本发明专利技术公开了一种抗环瓜氨酸肽抗体的抗原及其应用，包括：一种CCP肽段、包含其的抗原，试剂盒。所述抗原包括至少一个抗原表位肽，所述抗原表位肽为环瓜氨酸，每一个所述环瓜氨酸肽通过半胱氨酸桥接成环，并形成转角。将该抗原结合载体，可应用于免疫比浊法等抗体检测方法中，操作简单，敏感性、特异性和稳定性较高。特异性和稳定性较高。
【技术实现步骤摘要】
一种抗环瓜氨酸肽抗体的抗原及其应用
[0001]本专利技术涉及免疫诊断
，特别涉及一种CCP肽段、包含其抗原、试剂盒及其应用。
技术介绍
[0002]类风湿关节炎(rheumatoid arthtitis，RA)是一种慢性自身免疫性疾病，导致多个关节发炎和畸形。诊断RA的重要指标是抗瓜氨酸化多肽抗体(anti
‑
citrullinated protein antibody，ACPA)，它们能识别环瓜氨酸肽(cyclic citrullinated peptide，CCP)这种特异性抗原。检测ACPA的方法有多种，如酶联免疫吸附试验(enzyme
‑
linked immunosorbent assay，ELISA)、胶体金免疫层析法(gold immunochromatographic assay，GICA)、免疫比浊法(immunoturbidimetry，IT)等。
[0003]然而，这些方法都存在一定的局限性，主要是由于抗原表位的敏感性和特异性不足。抗原表位是抗原分子上与ACPA结合的部位，它们决定了检测方法的灵敏度和特异度。如果抗原表位的数量少或结构简单，那么ACPA就难以与之结合，导致检测结果假阴性或低阳性；如果抗原表位的结构与其他类似的抗原有交叉反应，那么ACPA就容易与之混淆，导致检测结果假阳性或高阳性。目前主要的CCP使用线性瓜氨酸肽或瓜氨酸化丝聚合蛋白作为抗原底物，但敏感性较低。
技术实现思路
[0004]本专利技术要解决的技术问题在于CCP的特异性和敏感性不足，针对现有技术的不足，提供一种CCP肽段，包含其抗原及抗环瓜氨酸肽抗体的检测试剂盒。
[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术所采用的技术方案如下：
[0006]一种CCP肽段，所述肽段包括至少一个抗原表位肽，所述抗原表位肽为环瓜氨酸，每一个所述环瓜氨酸肽通过半胱氨酸桥接成环，并形成转角。
[0007]进一步地，所述CCP肽段，其中，所述抗原表位肽的序列为ARGGSRCRARGRGRG
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Cit
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GCKR，其中，第7位半胱氨酸残基与第18位半胱氨酸残基通过二硫键形成环状结构。
[0008]进一步地，所述CCP肽段，其中，所述抗原表位肽的序列为GGSKCLYNLR
‑
Cit
‑
GCLAIPQ，其中，第5半胱氨酸残基与第13半胱氨酸残基通过二硫键形成环状结构。
[0009]一种CCP抗原，包含如上所述的任意一个或多个的CCP肽段。
[0010]进一步地，所述的CCP抗原包括含瓜氨酸、甘氨酸、半胱氨酸基序的CCP肽段的组合。
[0011]一种如上所述的CCP抗原在抗体检测中的应用，将环瓜氨酸肽抗原与载体连接，用于抗环瓜氨酸抗体的检测。
[0012]所述抗环瓜氨酸肽抗体的抗原在抗体检测中的应用，所述载体包括载体蛋白、生物素、异硫氰荧光素。
[0013]一种抗环瓜氨酸肽抗体的检测试剂盒，其中，所述试剂盒包括：样本稀释液、缓冲
液、抗原偶联试剂。
[0014]进一步地，所述的样本稀释液包含包括盐高盐溶液和去垢剂。优选地，所述的高盐溶液为氯化钠盐、碳酸钠盐、硫酸铜盐中的一种或多种；所述的去垢剂为十二烷基硫酸钠、胆酸盐、辛基葡萄糖苷中的一种或多种。
[0015]进一步地，所述的缓冲液包含磷酸盐、Tris、PEG
‑
6000、ProClin300、消泡剂，优选地消泡剂包含但不限于有机硅类消泡剂、表面活性剂类消泡剂、矿物油消泡剂中的一种或多种。
[0016]进一步地，所述的抗原偶联试剂包含上述的CCP肽段一个或多个的抗原与载体蛋白、生物素、异硫氰荧光素三者中任何一个偶联的方式存在；优选地所述的载体蛋白可以是牛血清白蛋白、阳离子牛血清白蛋白、血蓝蛋白、卵清蛋白、人血清白蛋白、牛γ球蛋白及人γ球蛋白中任意一种。
[0017]本专利技术提供了一种CCP肽段及包含CCP肽段的抗原及其应用，抗原包括至少一个抗原表位肽，而抗原表位肽的环瓜氨酸通过半胱氨酸成环，形成转角，从而将环瓜氨酸暴露出来，提高检测的特异性和敏感性。同时，该抗原可应用于免疫比浊法等多种检测方法中，从而提高检测方法的精确度。
具体实施方式
[0018]本专利技术提供一种抗环瓜氨酸肽抗体的抗原及其应用，为使本专利技术的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下举实施例对本专利技术进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0019]本
技术人员可以理解，除非特意声明，这里使用的单数形式“一”、“一个”、“所述”和“该”也可包括复数形式。应该进一步理解的是，本专利技术的说明书中使用的措辞“包括”是指存在所述特征、整数、步骤、操作、元件和/或组件，但是并不排除存在或添加一个或多个其他特征、整数、步骤、操作、元件、组件和/或它们的组。应该理解，当我们称元件被“连接”或“耦接”到另一元件时，它可以直接连接或耦接到其他元件，或者也可以存在中间元件。此外，这里使用的“连接”或“耦接”可以包括无线连接或无线耦接。这里使用的措辞“和/或”包括一个或更多个相关联的列出项的全部或任一单元和全部组合。
[0020]本
技术人员可以理解，除非另外定义，这里使用的所有术语(包括技术术语和科学术语)，具有与本专利技术所属领域中的普通技术人员的一般理解相同的意义。还应该理解的是，诸如通用字典中定义的那些术语，应该被理解为具有与现有技术的上下文中的意义一致的意义，并且除非像这里一样被特定定义，否则不会用理想化或过于正式的含义来解释。
[0021]当实施例给出数值范围时，应理解，除非本专利技术另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本专利技术中使用的所有技术和科学术语与本
技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、材料外，根据本
的技术人员对现有技术的掌握及本专利技术的记载，还可以使用与本专利技术实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实现本专利技术。除非另外说明，本专利技术中所公开的实验方法、检测方法、制备方法均采用本
常规的分子生物学、生物化学及相关领域的常规技术。
[0022]实施例1
[0023]1、CCP肽段的合成
[0024]通过类风湿性关节炎患者血清筛选出针对类风湿性关节炎的特异性识别的优势抗原表位，并在这些抗原表位的基础上增加转角结构和病毒瓜氨酸肽抗原位点，形成特异性的CCP肽段结构。本实施里列出两条应用于后续检测的序列：
[0025](1)SEQ NO.1:ARGGSRCRARGRGRG
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Cit
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GCKR
[0026]其中，第7位半胱氨酸残基与第18位半胱氨酸残基通过二硫键形成环状结构。
[0027](2)SEQ NO.2:GGSKCLYNLR
‑本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种CCP肽段，其特征在于，所述肽段包括至少一个抗原表位肽，所述抗原表位肽为环瓜氨酸，每一个所述环瓜氨酸肽通过半胱氨酸桥接成环，并形成转角。2.根据权利要求1所述的CCP肽段，其特征在于，所述肽段的序列为ARGGSRCRARGRGRG
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Cit
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GCKR，其中，第7位半胱氨酸残基与第18位半胱氨酸残基通过二硫键形成环状结构。3.根据权利要求1所述的CCP肽段，其特征在于，所述肽段的序列为GGSKCLYNLR
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Cit
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GCLAIPQ，其中，第5半胱氨酸残基与第13半胱氨酸残基通过二硫键形成环状结构。4.一种CCP抗原，其特征在于所述的CCP抗原包含权利要求1
‑
3中一个或任意个...
【专利技术属性】
技术研发人员：龚虹安，朱漩，曲文蕊，汪建德，
申请(专利权)人：深圳市锦瑞生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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