一种利用表面电荷调节囊泡分布及治疗效果的方法技术

本发明专利技术属于生物医药领域，涉及一种利用表面电荷调节囊泡分布及治疗效果的方法。本发明专利技术提供了带负电荷的治疗药物在制备预防或治疗脓毒血症的药物中的用途。所述带负电荷的治疗药物包括诱导性囊泡。本发明专利技术研究发现，诱导性囊泡带负电荷，其能够与NETs通过正负电荷相吸相互作用，从而使诱导性囊泡在脓毒血症患者的骨髓和脾脏富集，发挥治疗脓毒血症作用。机制方面，诱导性囊泡富集到骨髓后诱导性囊泡上的Fasl可以通过与中性粒细胞Fas蛋白结合，从而诱导中性粒细胞的凋亡，降低NETs的形成，发挥治疗脓毒血症的作用。治疗脓毒血症的作用。治疗脓毒血症的作用。

【技术实现步骤摘要】
一种利用表面电荷调节囊泡分布及治疗效果的方法


[0001]本专利技术属于生物医药领域，涉及一种利用表面电荷调节囊泡分布及治疗效果的方法。

技术介绍

[0002]脓毒血症是一种危及生命的器官功能障碍，每年影响全世界数百万人。
[1]在脓毒血症中，炎症和免疫反应的过度激活，例如炎性单核细胞和中性粒细胞的浸润，会导致器官功能障碍、感染性休克和死亡。脓毒血症中性粒细胞对先天免疫系统和脓毒血症的炎症发病机制至关重要。
[2]中性粒细胞经历一种独特形式的细胞死亡(NETosis)，产生中性粒细胞胞外陷阱(NETs)。
[3]NETs可以作为趋化因子吸引癌细胞
[3]，并促进细胞迁移和粘附。此外，NETs的形成是宿主防御脓毒血症脓毒血症核心，而NETs的异常积累可能导致血管内凝血和器官衰竭。
[4]因此，NET产生的调节对于脓毒血症治疗至关重要。
[0003]最近的一项研究表明，中性粒细胞死亡从NETosis转变为凋亡是调节NETs形成和含量的有效方法。
[5]外在凋亡途径依赖于细胞表面受体如死亡受体Fas(CD95)的激活。
[6,7]Fas是肿瘤坏死因子(TNF)受体超家族的成员，可触发中性粒细胞的凋亡信号级联反应受特定配体Fas配体(FasL)刺激后。
[8]然而，Fas/FasL通路与NETosis之间的关系仍不清楚。

技术实现思路

[0004]一些实施方案中，本专利技术提供了一种带负电荷的治疗药物在制备治疗脓毒血症的药物中的用途。r/>[0005]一些实施方案中，所述带负电荷的治疗药物包括诱导性囊泡。
[0006]一些实施方案中，所述药物用于减少肺、脾脏、骨髓或肝脏中的中性粒细胞浸润。
[0007]一些实施方案中，所述诱导性囊泡具有标志物FasL。
[0008]一些实施方案中，所述诱导性囊泡促进中性粒细胞的凋亡，抑制NETosis。
[0009]一些实施方案中，所述诱导性囊泡通过降低NETs的形成治疗脓毒血症。
[0010]一些实施方案中，所述诱导性囊泡通过其具有的标志物FasL与中性粒细胞上的Fas蛋白结合诱导中性粒细胞凋亡。
[0011]本专利技术研究发现，骨髓间充质干细胞来源的诱导性囊泡(apoVs)可以提高脓毒血症小鼠的生存率。与正常小鼠(Sham)相比，apoVs在脓毒血症小鼠(CLP)中骨髓和脾脏富集增加，而在肝脏富集减少。
[0012]专利技术人的另一研究发现表明，CLP引起的脓毒症脓毒血症中的apoVs在特定器官的富集分布与apoVs的表面电荷有关，脓毒血症导致小鼠骨髓和脾脏中，中性粒细胞胞外陷阱(NETs)增多，NETs通过静电荷相互作用在脓毒症脓毒血症小鼠中吸引apoVs。apoVs与NETs通过正负电荷相吸相互作用，从而使apoVs在脓毒血症小鼠的骨髓和脾脏富集，发挥治疗脓毒血症作用。
[0013]一些实施方案中，专利技术人研究发现，apoVs富集到骨髓后，apoVs上的Fasl可以通过
与中性粒细胞Fas蛋白结合，可以介导中性粒细胞从NETosis到凋亡的细胞死亡模式转换，从而诱导中性粒细胞的凋亡，降低NETs的形成，从而治疗脓毒血症或进而抑制中性粒细胞从骨髓向远端器官的迁移，减轻器官损伤，提高脓毒症小鼠的存活率。
[0014]诱导性囊泡治疗脓毒血症是一个很复杂的机理过程。基于本专利技术的研究发现，本专利技术可以通过调节囊泡或宿主器官电荷，调节供体囊泡分布进而改善治疗脓毒血症的效果，对临床上治疗脓毒血症具有很好的应用价值和指导意义。一些实施方案中，所述的药物选自注射剂、口服制剂或外用制剂。
[0015]一些实施方案中，所述药物为注射剂。
[0016]一些实施方案中，所述药物选自静脉注射剂、肌肉注射剂、皮下注射剂或鞘内注射剂。
[0017]一些实施方案中，所述药物还包括药学上可接受的药用载体。
[0018]一些实施方案中，所述药用载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、崩解剂、表面活性剂和润滑剂中的一种或几种。
[0019]一些实施方案中，诱导性囊泡或骨髓或者脾脏的电荷调节剂在制备治疗脓毒血症药物中的用途。
[0020]一些实施方案中，骨髓或者脾脏的电荷调节剂在制备诱导性囊泡治疗脓毒血症药物中的用途。
[0021]一些实施方案中，本专利技术提供了诱导性囊泡在制备用于治疗脓毒血症患者肝脏或肾脏或肺部损伤的药物中的用途。
[0022]一些实施方案中，本专利技术提供了一种组合物，包含诱导性囊泡和带负电荷的材料。
[0023]一些实施方案中，所述带负电荷的材料包括化合物。
[0024]一些实施方案中，所述化合物包括带负电的类固醇脂质。
[0025]一些实施方案中，所述化合物选自硫酸胆固醇。所述的硫酸胆固醇又称为胆固醇硫酸酯Cholesterol sulfate(CS)，可结合细胞膜上的正电荷脂质，从而导致细胞膜电位负值增大。
[0026]一些实施方案中，所述组合物包含硫酸胆固醇修饰的诱导性囊泡。
[0027]一些实施方案中，所述组合物还包括治疗或预防脓毒血症的药物。
[0028]一些实施方案中，所述组合物还包括诱导中性粒细胞凋亡的药物。
[0029]一些实施方案中，本专利技术提供了所述的组合物在制备药物载体系统中的用途。
[0030]一些实施方案中，所述载药系统包括为抗脓毒血症药物的载药系统。
[0031]一些实施方案中，本专利技术提供了所述的组合物在制备治疗脓毒血症的药物中的用途。
[0032]一些实施方案中，所述诱导性囊泡是在干细胞处于正常存活时通过外加因素诱导凋亡而产生的囊泡。
[0033]一些实施方案中，所述诱导方法包括添加星形孢菌素、紫外线照射、饥饿法、或热应力法。
[0034]一些实施方案中，所述干细胞为间充质干细胞。
[0035]一些实施方案中，所述间充质干细胞来源包括骨髓、尿液、口腔、脂肪、胎盘、脐带、骨膜、肌腱，但又不限于此。
[0036]一些实施方案中，所述诱导性囊泡具有的标志物包括CD9、CD63、TSG101、Alix、Integrin alpha
‑
5、Calreticulin、cleaved caspase
‑
3、S1PR1和Annexin V中的一种或多种。
[0037]一些实施方案中，所述囊泡对标志物CD9、CD63、TSG101、Alix、Integrin alpha
‑
5、Calreticulin或cleaved caspase
‑
3的表达量高于间充质干细胞。
[0038]一些实施方案中，所述间充质干细胞为骨髓间充质干细胞。
[0039]一些实施方案中，所述诱导性囊泡具有标志物FasL。
[0040]一些实施方案中，所述诱导性囊泡具有标志物Syntaxin 4。在一些实施例中，所述诱导性囊泡高表达标志物本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.带负电荷的治疗药物在制备预防或治疗脓毒血症的药物中的用途。2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述带负电荷的治疗药物包括诱导性囊泡；优选地，所述药物用于减少肺、脾脏或肝脏中的中性粒细胞浸润；优选地，所述诱导性囊泡具有标志物FasL；优选地，所述诱导性囊泡促进中性粒细胞的凋亡；优选地，所述诱导性囊泡通过降低NETs的形成治疗脓毒血症；优选地，所述诱导性囊泡通过其标志物FasL与中性粒细胞上的Fas蛋白结合诱导中性粒细胞凋亡。3.如权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述的药物选自注射剂、口服制剂或外用制剂；优选地，所述药物为注射剂；优选地，所述药物选自静脉注射剂、肌肉注射剂、皮下注射剂或鞘内注射剂；优选地，所述药物还包括药学上可接受的药用载体；优选地，所述药用载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、崩解剂、表面活性剂和润滑剂中的一种或几种。4.诱导性囊泡或骨髓或者脾脏的电荷调节剂在制备治疗脓毒血症药物中的用途。5.诱导性囊泡在制备用于治疗脓毒血症患者肝脏或肾脏或肺部损伤的药物中的用途。6.一种组合物，其特征在于，包含诱导性囊泡和带负电荷的材料；优选地，所述带负电荷的材料包括化合物；优选地，所述化合物包括带负电的类固醇脂质；优选地，所述化合物选自硫酸胆固醇。优选地，所述组合物包含硫酸胆固醇修饰的诱导性囊泡。优选地，所述组合物还包括治疗或预防脓毒血症的药物；优选地，所述组合物还包括诱导中性粒细胞凋亡的药物。7.权利要求6所述的组合物在制备药物载体系统中的用途；优选地，所述载药...

【专利技术属性】
技术研发人员：欧乾民，寇晓星，施松涛，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：