【技术实现步骤摘要】
本申请涉及生物医药，特别是涉及一种抗cldn18.2的重链抗体、相关产品和用途。
技术介绍
1、重链抗体(heavy chain antibody，hcab)发现于骆驼和鲨鱼类动物体内，是一种天然缺失轻链，只有重链组成的抗体。克隆其可变区可以得到只有重链可变区组成的单域抗体，称为vhh(variabledomain of heavy chain of heavy chain antibody)，也称为纳米抗体(nanobody)，它是最小的功能性抗原结合片段。与普通抗体不同，纳米抗体是一条含有大约110个氨基酸的肽链，其分子量约为普通抗体的1/10，纳米抗体与普通抗体及重组单链抗体(single chain fragment variable，scfv)相比，具有分子小、稳定性好、可溶性好、易于表达、生产成本低等优点，在免疫实验、诊断与治疗中，具有广阔的应用前景。
2、claudins(cldns)家族被发现在各种上皮组织中都存在着表达，在细胞间紧密连结中发挥着举足轻重的作用。cldns家族的数十个成员均为跨膜蛋白，在跨膜区内具有极高程度的一致性。cldns家族在维持上皮细胞的渗透压、保护屏障作用等起到重要作用，参与免疫防御过程；此外，cldns家族在许多肿瘤的发生发展过程中被观察到与平常相异的表达活动，并被作为肿瘤特异性标志蛋白得到各方各界的研究与讨论。cldn18.2就是cldns家族的其中一位成员，在正常组织中表达水平非常低，但是研究发现在胃、乳腺、支气管等各个人体不同器官组织的原发性恶性肿瘤的发生发展过程中异
3、cldn18.2靶向治疗中的其中一个难点就在于具有一个与其结构非常相似的蛋白—cldn18.1，该蛋白为由cldn18基因第一个外显子的等位基因所形成的另一个剪切体。cldn18.1与cldn18.2的结构序列具有高度相似性，仅有位于胞外结构域ecl1序列上的7个氨基酸残基的差别。cldn18.1仅在正常肺泡组织中高度表达，具有极高特异性。研究者与从业者开发的大多数靶向cldn18.2的抗体通常也容易脱靶识别cldn18.1，因此严重削弱了抗体药物的靶向性与安全性。因此开发特异性识别cldn18.2而非cldn18.1的抗体药物，成为开发过程中的难点所在。
4、综合上述，针对消化系统恶性肿瘤开发高效的car-t疗法，对于消化系统恶性肿瘤治疗领域具有重要意义。
技术实现思路
1、鉴于以上所述现有技术的缺点，本申请的目的在于提供一种抗cldn18.2的重链抗体、相关产品和用途，用于解决现有技术中的问题。
2、为实现上述目的，本专利技术具体采用如下技术方案。
3、本申请的第一方面提供一种抗cldn18.2的重链抗体，所述重链抗体由重链可变区组成，所述重链可变区的cdr1的氨基酸序列如seq id no.1-seq id no.6其中之一所示序列；所述重链可变区的cdr2的氨基酸序列如seq id no.7-seq id no.12其中之一所示序列；所述重链可变区的cdr3的氨基酸序列如seq id no.13-seq id no.18其中之一所示序列。
4、在某些实施方式中，所述重链可变区的氨基酸序列包括a1)或a2)：
5、a1)如seq id no.38-seq id no.43其中之一所示的氨基酸序列；
6、a2)与a1)所示的氨基酸序列具有至少80％以上同源性、且具有a1)所限定的氨基酸序列功能的氨基酸序列。
7、在某些实施方式中，所述重链可变区还包括框架区fr1-fr4：所述框架区fr1的氨基酸序列包括如seq id no.19-seq id no.23其中之一所示序列，所述框架区fr2的氨基酸序列包括如seq id no.24-seq id no.29其中之一所示序列，所述框架区fr3的氨基酸序列包括如seq id no.30-seq id no.35其中之一所示序列，所述框架区fr4的氨基酸序列包括如seq id no.36或seq id no.37所示序列。
8、本申请第二方面提供一种分离的多肽，所述多肽包括抗原结合结构域、铰链区和跨膜结构域，所述抗原结合结构域包含如上文所述的重链抗体。
9、在某些实施方式中，所述多肽为嵌合抗原受体。
10、在某些实施方式中，所述跨膜结构域包括cd8α跨膜区、cd28跨膜区或dap10跨膜区中的一种或多种。
11、在某些实施方式中，所述铰链区包括cd8α铰链区。
12、在某些实施方式中，所述多肽自n端至c端依次包括所述重链抗体、铰链区和跨膜结构域。
13、本申请第三方面提供与如上文所述的重链抗体或如上文所述的多肽相关的生物材料，所述的生物材料包括如下中的一种或多种：
14、1)编码如上文所述重链抗体的核苷酸或编码如上文所述的多肽的核苷酸；
15、2)含有1)所述核苷酸的重组表达载体；
16、3)含有1)所述核苷酸的生物工程菌，或含有2)所述重组表达载体的生物工程菌。
17、在某些实施方式中，1)中，所述核苷酸的序列包括如seq id no.44-seq id no.49其中之一所示序列。
18、在某些实施方式中，所述重组表达载体选自慢病毒载体、逆转录病毒载体或腺病毒载体。
19、优选地，所述重组表达载体为慢病毒载体。
20、本申请的第四方面提供一种细胞，所述细胞表达如上文所述的多肽。
21、在某些实施方式中，所述细胞选自t淋巴细胞、b淋巴细胞、nk细胞、肥大细胞和巨噬细胞中的一种或多种。
22、本申请的第五方面提供如上文所述的重链抗体或如上文所述的多肽或如上文所述的生物材料或如上文所述的细胞在制备体外检测产品、制备预防或治疗肿瘤药物中的用途。
23、在某些实施方式中，所述肿瘤为与表达clnd 18.2相关的肿瘤，优选地，选自膀胱癌、肝癌、结肠癌、直肠癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌、胆道癌、白血病、淋巴瘤、胰腺癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、乳腺癌、尿道癌、头颈癌、胃肠道癌、胃癌、食道癌、卵巢癌、肾癌、黑素瘤、前列腺癌和甲状腺癌中的一种或多种。
24、本申请的第六面提供一种检测产品，包括如上文所述的抗体或如上文所述的多肽或如上文所述的生物材料或如上文所述的细胞。
25、在某些实施方式中，所述产品用于检测clnd 18.2。
26、本申请的第七方面提供一种药物组合物，包括如上文所述的抗体或如上文所述的多肽或如上文所述的生物材料或如上文所述的细胞，以及药学上可接受的载体。
27、在某些实施方式中，所述药物组合物用于预防或治疗与表达clnd 18.2相关的肿瘤疾病。<本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗CLDN18.2的重链抗体，其特征在于，所述重链抗体由重链可变区组成，所述重链可变区的CDR1的氨基酸序列包括SEQ ID No.3所示序列，所述重链可变区的CDR2的氨基酸序列包括SEQ ID No.9所示序列，所述重链可变区的CDR3的氨基酸序列包括SEQID No.15所示序列。
2.如权利要求1所述的重链抗体，其特征在于，所述重链可变区还包括框架区FR1-FR4，所述框架区的FR1的氨基酸序列包括SEQ ID No.21所示序列，所述框架区的FR2的氨基酸序列包括SEQ ID No.26所示序列，所述框架区的FR3的氨基酸序列包括SEQ ID No.32所示序列，所述框架区的FR4的氨基酸序列包括SEQ ID No.37所示序列。
3.如权利要求1所述的重链抗体，其特征在于，所述重链可变区的氨基酸序列包括SEQIDNo.40所示的氨基酸序列。
4.一种分离的多肽，其特征在于，所述多肽为嵌合抗原受体，所述多肽自N端至C端依次由CD8α信号肽、抗原结合结构域、CD8α铰链区、CD8α跨膜结构域和免疫受体酪氨酸活化基序，所述抗原结合
5.与如权利要求1-3任一项所述的重链抗体或如权利要求4所述的多肽相关的生物材料，其特征在于，所述生物材料包括如下中的一种或多种：
6.如权利要求5所述的生物材料，其特征在于，1)中，所述核苷酸的序列包括如SEQ IDNo.46所示序列；
7.如权利要求6所述的生物材料，其特征在于，所述重组表达载体为慢病毒载体。
8.一种细胞，其特征在于，所述细胞表达如权利要求4所述的多肽。
9.如权利要求8所述的细胞，其特征在于，所述细胞选自T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞和巨噬细胞中的一种或多种。
10.如权利要求1-3任一项所述的重链抗体或如权利要求4所述的多肽或如权利要求5-7所述的生物材料或如权利要求8或9所述的细胞在制备体外检测产品、制备预防或治疗肿瘤药物中的用途，所述体外检测产品为用于检测CLND 18.2的试剂盒、芯片或膜条，所述肿瘤为胃癌。
11.一种用于体外检测CLND 18.2的检测产品，其特征在于，包括如权利要求1-3任一项所述的重链抗体或如权利要求4所述的多肽或如权利要求5-7所述的生物材料或如权利要求8或9所述的细胞。
12.一种用于预防或治疗与表达CLND 18.2相关的肿瘤疾病的药物组合物，其特征在于，
...【技术特征摘要】
1.一种抗cldn18.2的重链抗体，其特征在于，所述重链抗体由重链可变区组成，所述重链可变区的cdr1的氨基酸序列包括seq id no.3所示序列，所述重链可变区的cdr2的氨基酸序列包括seq id no.9所示序列，所述重链可变区的cdr3的氨基酸序列包括seqid no.15所示序列。
2.如权利要求1所述的重链抗体，其特征在于，所述重链可变区还包括框架区fr1-fr4，所述框架区的fr1的氨基酸序列包括seq id no.21所示序列，所述框架区的fr2的氨基酸序列包括seq id no.26所示序列，所述框架区的fr3的氨基酸序列包括seq id no.32所示序列，所述框架区的fr4的氨基酸序列包括seq id no.37所示序列。
3.如权利要求1所述的重链抗体，其特征在于，所述重链可变区的氨基酸序列包括seqidno.40所示的氨基酸序列。
4.一种分离的多肽，其特征在于，所述多肽为嵌合抗原受体，所述多肽自n端至c端依次由cd8α信号肽、抗原结合结构域、cd8α铰链区、cd8α跨膜结构域和免疫受体酪氨酸活化基序，所述抗原结合结构域包括如权利要求1-3任一项所述的重链抗体。
5.与如权利要求1-3任一项所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：余学军，狄升蒙，张世伟，李照润，范艳秋，马恒，陈鑫，冯冬歌，
申请(专利权)人：华道上海生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。