抗CD19抗体在制备白血病治疗药物中的用途制造技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，特别是涉及抗CD19抗体在制备白血病治疗药物中的用途，所述抗CD19抗体的重链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR

【技术实现步骤摘要】
抗CD19抗体在制备白血病治疗药物中的用途
[0001]本申请是2017年5月19日提交的、申请号为2017103572133、名称为“一种抗CD19抗体及其制备方法和用途”的中国专利技术专利申请的分案申请。


[0002]本专利技术涉及生物
，特别是涉及抗CD19抗体在制备白血病治疗药物中的用途。

技术介绍

[0003]CD19抗原(B lymphocyte antigen CD19，CD19)是特异性表达于人类B细胞表面的一种蛋白。CD19广泛表达在各个发育时期的B细胞表面并起到了重要的作用:CD19作为B细胞受体(B cell receptor，BCR)共受体(co
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receptor)，可以降低抗原介导的B细胞受体依赖性激活(antigen receptor
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dependent stimulation)所需的信号阈值；B细胞受体激活依赖于CD19胞内区磷酸化继而招募Src激酶和PI3K激酶，从而彻底激活B细胞。完全成熟的B细胞称为浆细胞(plasma cell)，在完全成熟后浆细胞会丢失CD19抗原的表达。
[0004]B细胞恶性增殖相关的血液肿瘤包括：B细胞急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia，B
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ALL)、B细胞慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphoblastic leukemia，B
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CLL)以及B细胞淋巴瘤(B lymphoma)。B细胞急性淋巴细胞白血病和B细胞淋巴瘤是恶性程度很高的癌症，其特征为外周血、骨髓伴随高程度的B细胞恶性增殖以及全身性B细胞实体瘤的形成，严重干扰患者的血液循环系统。现今，对于B细胞肿瘤的治疗主要包括小分子靶向药物比如伊马替尼(BCR
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Abl kinase inhibitor)以及依鲁替尼(bruton kinase inhibitor)、抗体药物比如利妥昔单抗(CD20 antibody)以及骨髓移植(bone marrow transplantation)；在临床应用中，小分子药物以及抗体药物可以显著延长病人的生存期，为骨髓移植争取时间，但是部分病人会出现耐药性复发，至今临床上的药物对于耐药性复发的病人很难取得疗效。
[0005]嵌合抗原受体T细胞疗法(CART)属于新型的治疗方式，以病人T细胞为基础在体外扩增并进行基因工程改造，CART细胞能够识别肿瘤细胞特异性抗原(例如CD19)，激活后可以特异性裂解肿瘤细胞达到杀伤肿瘤目的，其特点为治疗周期短、疗效较快、完全响应率高、能够为病人争取足够的时间等待骨髓移植，甚至彻底治愈。嵌合抗原受体组成为单链抗体(scFv)
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铰链区(hinge region)
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跨膜区(transmembrane domain)
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共刺激结构域(co
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stimulatory domain)
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必要刺激结构域(essential signaling domain)，其中对抗原具有高亲单链抗体为嵌合抗原受体(CAR)的最重要组成部分，scFv对于抗原的亲和力决定了CART细胞能否激活以及杀伤肿瘤细胞，因此对于抗原特异性scFv进行亲和力成熟的筛选尤其重要。
[0006]FMC63
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mIgG2a是上个世纪通过动物免疫获得抗CD19的鼠源抗体。FMC63 scFv已经成功被应用于抗CD19 CAR构造，比如Norvatis CTL019以及Juno Therapeutics JCAR015。CTL019以及JCAR015在B细胞急性淋巴细胞白血病的临床试验取得了较好的结果，完全缓解
(complete remission)病人比例>70％。

技术实现思路

[0007]鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种抗CD19抗体及其制备方法和用途，用于解决现有技术中的问题。
[0008]为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术一方面提供一种抗CD19抗体，所述抗CD19抗体包括重链可变区和轻链可变区，所述抗CD19抗体的重链可变区的CDR包括氨基酸序列为GVSLPDYGVS(SEQ ID No.1)的CDR
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H1、氨基酸序列为VIWGSETTYYNSALKS(SEQ ID No.2)所示的CDR
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H2和氨基酸序列为HWYYGGSMAMDY(SEQ ID No.3)所示的CDR
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H3；
[0009]和/或，所述抗CD19抗体的轻链可变区的CDR包括氨基酸序列为RASQDISKYLN(SEQ ID No.4)所示的CDR
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L1、氨基酸序列为HTSRLHS(SEQ ID No.5)所示的CDR
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L2和氨基酸序列为QQGNTLPYT(SEQ ID No.6)所示的CDR
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L3。
[0010]CDR(互补决定区，complementarity determining region)通常指抗体中在空间结构上可以与抗原决定簇形成互补的区域。抗体中的可变性通常并不均匀地分布在整个抗体的可变区中，单克隆抗体的重链可变区和轻链可变区通常均具有3个超变区(hypervariable region，HVR)，这些区域在空间结构上通常可以与抗原决定簇形成互补，所以超变区也被称为互补决定区(complementarity determining region，CDR)，即重链可变区通常包括三个互补决定区，即HCDR1、HCDR2和HCDR3，轻链可变区通常包括三个互补决定区，即LCDR1、LCDR2和LCDR3。
[0011]在本专利技术某些实施方式中，所述抗CD19抗体为单克隆抗体。单克隆抗体通常指一个抗体的群体，该群体中所包括的抗体是基本相同的(除少数可能存在的天然发生的突变外)。单克隆抗体通常针对抗原上特定的决定簇。
[0012]在本专利技术某些实施方式中，所述抗CD19抗体为单链抗体(single chain Fv,scFv)。单链抗体通常可以为包含抗体的V
H
(重链可变区)和V
L
(轻链可变区)的多肽链。通常来说，单链抗体还可以包括连接肽(linker)，连接肽通常位于V
H
和V
L
之间，以使scFv形成能与抗原结合的期望结构。例如，所述抗CD19抗体可以包括V
H
和V
L
，V
H
和V
L
之间可以设有连接肽，所述单链抗CD19抗体自N段至C端可以依次包括V
H
、连接肽和V
L
，所述抗CD19单链抗体自N段至C端也可以依次包括V
L
、连接肽和V
H
。所述连接肽可以是本领域中各种适用于形成scFv的连接肽，例如，所述连接肽可以是本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗CD19抗体或编码所述抗CD19抗体的全长氨基酸在制备或筛选白血病治疗药物中的用途；所述抗CD19抗体的重链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR
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H1、氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的CDR
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H2和氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的CDR
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H3；所述抗CD19抗体的轻链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.4所示的CDR
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L1、氨基酸序列如SEQ ID No.5所示的CDR
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L2和氨基酸序列如SEQ ID No.6所示的CDR
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L3。2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述抗CD19抗体的重链可变区的氨基酸序列包括如SEQ ID No.9所示的氨基酸序列，和/或，所述抗CD19抗体的轻链可变区的氨基酸序列包括如SEQ ID No.10所示的氨基酸序列。3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述抗CD19抗体为单克隆抗体，和/或，所述抗CD19抗体为单链抗体；和/或，所述抗CD19抗体衍生自CD19特异性的单克隆抗体FMC63，和/或，所述抗CD19抗体的氨基酸序列如SEQ ID No.32所示。4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述白血病选自急性淋巴型白血病、慢性淋巴型白血病或者B淋巴细胞白血病。5.分离的多肽或细胞在制备或筛选白血病治疗药物中的用途，所述分离的多肽包括跨膜域、胞内域和胞外域，所述胞外域包括权利要求1中所述的抗CD...

【专利技术属性】
技术研发人员：牟男，
申请(专利权)人：华道上海生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：