一种用于诊断细菌性脑膜炎的生物标志物、试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种用于诊断细菌性脑膜炎的生物标志物，所述生物标志物包括以下蛋白质中的至少一种：热休克蛋白90

【技术实现步骤摘要】
一种用于诊断细菌性脑膜炎的生物标志物、试剂盒及其应用


[0001]本专利技术涉及生物标志物，具体涉及一种用于诊断细菌性脑膜炎的生物标志物、试剂盒及其应用。

技术介绍

[0002]细菌性脑膜炎(bacterial meningitis,BM)是指由于病原菌感染蛛网膜下腔从而导致宿主大脑皮层发生炎症的一种感染性疾病，在世界范围内均具有较高发病率和病死率。BM每年在全球范围内造成数十万人死亡，并且30％～50％的存活者表现出不同程度的神经系统后遗症。在发达国家，BM每年人群发病率约为5/100 000(成年人)；而在次发达国家，这一比例约为发达国家的10倍。BM也是兽医临床上常见的疾病之一，严重危害家畜、家禽及野生动物的健康安全和畜牧业的健康发展。
[0003]血液、尿液、脑脊液等体液是临床中常用的检测标本，其中的蛋白质变化作为标志物可以指征多种疾病的发生和进展。从常规体检的谷丙转氨酶，到癌症诊断的AFP、CA125等蛋白指标，都为临床诊断提供了不可或缺的重要信息。近年来，随着质谱技术的进步，通过组学方法来筛选新的血液标志物，已经成为了一个越来越重要的研究和转化应用的方向。例如，整合有FAIMS离子过滤技术和机器学习标志物筛选的“4D
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Blood+”蛋白质组方法，特别适合于大规模队列样本的分析，为生物标志物的筛选提供新的强大工具。
[0004]现有技术中针对脑膜炎提供了一些蛋白质标志物，例如，中国专利技术专利CN111220799A提供了猪HSP90AB1蛋白在鉴定猪链球菌脑膜炎中的用途，以猪血清为待测样本，用于鉴定猪的脑膜炎诊断。然而，现有技术还未针对人的细菌性脑膜炎提供用于辅助诊断的生物标志物。

技术实现思路

[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术基于4D blood+蛋白质组学原理，使用4Dblood+质谱技术，筛选获得了与细菌性脑膜炎发病相关的蛋白质，并利用ELISA法定量测定其在样本中的浓度，证实筛选获得的蛋白质可以作为生物标志物用于诊断细菌性脑膜炎。
[0006]一方面，本申请提供了一种用于诊断细菌性脑膜炎的生物标志物，所述生物标志物包括以下蛋白质中的至少一种：人热休克蛋白90
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alpha(HSP90AA1)，人丝切蛋白1(CFL1)和人真核翻译延伸因子2(EEF2)。
[0007]另一方面，本申请提供了所述生物标志物作为检测靶标在制备用于诊断细菌性脑膜炎的试剂中的应用。
[0008]具体的，本申请提供了人热休克蛋白90
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alpha(HSP90AA1)、人丝切蛋白1(CFL1)和/或人真核翻译延伸因子2(EEF2)作为生物标志物在制备用于诊断细菌性脑膜炎的试剂中的应用。
[0009]在一种实施方式中，所述诊断为细菌性脑膜炎的早期诊断；和/或，用于鉴别脑膜炎为革兰阳性菌脑膜炎GPBM或革兰阴性菌脑膜炎GNBM。
[0010]在一种实施方式中，所述试剂为用于定量检测所述生物标志物在待测样本中的含量的产品。
[0011]在一种实施方式中，所述待测样本选自血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、组织匀浆、细胞培养上清液中的一种或多种。
[0012]另一方面，本申请提供了一种用于诊断细菌性脑膜炎的试剂盒，所述试剂盒包括与所述生物标志物特异性结合的抗体。
[0013]另一方面，本申请提供了所述试剂盒在用于诊断细菌性脑膜炎中的应用。
[0014]具体的，本申请提供了用于检测人热休克蛋白90
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alpha(HSP90AA1)、人丝切蛋白1(CFL1)和/或人真核翻译延伸因子2(EEF2)的ELISA试剂盒在诊断细菌性脑膜炎中的应用。
[0015]在一种实施方式中，所述诊断为细菌性脑膜炎的早期诊断；和/或，用于鉴别脑膜炎为革兰阳性菌脑膜炎GPBM或革兰阴性菌脑膜炎GNBM。
[0016]在一种实施方式中，所述试剂盒用于定量检测所述生物标志物在待测样本中的含量，所述待测样本选自血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、组织匀浆、细胞培养上清液中的一种或多种。
[0017]在一种实施方式中，所述试剂盒可采用常规的实验方法进行ELISA检测，例如双抗体夹心法。
[0018]在一种实施方式中，所述试剂盒可以包括现有试剂盒中的试剂，例如：预包被板、酶标记抗体、标准品、EIA缓冲液、标记抗体稀释液、显色剂、终止液、浓缩洗涤液等。
[0019]可选的，人热休克蛋白90
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alpha(HSP90AA1)、人丝切蛋白1(CFL1)和/或人真核翻译延伸因子2(EEF2)的ELISA试剂盒可以采用市售的商品化试剂盒。
[0020]本申请的有益效果包括但不限于：
[0021]本专利技术利用4D blood+质谱技术，筛选获得了与细菌性脑膜炎发病相关的三个蛋白：人热休克蛋白90
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alpha(HSP90AA1)，人丝切蛋白1(CFL1)和人真核翻译延伸因子2(EEF2)，并利用ELISA法定量测定其在样本中的浓度，证实筛选获得的蛋白质可以作为生物标志物用于诊断细菌性脑膜炎，进一步的，还可以用于鉴别GPBM和GNBM。并且，本申请还由此开发了便于临床应用的辅助诊断试剂盒，所得试剂盒敏感性高、特异性强、重复性好，为细菌性脑膜炎的筛查和诊断治疗提供支持。
附图说明
[0022]此处所说明的附图用来提供对本申请的进一步理解，构成本申请的一部分，本申请的示意性实施例及其说明用于解释本申请，并不构成对本申请的不当限定。在附图中：
[0023]图1是实施例1中差异蛋白筛选的火山图，
[0024]图2是实施例1中差异蛋白筛选的聚类分析图；
[0025]图3是实施例1中细菌性脑膜炎相关DEPs的GO图；
[0026]图4是实施例1中细菌性脑膜炎相关DEPs的KEGG通路分析图；
[0027]图5是实施例1中蛋白PPI网络分析图；
[0028]图6是实施例2中CFL1试剂制备的稀释方法图；
[0029]图7是实施例3中HSP90AA1试剂制备的稀释方法图；
[0030]图8是实施例2中CFL1的细菌性脑膜炎诊断ELISA结果图；
[0031]图9是实施例2中CFL1的细菌性脑膜炎鉴别诊断ELISA结果图；
[0032]图10是实施例3中HSP90AA1的细菌性脑膜炎诊断ELISA结果图；
[0033]图11是实施例3中HSP90AA1的细菌性脑膜炎鉴别诊断ELISA结果图；
[0034]图12是实施例4中EEF2的细菌性脑膜炎诊断ELISA结果图；
[0035]图13是实施例4中EEF2的细菌性脑膜炎鉴别诊断ELISA结果图。
具体实施方式
[0036]以下结合具体实施例对本专利技术进行详细描述。以下对优选实施方案的描述在本质上仅是示例性的，并且决不意图限制本专利技术、本专利技术的应用或用途。予以特殊说明的是：以下实施例中未注明具体条件者本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于诊断细菌性脑膜炎的生物标志物，其特征在于，所述生物标志物包括以下蛋白质中的至少一种：人热休克蛋白90
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alpha(HSP90AA1)，人丝切蛋白1(CFL1)和人真核翻译延伸因子2(EEF2)。2.如权利要求1所述的生物标志物作为检测靶标在制备用于诊断细菌性脑膜炎的试剂中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述诊断为细菌性脑膜炎的早期诊断；和/或，用于鉴别脑膜炎为革兰阳性菌脑膜炎或革兰阴性菌脑膜炎。4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述试剂为用于定量检测所述生物标志物在待测样本中的含量的产品。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述待测样本选自血清...

【专利技术属性】
技术研发人员：张国军，郑光辉，史一君，王思琪，孙嘉潞，吕虹，
申请(专利权)人：首都医科大学附属北京天坛医院，
类型：发明
国别省市：