一种lncRNA及其下游级联物质在芳香化酶抑制剂耐药ER阳性乳腺癌中的用途制造技术

一种lncRNA及其下游级联物质在芳香化酶抑制剂(AI)耐药ER阳性乳腺癌中的用途。该长链非编码RNA是雌激素非依赖性乳腺癌细胞生长、增殖的关键调控因素，基于该长链非编码RNA展开的研究路线，本发明专利技术人发现其能作为ER阳性乳腺癌AI耐药、ER阳性乳腺癌AI治疗预后的诊断标志物，有望利用该长链非编码RNA实现相应的诊断，从而尽早为对应患者调整治疗策略，以提高相应治疗效果。敲低DIO3OS、PTBP1能有效抑制雌激素非依赖性AI耐药乳腺癌细胞的生长、增殖，起到一定的杀伤治疗作用。有望应用于临床中以提高AI耐药ER阳性乳腺癌治疗效果，延长患者生存期，减少或避免患者的复发，提高生存率。提高生存率。提高生存率。

【技术实现步骤摘要】
一种lncRNA及其下游级联物质在芳香化酶抑制剂耐药ER阳性乳腺癌中的用途


[0001]本专利技术涉及肿瘤分子生物学领域，更具体地，涉及一种lncRNA及其下游级联物质在芳香化酶抑制剂耐药ER阳性乳腺癌中的用途。

技术介绍

[0002]乳腺癌中约有75％的类型表达雌激素受体(Estrogen receptor，ER)，称之为ER阳性乳腺癌，其发生、发展主要依赖雌激素的刺激。因此，剥夺雌激素信号成为ER阳性乳腺癌激素疗法的主要内容。第三代芳香化酶抑制剂(Aromatase inhibitor，AI)是当今临床上绝经后 ER阳性乳腺癌患者的标准一线用药，其疗效相对于他莫昔芬更具优势。该优势尤其体现于绝经后女性，其发生卵巢萎缩，由于外周组织中的芳香化酶催化肾上腺分泌的雄激素前体，是雌激素的最主要来源，在治疗初期，AI通过特异性引起芳香化酶失活以抑制内源性雌激素产生，从而影响乳腺癌细胞的失控增殖。然而在临床上AI治疗的有效率仅为25％～45％，多数患者在治疗后期出现明显的耐药现象，引起疾病进展、复发。因此，AI继发性耐药的发生极大地限制了其治疗的有效性。尽管目前已经有不少针对AI耐药的研究，但AI耐药的分子机制还尚不明确，仍然无法给出相应有效的治疗靶点、技术方案。现有技术亟需对乳腺癌AI 耐药的发生机制进行深入研究，以获取有望诊断AI耐药、逆转AI耐药、增强AI治疗疗效的产品或治疗方案等，提高ER阳性乳腺癌的治疗敏感性，改善患者预后。

技术实现思路

[0003]本专利技术旨在克服上述现有技术的至少一种不足，提供一种长链非编码RNA(lncRNA)及其下游级联物质在诊断、治疗AI耐药ER阳性乳腺癌中的用途，该长链非编码RNA能作为一种标志物，以诊断ER阳性乳腺癌对AI的耐药性及对应患者的预后，同时，该长链非编码 RNA促进下游的PTBP1与LDHA 3
’
UTR结合反应使相应ER阳性乳腺癌细胞进行不依赖雌激素的增殖，基于该内容，提供相应的长链非编码RNA及其下游结合反应的抑制剂能实现相应的杀伤、治疗效果，提高该类AI耐药乳腺癌的AI治疗疗效。
[0004]本专利技术的一个目的在于提供上述长链非编码RNA在制备诊断ER阳性乳腺癌AI耐药、预后评估ER阳性乳腺癌AI治疗、治疗AI耐药ER阳性乳腺癌的产品中的用途，所述长链非编码RNA为DIO3OS。在本专利技术的一个实施例中，长链非编码RNA DIO3OS在长期雌激素剥夺(LTED)ER阳性乳腺癌细胞、AI耐药ER阳性乳腺癌组织中特异性上调，且其与患者不良预后显著相关，通过该长链非编码RNA能够实现相应的诊断用途。更进一步地，通过敲低长链非编码RNA DIO3OS，还能起到抑制包括LTED细胞不依赖雌激素生长和增殖的作用，实现相应的治疗效果。同样的，对于实际的AI耐药ER阳性乳腺癌细胞，其同样不依赖于雌激素，该长链非编码RNA的敲除也有利于实现对应的治疗。
[0005]本专利技术的再一个目的在于提供一种ER阳性乳腺癌AI耐药诊断标志物，包括lncRNADIO3OS。
[0006]本专利技术的再一个目的在于提供一种长链非编码RNA的检测试剂在制备诊断ER阳性乳腺癌AI耐药的产品中的用途，所述长链非编码RNA为DIO3OS。
[0007]进一步地，所述诊断ER阳性乳腺癌AI耐药的产品包括实时荧光定量PCR检测试剂。
[0008]在本专利技术的一个实施例中，通过针对DIO3OS的检测试剂，包括荧光定量PCR检测试剂，能够对DIO3OS的表达量进行检测，结合前述的该长链非编码RNA标志物作用，该检测试剂能用于制备诊断ER阳性乳腺癌AI耐药的产品。
[0009]进一步地，所述诊断ER阳性乳腺癌AI耐药的产品含有基于长链非编码RNA DIO3OS核苷酸序列设计的用于检测所述长链非编码RNADIO3OS的特异性引物。在本专利技术的一个以上实施例中，通过采用长非编码RNA对应特异性引物的实时荧光定量PCR能够成功进行 DIO3OS的检测。
[0010]进一步地，所述特异性引物包括如下所述引物：DIO3OS_Forward：5
’‑
AAGCCCAGCCCAATAGGAA
‑3’
(序列如SEQIDNO.1所示)； DIO3OS_Reverse：5
’‑
GGCCCAAGAAACAGCAACA
‑3’
(序列如SEQIDNO.2所示)。
[0011]本专利技术的再一个目的在于提供DIO3OS抑制剂在制备抑制AI耐药ER阳性乳腺癌有氧糖酵解、治疗AI耐药ER阳性乳腺癌、增强ER阳性乳腺癌对AI治疗敏感性和/或降低LDHARNA稳定性的产品中的用途。在本专利技术的一个实施例中，通过沉默DIO3OS的表达，能够抑制相应的LTED细胞有氧糖酵解，抑制不依赖于雌激素的LTED乳腺癌细胞的生长和增殖，同样的，其有利于增强ER阳性乳腺癌对AI治疗的敏感性。
[0012]进一步地，DIO3OS抑制剂包括基于DIO3OS：Entrez GeneID:64150所含序列设计的抑制剂。进一步地，DIO3OS：Entrez GeneID:64150对应为Ensembl ID：ENST00000554735.1。
[0013]进一步地，DIO3OS抑制剂包括沉默DIO3OS表达的LNA、siRNA和/或shRNA。
[0014]进一步地，DIO3OS抑制剂包括基于DIO3OS：Entrez GeneID:64150所含序列设计的沉默DIO3OS表达的LNA、siRNA、shRNA；
[0015]进一步地，DIO3OS抑制剂包括沉默DIO3OS表达的LNA、siRNA、shRNA。在本专利技术的一个实施例中，通过LNA诱导RNase
‑
H介导的降解，以有效沉默DIO3OS的表达。通过 shRNA也能有效沉默DIO3OS的表达。
[0016]进一步地，LNA包括：LNA
‑
1：5
’‑
AGAAAGAGTGTGGATC
‑3’
(序列如SEQIDNO.3所示)；和/或，LNA
‑
2： 5
’‑
GACAAACGGCCAGTGG
‑3’
(序列如SEQIDNO.4所示)；和/或，LNA
‑
3： 5
’‑
GGTTAGTCACTGTAGA
‑3’
(序列如SEQIDNO.5所示)；和/或，LNA
‑
4： 5
’‑
CCATTCACCAGCACTC
‑3’
(序列如SEQIDNO.6所示)；和/或，LNA
‑
5： 5
’‑
CCGAGGTGTGGAGTGT
‑3’
(序列如SEQIDNO.7所示)；和/或，shRNA包括：shRNA
‑
1，序列为5
’‑
CAGTGACTAACCCAAACCA
‑3’...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种lncRNA在制备诊断ER阳性乳腺癌AI耐药、预后评估ER阳性乳腺癌AI治疗、治疗AI耐药ER阳性乳腺癌的产品中的用途，所述lncRNA为DIO3OS。2.一种ER阳性乳腺癌AI耐药诊断标志物，其特征在于，包括lncRNA DIO3OS。3.一种lncRNA的检测试剂在制备诊断ER阳性乳腺癌AI耐药的产品中的用途，所述lncRNA为DIO3OS。4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，所述诊断ER阳性乳腺癌AI耐药的产品包括实时荧光定量PCR检测试剂。5.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，所述诊断ER阳性乳腺癌AI耐药诊断的产品含有基于lncRNA DIO3OS核苷酸序列设计的用于检测所述lncRNA DIO3OS的特异性引物；优选地，所述特异性引物包括如下所述引物：DIO3OS_Forward：5
’‑
AAGCCCAGCCCAATAGGAA
‑3’
；DIO3OS_Reverse：5
’‑
GGCCCAAGAAACAGCAACA
‑3’
。6.DIO3OS抑制剂在制备抑制AI耐药ER阳性乳腺癌有氧糖酵解、治疗AI耐药ER阳性乳腺癌、增强AI耐药ER阳性乳腺癌对AI治疗敏感性和/或降低LDHA RNA稳定性的产品中的用途。7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，DIO3OS抑制剂包括基于DIO3OS：EntrezGeneID:64150所含序列设计的抑制剂。8.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，DIO3OS抑制剂包括沉默DIO3OS表达的LNA、siRNA和/或shRNA；优选地，DIO3OS抑制剂包括基于DIO3OS：Entrez GeneID:64150所含序列设计的沉默DIO3OS表达的LNA、siRNA、shRNA；优选地，LNA包括：LNA
‑
1：5
’‑
AGAAAGAGTGTGGATC
‑3’
；和/或，LNA
‑
2：5
’‑
GACAAACGGCCAGTGG
‑3’
；和/或，LNA
‑
3：5
’‑
GGTTAGTCACTGTAGA
‑3’
；和/或，LNA
‑
4：5
’‑
CCATTCACCAGCACTC
‑3’
；和/或，LNA
‑
5：5
’‑
CCGAGGTGTGGAGTGT
‑3’
；和/或，shRNA包括：shRNA
‑
1，序列为5
’‑
CAGTGACTAACCCAAACCA
‑3’
；和/或，shRNA
‑
2，序列为5
’‑<...

【专利技术属性】
技术研发人员：权利要求书二页说明书一九页序列表八页附图一二页，
申请(专利权)人：中山大学孙逸仙纪念医院，
类型：发明
国别省市：