一种生物组织样品的复温解冻方法技术

本发明专利技术公开了一种生物组织样品的复温解冻方法，具体包括有以下步骤：首先将生物组织样品放置于冻存管中，然后将冻存管置于恒温浴中，然后将冻存管连同恒温浴一起置于磁场辅助解冻装置内，设置磁场辅助解冻装置内的磁场强度为大于0Gs且不大于40Gs，通过空间磁场辅助解冻，解冻过程中，实时采集冻存管内生物组织样品的实时温度，直至实时温度达到设定的复温温度，即停止空间磁场辅助解冻和恒温浴解冻操作。本发明专利技术在水浴复温的基础上，采用电磁场辅助复温，降低复温过程对生物组织样品的组织损伤，提升冻存效果。提升冻存效果。提升冻存效果。

【技术实现步骤摘要】
一种生物组织样品的复温解冻方法


[0001]本专利技术涉及复温解冻
，具体是一种生物组织样品的复温解冻方法。

技术介绍

[0002]低温技术是当今保存各类生物样本如细胞、组织等最常用的保存手段，并在生物和医学等各个领域都发挥着不可替代的作用，如辅助生殖技术、疫苗存储和干细胞治疗等。典型的低温保存主要包括五个步骤：添加保护剂、降温、长期保存、复温、去除保护剂。但冷冻过程不可避免的冰晶形成和复温时的再结晶现象一直是阻碍该技术更好发展的致命缺点，对意在保存的生物样品产生极大损伤。
[0003]同时，伴随着低温冷冻技术的深入探索和不断应用，发现解冻阶段对生物样本的危害更不容忽视。往往通过前期的降温实现了样品的长期保存，但在解冻的复温过程却极大的损伤了保存的样品质量，最后功亏一篑。比如低温保存具有一定尺寸的生物样品如肾脏、心脏和肝脏等人体器官，其在解冻过程中，会发生吸热反应，打破冰晶中的氢键。如果热交换效率不高，由于内层的吸热反应，可能会引发刚解冻融化的外层出现反复的再结晶，影响样本复温后的质量。
[0004]由于冰晶的形态会对生物样本的细胞结构产生不可逆转的破坏作用，所以尽可能的避免上述过程的副作用一直是该领域的研究重点。因此，实现更快速、均匀的复温，是实现生物样本成功保存的关键步骤。当前，冻存管是低温保存过程中大量使用的冻存容器。传统的复温方式是将封装生物样本的冻存管置于37℃恒温水浴中进行复温。
[0005]但是，传统的复温方式存在一定的短板：因为冻存管本身的尺寸，加上单纯依靠水浴从外部向内的传热方式，热传递效率低下，复温速率较慢，会导致严重的反玻璃化和再结晶，从而严重损害生物样本保存的质量。同时生物样本的各个位置在复温过程时温度差异较大，样本的内外温度梯度大，易产生较大的热应力损伤。

技术实现思路

[0006]本专利技术要解决的技术问题是提供一种生物组织样品的复温解冻方法，在水浴复温的基础上，采用电磁场辅助复温，降低复温过程对生物组织样品的组织损伤，提升冻存效果。
[0007]本专利技术的技术方案为：
[0008]一种生物组织样品的复温解冻方法，具体包括有以下步骤：首先将生物组织样品放置于冻存管中，然后将冻存管置于恒温浴中，然后将冻存管连同恒温浴一起置于磁场辅助解冻装置内，设置磁场辅助解冻装置内的磁场强度为大于0Gs且不大于40Gs，通过空间磁场辅助解冻，解冻过程中，实时采集冻存管内生物组织样品的实时温度，直至实时温度达到设定的复温温度，即停止空间磁场辅助解冻和恒温浴解冻操作。
[0009]所述的恒温浴设置的温度为36
‑
38℃。
[0010]所述的磁场辅助解冻装置包括有安装框架、固定于安装框架上的第一线圈和第二
线圈、以及电流稳压电源，第一线圈和第二线圈的半径相等，且两者相互平行，第一线圈和第二线圈均与电流稳压电源连接。
[0011]所述的第一线圈和第二线圈均水平设置，第一线圈和第二线圈内的中心位处设置有载物平台，载物平台顶端的水平高度高于第一线圈顶端的水平高度，置于恒温浴中的冻存管放置于载物平台上。
[0012]所述的安装框架为有多个竖直设置的支撑立柱、第一线圈定位架和第二线圈定位架，第一线圈定位架固定于多个支撑立柱的底端，第二线圈定位架固定于多个支撑立柱的顶端，第一线圈定位架和第二线圈定位架上设置有上下重叠的安装孔，第一线圈固定于第一线圈定位架的安装孔中，第二线圈固定于第二线圈定位架的安装孔中。
[0013]所述的第一线圈和第二线圈均为带有铁芯或者铜芯的线圈。
[0014]所述的磁场辅助解冻装置还包括有控制器和特斯拉计，冻存管中设置有热电偶，电流稳压电源、热电偶、特斯拉计均与控制器连接，通过特斯拉计采集磁场辅助解冻装置的实时磁场强度，通过热电偶采集冻存管内生物组织样品的实时温度，电流稳压电源通过特斯拉计采集的实时磁场强度进行调节，使得磁场辅助解冻装置内的实时磁场强度达到设定的磁场强度，当采集冻存管内生物组织样品的实时温度达到设定的复温温度，电流稳压电源停止供电。
[0015]本专利技术的优点：
[0016]本专利技术采用恒温水浴，可实现快速均匀复温，并采用磁场辅助解冻装置进行电磁场辅助复温，对生物组织样品具有体积升温效应，可有效缩短解冻时间、加快解冻速率，影响冰晶的生长，降低复温过程对生物组织样品的组织损伤，提升冻存效果；并将磁场辅助解冻装置的磁场强度设置为大于0Gs且不大于40Gs，避免磁场强度过大，最大限度地减少解冻过程中再结晶对微观结构的破坏，从而减小复温过程中反玻璃化和再结晶的损害，并可有效减弱复温过程引发的热应力等因素引起的机械损伤，最大程度的保持生物组织样品的质量。
附图说明
[0017]图1是本专利技术磁场辅助解冻装置的主视图。
[0018]图2是本专利技术磁场辅助解冻装置的俯视图。
[0019]图3是本专利技术磁场辅助解冻装置的磁场生成原理图。
[0020]图4是本专利技术实施例1中新鲜小鼠卵巢组织和不同磁感应强度复温下小鼠卵巢组织的复温效果图。
[0021]图5是本专利技术实施例1中不同磁感应强度复温下卵巢组织的抗氧化酶活性(T
‑
SOD)含量图。
[0022]图6是本专利技术实施例1中不同磁感应强度复温下卵巢组织的丙二醛(MDA)含量图。
[0023]图7是本专利技术实施例2中新鲜牛体肌肉组织和不同磁感应强度复温下牛体肌肉组织的扫描电子显微镜图。
[0024]图8是本专利技术实施例2中新鲜牛体肌肉组织和不同磁感应强度复温下牛体肌肉组织的透射电子显微镜图。
[0025]附图标记：11
‑
支撑立柱，12
‑
第一线圈定位架，13
‑
第二线圈定位架，14
‑
第一线圈，
15
‑
第二线圈，16
‑
载物平台。
具体实施方式
[0026]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0027]一种生物组织样品的复温解冻方法，具体包括有以下步骤：首先将生物组织样品放置于冻存管中，然后将冻存管置于37℃的恒温浴中，然后将冻存管连同恒温浴一起置于磁场辅助解冻装置内，通过空间磁场辅助解冻，解冻过程中，实时采集冻存管内生物组织样品的实时温度，直至实时温度达到设定的复温温度，即停止空间磁场辅助解冻和恒温浴解冻操作。
[0028]见图1和图2，磁场辅助解冻装置包括有安装框架、固定于安装框架上的第一线圈14和第二线圈15、以及载物平台16、电流稳压电源、控制器和特斯拉计，安装框架为有四个竖直设置的支撑立柱11、第一线圈定位架12和第二线圈定位架13，第一线圈定位架12固定于四个支撑立柱11的底端，第二本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种生物组织样品的复温解冻方法，其特征在于：具体包括有以下步骤：首先将生物组织样品放置于冻存管中，然后将冻存管置于恒温浴中，然后将冻存管连同恒温浴一起置于磁场辅助解冻装置内，设置磁场辅助解冻装置内的磁场强度为大于0Gs且不大于40Gs，通过空间磁场辅助解冻，解冻过程中，实时采集冻存管内生物组织样品的实时温度，直至实时温度达到设定的复温温度，即停止空间磁场辅助解冻和恒温浴解冻操作。2.根据权利要求1所述的一种生物组织样品的复温解冻方法，其特征在于：所述的恒温浴设置的温度为36
‑
38℃。3.根据权利要求1所述的一种生物组织样品的复温解冻方法，其特征在于：所述的磁场辅助解冻装置包括有安装框架、固定于安装框架上的第一线圈和第二线圈、以及电流稳压电源，第一线圈和第二线圈的半径相等，且两者相互平行，第一线圈和第二线圈均与电流稳压电源连接。4.根据权利要求3所述的一种生物组织样品的复温解冻方法，其特征在于：所述的第一线圈和第二线圈均水平设置，第一线圈和第二线圈内的中心位处设置有载物平台，载物平台顶端的水平高度高于第一线圈顶端的水平高度，置于恒温浴中...

【专利技术属性】
技术研发人员：江俊波，高陈，兰月，张莉媛，
申请(专利权)人：广州市第一人民医院广州消化疾病中心，广州医科大学附属市一人民医院，华南理工大学附属第二医院，
类型：发明
国别省市：