一种利那洛肽二聚体对照品及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于杂质检测技术领域，具体涉及一种利那洛肽二聚体对照品及其制备方法和应用。本发明专利技术利用含有二聚体的利那洛肽原料药，通过水浴加热进孵育后冷冻干燥等一系列处理，得到利那洛肽二聚体对照品。本发明专利技术提供的制备方法操作方便，步骤简单，效率高，可得到含适量二聚体的利那洛肽二聚体对照品。本发明专利技术提供的利那洛肽二聚体对照品中二聚体的浓度不低于1μg/mL，本发明专利技术提供的利那洛肽二聚体对照品含有合适浓度的二聚体，可以作为利那洛肽二聚体对照品使用，对利那洛肽制剂中的二聚体杂质进行精确的限度控制。确的限度控制。确的限度控制。

【技术实现步骤摘要】
一种利那洛肽二聚体对照品及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于杂质检测
，具体涉及一种利那洛肽二聚体对照品及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]目前，大多数的多肽药物是通过固相肽合成技术获得的，在多肽药物的合成、储存及运输过程中，会产生多种类型的相关结构杂质。大部分的多肽相关结构杂质不但没有药物疗效，反而具有毒副作用，这将会影响多肽药物的生物功能和药效。在多肽药物制备过程中，即使多肽中只有一两个氨基酸的顺序发生变化，也可能将激动剂变成拮抗剂，产生相反的效果。可见，多钛药物的安全性不仅和主要活性成分的毒性有关，还涉及到杂质的毒性。建立合适的方法检测这些杂质并分析相关物质，是多肽药物质量控制的关键。
[0003]利那洛肽胶囊由美国Ironwood制药公司开发，用于治疗肠易激综合征和慢性特发性便秘，其原料为利那洛肽。利那洛肽是由14个氨基酸通过酰胺键相连形成的化合物，含有三个分子内二硫键，三者是在氧化环过程中同时形成的，可形成分子间二硫键，从而产生大量的二硫键结合型二聚体。在利那洛肽制剂中杂质的限度控制中，对利那洛肽制剂中的二聚体的检测是重要的质控项。
[0004]但是，现有的分离纯化技术手段无法将利那洛肽制剂中的二聚体杂质清除掉，所以需要对利那洛肽制剂中的二聚体杂质进行精确的限度控制，通过制备二聚体对照品对利那洛肽制剂中的二聚体杂质进行限度控制，是可以解决上述问题的，而目前国内外并没有市售的利那洛肽制剂中的二聚体对照品，因此，如何对利那洛肽二聚体对照品进行制备和研究，是利那洛肽制剂二聚体杂质质量控制的关键。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种利那洛肽二聚体对照品及其制备方法和应用，本专利技术提供的利那洛肽二聚体对照品可以实现对利那洛肽制剂中的二聚体杂质进行精确的限度控制。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0007]本专利技术提供了一种利那洛肽二聚体对照品的制备方法，包括以下步骤：
[0008](1)将利那洛肽原料药和流动相混合，得到预混物；
[0009](2)将所述预混物水浴孵育后依次进行冷冻干燥、升华干燥、解析干燥和降温干燥，得到利那洛肽二聚体对照品。
[0010]优选的，所述水浴孵育的温度为70～90℃，保温时间为20～45min。
[0011]优选的，所述冷冻干燥的温度为
‑
30～
‑
50℃，保温时间为1000～1500min。
[0012]优选的，所述升华干燥包括第一升华干燥阶段、第二升华干燥阶段和第三升华干燥阶段；所述第一升华干燥阶段的温度为
‑
10～
‑
20℃，保温时间为900～1200min；所述第二升华干燥温度为0℃，保温时间为50～80min，所述第三升华干燥温度为10～20℃，保温时间
为20～40min。
[0013]优选的，所述解析干燥的温度为10～20℃，保温时间为200～400min。
[0014]优选的，所述降温干燥的温度为5～10℃，保温时间为80～200min。
[0015]优选的，所述流动相包括磷酸盐和稀释剂；所述磷酸盐包括氯化钠、磷酸二氢钾、氯化钾和十二水合磷酸氢二钠；所述稀释剂为水。
[0016]优选的，所述利那洛肽原料药和流动相的质量体积比为2mg:8mL。
[0017]本专利技术还提供了上述方案所述制备方法得到的利那洛肽二聚体对照品，所述利那洛肽二聚体对照品中二聚体的浓度不低于1μg/mL。
[0018]本专利技术还提供了上述方案所述利那洛肽二聚体对照品在利那洛肽制剂中二聚体杂质检测中的应用。
[0019]本专利技术提供了一种利那洛肽二聚体对照品的制备方法。本专利技术利用含有二聚体的利那洛肽原料药，通过水浴加热进孵育，利那洛肽发生聚合反应得到利那洛肽二聚体，然后通过特定的干燥方法，依次冷冻干燥、升华干燥、解析干燥和降温干燥，得到利那洛肽二聚体对照品。利那洛肽含有三个分子内二硫键，三者是在聚合反应中氧化环化形成的，在聚合反应过程中利那洛肽还会形成分子间二硫键，从而产生二硫键结合型多聚体。本专利技术提供的制备方法操作方便，步骤简单，效率高，可得到含适量二聚体的利那洛肽二聚体对照品。
[0020]本专利技术还提供了上述方案所述制备方法得到的利那洛肽二聚体对照品，所述利那洛肽二聚体对照品中二聚体的浓度不低于1μg/mL。本专利技术提供的利那洛肽二聚体对照品含有合适浓度的二聚体，可以作为利那洛肽二聚体对照品使用，对利那洛肽制剂中的二聚体杂质进行精确的限度控制。
[0021]本专利技术还提供了上述方案所述利那洛肽二聚体对照品在利那洛肽制剂中二聚体杂质检测中的应用。本专利技术提供的利那洛肽二聚体对照品，可以实现对利那洛肽制剂中的二聚体杂质进行精确的限度控制，将二聚体杂质控制在极低水平，减少二聚体杂质对利那洛肽药效的影响，提高利那洛肽的治疗效果。
附图说明
[0022]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0023]图1为本专利技术实施例1制备的利那洛肽二聚体对照品的一维液相图谱；其中，利那洛肽二聚体峰保留时间为5.13分钟；
[0024]图2为本专利技术实施例1制备的利那洛肽二聚体对照品2D脱盐后的离子流图；其中，10.24分钟为利那洛肽二聚体峰；
[0025]图3为本专利技术实施例1制备的利那洛肽二聚体对照品的一级质谱图；其中，利那洛肽二硫键型二聚体的分子式为3050.7798(M)，在质谱图中可观测到m/z 1526.3953的二电荷离子峰；
[0026]图4为本专利技术实施例1制备的利那洛肽二聚体对照品的一级质谱图；其中，利那洛肽二硫键型二聚体的分子式为3050.7798(M)，在质谱图中可观测到m/z 1017.9302的三电
荷离子峰。
具体实施方式
[0027]本专利技术提供了一种利那洛肽二聚体对照品的制备方法，包括以下步骤：
[0028](1)将利那洛肽原料药和流动相混合，得到预混物；
[0029](2)将所述预混物水浴孵育后依次进行冷冻干燥、升华干燥、解析干燥和降温干燥，得到利那洛肽二聚体对照品。
[0030]本专利技术将利那洛肽原料药和流动相混合，得到预混物。在本专利技术中，所述利那洛肽原料药的二聚体检出量为1μg/mL；所述流动相优选包括磷酸盐和稀释剂；所述磷酸盐优选包括氯化钠、磷酸二氢钾、氯化钾和十二水合磷酸氢二钠；所述氯化钠和磷酸二氢钾的质量比优选为8.0:0.2；所述氯化钠和氯化钾的质量比优选为8.0:0.2；所述氯化钠和十二水合磷酸氢二钠的质量比优选为8.0:2.9；所述稀释剂优选为水；所述磷酸盐和稀释剂的质量比优选为11.3:1000；所述利那洛肽原料药和流动相的质量体积本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利那洛肽二聚体对照品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将利那洛肽原料药和流动相混合，得到预混物；(2)将所述预混物水浴孵育后依次进行冷冻干燥、升华干燥、解析干燥和降温干燥，得到利那洛肽二聚体对照品。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述水浴孵育的温度为70～90℃，保温时间为20～45min。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述冷冻干燥的温度为
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30～
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50℃，保温时间为1000～1500min。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述升华干燥包括第一升华干燥阶段、第二升华干燥阶段和第三升华干燥阶段；所述第一升华干燥阶段的温度为
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10～
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20℃，保温时间为900～1200min；所述第二升华干燥温度为0℃，保温...

【专利技术属性】
技术研发人员：营亚萍，叶文涓，刘沫毅，杨梦菲，王莉婷，寇同欣，程丽珠，常艳，李颖，王永利，陈瑞娟，陈朝侠，
申请(专利权)人：华润双鹤药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：