ClC-3制造技术

本发明专利技术公开了

【技术实现步骤摘要】
ClC
‑
3蛋白能够作为检测线粒体功能标志物和干预胰岛素抵抗的靶点的用途及验证方法


[0001]本专利技术是关于生物分子用途的
，特别是关于一种
ClC
‑3蛋白能够作为检测线粒体功能标志物以及干预肥胖和胰岛素抵抗的靶点的用途及验证方法
。

技术介绍

[0002]中国的肥胖问题日益严重
。2021
年柳叶刀的研究指出，中国已经成为肥胖人口数最多的国家之一，根据
2015
‑
2019
年的最新数据显示，
16.4
％的中国成人存在肥胖问题，
34.3
％的中国成人存在超重问题，这意味着，中国成人中超一半人群已处于肥胖或者超重状态，并将面临肥胖带来的慢性病风险
。
胰岛素抵抗
(Insulin resistance
，
IR)
被认为是肥胖等代谢综合征发生发展的“土壤”。
既往研究表明，肥胖与
IR
之间存在着密不可分的关系，相辅相成
。
肥胖会导致机体
IR
，而体重减轻，则会改善
IR。IR
，指的是一种病理生理状态，指各种原因使胰岛素促进葡萄糖摄取和利用的效率下降，机体代偿性的分泌过多胰岛素产生高胰岛素血症，以维持血糖的稳定
。
[0003]然而，
IR
发病的分子机制尚未清楚，脂肪组织中的
IR
被认为是机体发生
>IR
的中心和起源
。
脂肪代谢异常导致或加重胰岛素抵抗的发生
。
脂肪酸
β
‑
氧化是动物体内最主要的脂分解反应之一，也是
FFA
最终彻底分解为乙酰辅酶
A(Acetyl coenzyme A
，乙酰
CoA)
的主要分解途径和脂源
ATP
产生的最主要来源
。
脂肪酸
β
‑
氧化减少，导致血中的
ATG
和
FFAs
清除减少
、
血液中堆积，可产生脂毒性
(Lipotoxity)
，引起脂肪因子和脂肪炎症增加，影响胰岛素其他靶器官引发或促进
IR。
约
90
％的脂肪酸
β
‑
氧化发生在线粒体
。
线粒体是糖类
、
脂肪和氨基酸等物质最终氧化释能的场所，它最基本的功能是通过氧化磷酸化
(Oxidative Phosphorylation
，
OXPHOS)
产生
ATP
为生命活动提供能量
。
[0004]线粒体功能异常导致肥胖和
IR
的发生发展的研究也是目前代谢内分泌和生殖领域的热点和关键点
。
目前对于线粒体功能的检测内容繁多，包括线粒体的定位
、
形态和数量
、
线粒体生物合成相关基因的
RNA
和蛋白表达水平
PGC1
α
(
过氧化物酶体增殖物激活受体
‑
γ
共激活因子
‑1α
)、NRF
‑
1(
核呼吸因子
1)、NRF
‑
2(
核呼吸因子
2)、TFAM(
线粒体转录因子
A)
以及
mtDNA(
线粒体
DNA)
的拷贝数
、ATP
酶活性
、ATP
含量
、ROS
含量
、
线粒体活性
、
线粒体的糖酵解以及线粒体氧化磷酸化
(OXPHOS)
功能改变
。
这对于线粒体功能异常的检测造成了一定困难，临床上难以实施
。
[0005]公开于该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术
。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供
ClC
‑3蛋白能够作为检测线粒体功能标志物和干预肥胖及胰岛素抵抗的靶点的用途及验证方法，其能够解决肥胖及胰岛素抵抗的发生机制，提供治疗肥胖及胰岛素抵抗的针对性靶点
。
[0007]为实现上述目的，本专利技术提供了
ClC
‑3蛋白能够作为检测线粒体功能标志物和干预肥胖和胰岛素抵抗的靶点的用途
。
[0008]本专利技术还提供
ClC
‑3蛋白能够作为检测线粒体功能标志物和干预肥胖相关胰岛素抵抗的靶点的验证方法，包括以下步骤：
[0009](1)
收集肥胖患者和正常体重患者的大网膜脂肪组织，检测其中
CIC
‑
3mRNA
和蛋白水平，明确
CIC
‑
3mRNA
和蛋白表达量与体重指数
、
腰围与荷马指数呈正相关关系，并与脂肪细胞平均直径呈线性关系；
[0010](2)
构建
ClC
‑3脂肪特异性敲除的小鼠
ClC
‑3AKO
，并通过高脂饮食诱导的方法构建肥胖小鼠模型，明确
ClC
‑3脂肪特异性敲除对脂肪体积
、
脂肪代谢和葡萄糖稳态的影响；包括
[0011]利用
ClC
‑3AKO
小鼠构建肥胖小鼠模型，将小鼠分成多组，包括正常饮食喂养的野生型小鼠
NCD
‑
WT、
高脂饮食诱导的野生型小鼠
HFD
‑
WT、
正常饮食喂养的
ClC
‑3AKO
小鼠
NCD
‑
ClC
‑3AKO
、
高脂饮食诱导的
ClC
‑3AKO
小鼠
HFD
‑
ClC
‑3AKO
，比较各组小鼠的食物摄入量和体重增长曲线，得出小鼠
HFD
‑
ClC
‑3AKO
比小鼠
HFD
‑
WT
体重小；利用
Micro CT
成像定量测量小鼠体内不同部位和类型脂肪组织体积，得出小鼠
HFD
‑
ClC
‑3AKO
比小鼠
HFD
‑
WT
的附睾白色脂肪组织减少；利用
HE
染色附睾白色脂肪组织，得出小鼠
HFD
‑
ClC本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.ClC
‑3蛋白能够作为检测线粒体功能标志物和干预肥胖和胰岛素抵抗的靶点的用途
。2.ClC
‑3蛋白能够作为检测线粒体功能标志物和干预肥胖和胰岛素抵抗的靶点的验证方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)
收集肥胖患者和正常体重患者的大网膜脂肪组织，检测其中
CIC
‑
3mRNA
和蛋白水平，明确
CIC
‑
3mRNA
和蛋白表达量与体重指数
、
腰围与荷马指数呈正相关关系，并与脂肪细胞平均直径呈线性关系；
(2)
构建
ClC
‑3脂肪特异性敲除的小鼠
ClC
‑3AKO
，并通过高脂饮食诱导的方法构建肥胖小鼠模型，明确
ClC
‑3脂肪细胞条件性敲除对脂肪体积
、
脂肪代谢和葡萄糖稳态的影响；包括利用
ClC
‑3AKO
小鼠构建肥胖小鼠模型，将小鼠分成多组，包括正常饮食喂养的野生型小鼠
NCD
‑
WT、
高脂饮食诱导的野生型小鼠
HFD
‑
WT、
正常饮食喂养的
ClC
‑3AKO
小鼠
NCD
‑
ClC
‑3AKO
、
高脂饮食诱导的
ClC
‑3AKO
小鼠
HFD
‑
ClC
‑3AKO
，比较各组小鼠的食物摄入量和体重增长曲线，得出小鼠
HFD
‑
ClC
‑3AKO
比小鼠
HFD
‑
WT
体重小；利用
Micro CT
成像定量测量小鼠体内不同部位和类型脂肪组织体积，得出小鼠
HFD
‑
ClC
‑3AKO
比小鼠
...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵晓苗，李水洁，江素仕，
申请(专利权)人：广东省人民医院，
类型：发明
国别省市：