺活检，病理显示灶性淋巴细胞浸润，病理活检是前段干燥综合征的金标准。此外，一些其他的辅助检查，比如腮腺核素显像，泪液分泌实验，唾液腺流速都是诊断干燥综合征非常重要的检查。
[0005]目前，干燥综合征目前尚无根治的方法，治疗主要包括对症治疗和系统治疗，对症治疗则为局部对症治疗为主。虽然尚没有完全根治的办法，但是大部分干燥综合征进展比较缓慢，预后比较良好，少部分干燥综合征会出现严重的并发症，因此早期诊断以及系统治疗对于改善预后非常重要，大部分病情会得到很好的控制。

技术实现思路

[0006]目前，干燥综合征的诊断没有特异性强、准确性高的诊断方法，为解决该技术问题，本专利技术提供以下技术方案：
[0007]一方面，本专利技术提供了检测分子标志物的试剂在制备诊断干燥综合征的产品中的应用，所述分子标志物选自PTK6、SIL1、ST3GAL1或以下任意一种分子标志物组合：
[0008](1)PTK6、SCGB1D1，
[0009](2)PTK6、HIST1H4J，
[0010](3)PTK6、ST3GAL1，
[0011](4)PTK6、SCGB1D1、SIL1、PEBP4，
[0012](5)PTK6、SCGB1D1、SIL1、ST3GAL1，
[0013](6)PTK6、SCGB1D1、ST3GAL1、PEBP4。
[0014]优选地，本专利技术所提供的分子标志物或分子标志物组合在应用时可以排除普通干眼症的干扰，准确筛选出干燥综合征的患者；因此，所述的诊断干燥综合征的产品也可以称为区分普通干眼症和干燥综合征的产品、区分干燥综合征患者和非患者的产品。
[0015]在一种实施方式中，所述检测分子标志物的试剂包括但不限于基于“扩增”进行的表达量检测方法所使用的试剂、或通过免疫检测、原位杂交检测方法检测表达量的试剂、或基因芯片、高通量测序平台。
[0016]在一种实施方式中，所述试剂中包括以下至少一种：
[0017]1)引物、
[0018]2)与标志物蛋白特异性结合的抗体、
[0019]3)与标志物的核酸序列特异性杂交的探针。
[0020]在一种实施方式中，所述试剂还可以包括聚合酶链式反应体系，所述聚合酶链式反应体系包含：PCR酶、PCR缓冲液、dNTPs、荧光染料等。
[0021]在一种实施方式中，所述试剂还可以包括使所述引物对应的扩增子可视化的反应试剂、RNA提取试剂、逆转录试剂、cDNA扩增试剂、制备标准曲线所用的标准品、阳性对照品、阴性对照品等。
[0022]在一种实施方式中，所述试剂还可以包括蛋白实验(也可以称为免疫实验，是基于特异性结合的检测方法)中可能使用的以下成分：封闭液、抗体稀释液、洗涤缓冲液、显色终止液、制备标准曲线的标准品等。
[0023]本专利技术所述术语“扩增”包括变温扩增、恒温扩增，所述变温扩增主要包括经典的聚合酶链式反应(即PCR方法，其衍生方法包括但不限于PCR、qPCR、RT
‑
PCR、qRT
‑
PCR)和连接酶链式反应(Ligase Chain Reaction，简称LCR)；所述恒温扩增包括链置换扩增(Strand displacement amplification，简称SDA)、滚环扩增(Rolling Circle amplification，简称RCA)、环介导扩增(Loop Mediated Amplification，简称LAMP)、依赖解旋酶恒温扩增(Helicase
‑
dependent Isothermal DNA Amplification，简称HDA)、依赖核酸序列的扩增(Nucleic acid sequence based amplification，简称NASBA)、转录依赖的扩增系统(Transcription
‑
based Amplification System，简称TAS)。
[0024]本专利技术所述术语“探针”可以为单标记的核酸探针，例如放射性核素(如32P、3H、35S等)标记探针、生物素标记探针、辣根过氧化物酶标记探针、地高辛标记探针或荧光基团(如FITC、FAM、TET、HEX、TAMRA、Cy3、Cy5等)标记探针；所述核酸探针也可以为双标记的核酸探针，例如Taqman探针、分子信标、置换探针、QUAL探针、FRET探针等。
[0025]本专利技术所述术语“引物”可能为用于双链或单链的形式，引物的数量可以是2条(例如PCR反应中)，引物的数量也可以是6条(例如LAMP反应中)，长度可以是10
‑
200bp不等。优选地，所述扩增使用的是PCR方法中，所述引物是两条单链DNA序列，与目标靶序列特异性结合。
[0026]优选地，所述产品包括诊断干燥综合征的试剂盒、诊断干燥综合征的诊断系统等。
[0027]优选地，所述诊断干燥综合征的诊断系统中依次包括以下装置：
[0028]1)获取分子标志物或分子标志物组合的表达量的信息收集装置，
[0029]2)根据1)所收集到的信息计算受试者是否患有干燥综合征的计算装置，
[0030]3)结果输出装置。
[0031]本专利技术中，所述术语“表达”也即基因表达(gene expression)，是指将来自基因的遗传信息合成功能性基因产物的过程。基因表达产物通常包括mRNA和蛋白质，所有已知的生命，都利用基因表达来合成生命的大分子。具体地，所述本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测分子标志物的试剂在制备诊断干燥综合征的产品中的应用，所述分子标志物选自PTK6、SIL1、ST3GAL1或以下任意一种分子标志物组合：(1)PTK6和SCGB1D1，(2)PTK6和HIST1H4J，(3)PTK6和ST3GAL1，(4)PTK6、SCGB1D1、SIL1和PEBP4，(5)PTK6、SCGB1D1、SIL1和ST3GAL1，(6)PTK6、SCGB1D1、ST3GAL1和PEBP4。2.如权利要求1所述的应用，所述检测分子标志物的试剂包括基于扩增进行的表达量检测方法所使用的试剂，通过免疫检测、原位杂交检测方法检测表达量的试剂，基因芯片或高通量测序平台。3.如权利要求1所述的应用，所述试剂中包括以下至少一种：1)特异性扩增标志物的引物、2)与标志物蛋白特异性结合的抗体、3)与标志物的核酸序列特异性杂交的探针。4.如权利要求3所述的应用，所述试剂还包括聚合酶链式反应体系，所述聚合酶链式反应体系包含：PCR酶、PCR缓冲液、dNTPs或荧光染料。5.如...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜洋，
申请(专利权)人：中国医学科学院北京协和医院，
类型：发明
国别省市：