淀粉酶变体制造技术

本发明专利技术提供新的淀粉酶。更具体而言，提供遗传改造的淀粉酶、包含该酶的组合物以及制备和使用该酶或包含该酶的组合物的方法。和使用该酶或包含该酶的组合物的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】淀粉酶变体


[0001]本专利技术提供新的淀粉酶。更具体而言，提供遗传改造的淀粉酶、包含该酶的组合物以及制备和使用该酶或包含该酶的组合物的方法。

技术介绍

[0002]酶作为石油化工的可持续替代品越来越多地用于多种应用。酶可生物降解，并且在较低的温度下已经可以具有催化活性，这导致能量消耗减少。尤其是，在洗涤剂产业中，在洗涤制剂中酶被用于改善清洁效率以及降低洗涤步骤中的能量消耗。
[0003]淀粉酶是能够水解淀粉的酶。因此，淀粉酶已用于去除淀粉污渍，并已为此目的添加到清洁组合物中。在这些洗涤剂应用中，淀粉酶应在高温和/或洗涤剂和洗涤液的变性条件下保持稳定。因此，需要具有改善的特性、尤其是具有改善的稳定性和改善的性能的新淀粉酶。
[0004]专利技术概述
[0005]本专利技术涉及亲本α
‑
淀粉酶的α
‑
淀粉酶变体，其中该变体包含：
[0006](i)根据SEQ ID NO:3所示氨基酸序列的编号，在对应于选自以下的位置的一个或多个位置处的氨基酸改变，优选插入、缺失、取代或其组合，优选取代：1、2、3、4、5、6、7、8、10、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、45、47、48、51、54、59、60、63、70、71、72、73、75、76、81、82、83、86、87、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、103、106、108、109、113、114、115、116、117、119、120、123、125、126、128、129、131、132、133、134、135、136、139、141、142、143、144、145、146、147、149、150、151、154、155、156、158、160、161、162、163、164、165、169、170、172、173、174、175、176、177、178、180、182、184、185、187、188、189、191、192、193、203、208、210、211、212、213、214、215、216、218、219、221、222、223、224、225、226、227、230、231、233、234、235、236、237、238、240、242、243、245、249、250、251、252、253、255、256、257、258、259、260、261、262、263、264、265、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、279、280、281、282、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、301、302、303、304、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、317、318、319、320、321、322、323、324、326、327、333、334、336、337、338、341、342、343、344、345、346、348、350、351、352、353、354、355、356、357、358、359、360、362、363、364、365、366、367、368、370、372、375、376、378、379、381、382、383、384、385、387、388、389、390、391、392、393、394、395、396、397、398、399、400、401、403、405、406、407、408、410、413、414、415、416、418、421、424、426、427、429、431、432、434、436、438、439、440、442、443、445、446、447、448、449、451、453、455、456、457、458、459、460、461、462、463、465、467、468、470、471、474、478、480和482；
[0007](ii)该变体与SEQ ID NO:1、3、4或SEQ ID NO 15
‑
41中任一个、优选SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少80％但小于100％的序列同一性，以及
[0008](iii)该变体具有α
‑
淀粉酶活性。
[0009]此外，本专利技术涉及编码该α
‑
淀粉酶变体的多核苷酸和包含该多核苷酸的核酸构建体或表达载体，以及包含该多核苷酸、该核酸构建体或该表达载体的宿主细胞。
[0010]此外，本专利技术涉及包含该α
‑
淀粉酶变体和至少一种其他成分的组合物，优选洗涤剂组合物(例如衣物洗涤剂组合物或自动餐具洗涤(ADW)洗涤剂组合物)，以及该α
‑
淀粉酶变体在这种组合物中的用途。
[0011]本专利技术还涉及产生α
‑
淀粉酶变体的方法，其包括在适合表达该α
‑
淀粉酶突变体的条件下培养宿主细胞；并回收该α
‑
淀粉酶变体。
[0012]专利技术详述
[0013]通过参考以下对本专利技术的实施方案的详细描述和本文所包括的实施例，可以更容易地理解本专利技术。
[0014]尽管将参照具体实施方案来描述本专利技术，但不应以限制意义解释这些描述。
[0015]定义
[0016]除非另有说明，否则本文中所用的术语将根据相关领域的普通技术人员的常规用法理解。
[0017]在详细描述本专利技术的示例性实施方案之前，给出了对理解本专利技术很重要的定义。除非另有说明或从定义的性质显而易见，否则这些定义适用于本文所述的所有化合物、方法和用途。
[0018]除非上下文另有明确规定，否则本说明书和所附权利要求书中所用的单数形式“一”和“一个”也包括相应的复数。
[0019]在本专利技术的上下文中，术语“约”和“大约”表示，本领域技术人员将理解仍然可以确保所讨论的特征的技术效果的准确区间。该术语通常表示与所示数值的偏差为
±
20％，优选
±
15％，更优选为
±
10％，甚至更优选
±
5％。
[0020]此外，说明书和权利要求书中的术语“第一”、“第二”、“三”或“(a)”、“(b)”、“(c)”、“(d)”等用于区分相似的元素，而并非一定用于描述顺序或时序。应当理解，如此使用的这些术语在适当的情况下是可互换的，并且本文所描述的本专利技术的实施方案能够以本文所描述或示例之外的其他顺序操作。在术语“第一”、“第二”、“第三”或“(a)”、“(b)”、“(c)”、“(d)”、“i”、“ii”等涉及方法或用途或测定的步骤的情况下，这些步骤之间没有时间间隔或时间间隔一致性，即这些步骤可以同时进行，或者这些步骤之间可以存在秒、分钟、小时、天本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.亲本α
‑
淀粉酶的α
‑
淀粉酶变体，其中该变体包含：(i)根据SEQ ID NO:3所示氨基酸序列的编号，在对应于选自以下的位置的一个或多个位置上的氨基酸改变：25、1、2、3、4、5、6、7、8、10、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、45、47、48、51、54、59、60、63、70、71、72、73、75、76、81、82、83、86、87、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、103、106、108、109、113、114、115、116、117、119、120、123、125、126、128、129、131、132、133、134、135、136、139、141、142、143、144、145、146、147、149、150、151、154、155、156、158、160、161、162、163、164、165、169、170、172、173、174、175、176、177、178、180、182、184、185、187、188、189、191、192、193、203、208、210、211、212、213、214、215、216、218、219、221、222、223、224、225、226、227、230、231、233、234、235、236、237、238、240、242、243、245、249、250、251、252、253、255、256、257、258、259、260、261、262、263、264、265、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、279、280、281、282、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、301、302、303、304、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、317、318、319、320、321、322、323、324、326、327、333、334、336、337、338、341、342、343、344、345、346、348、350、351、352、353、354、355、356、357、358、359、360、362、363、364、365、366、367、368、370、372、375、376、378、379、381、382、383、384、385、387、388、389、390、391、392、393、394、395、396、397、398、399、400、401、403、405、406、407、408、410、413、414、415、416、418、421、424、426、427、429、431、432、434、436、438、439、440、442、443、445、446、447、448、449、451、453、455、456、457、458、459、460、461、462、463、465、467、468、470、471、474、478、480和482，(ii)该变体与SEQ ID NO:1、3、4、或SEQ ID NO:15
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41中的任一个、优选SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3、更优选SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60％但小于100％的序列同一性、优选至少91％或至少95％但小于100％的序列同一性，以及(iii)该变体具有α
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淀粉酶活性，优选其中该α
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淀粉酶变体的亲本α
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淀粉酶是SEQ ID NO:1的淀粉酶。2.权利要求1的α
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淀粉酶变体，其中该变体包含一个或多个氨基酸取代，其中，根据SEQ ID NO:3所示氨基酸序列的编号，所述一个或多个氨基酸取代选自由以下组成的氨基酸取代组：X25H、X25A、X25C、X25D、X25F、X25G、X25K、X25L、X25M、X25Q、X25S、X25W、X25Y、X100D、X100F、X100K、X100L、X103A、X106D、X108A、X109A、X10A、X10C、X10E、X10F、X10L、X10W、X10Y、X113F、X113H、X113M、X113R、X113V、X113W、X113Y、X114A、X114C、X114D、X114E、X114F、X114G、X114H、X114I、X114K、X114L、X114M、X114N、X114Q、X114R、X114S、X114V、X114W、X114Y、X115C、X115D、X115K、X115M、X115N、X115Q、X115R、X115S、X115T、X115V、X116I、X116K、X116L、X116M、X116R、X116T、X117A、X117C、X117D、X117F、X117I、X117N、X117P、X117R、X117W、X117Y、X118A、X118D、X118E、X119H、X119P、X119R、X119S、X119Y、X120E、X120G、X120M、X120S、X120W、X120Y、X123D、X123S、X125A、X125D、X125E、X125F、X125G、X125H、X125K、X125L、X125M、X125N、X125Q、X125R、X125T、X125V、X125W、X125Y、X126D、X128C、X128E、X128L、X128M、X128W、X128Y、X129E、X12N、X12S、X131C、X131I、X131L、X131Q、X131W、X132T、X133A、X133C、X133D、X133E、X133H、X133K、X133N、X133P、X133Q、X133S、X134C、X134E、X134F、X134I、X134L、X134M、X134P、X134T、X134V、X134W、X134Y、X135D、
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X385E、X385F、X385G、X385H、X385I、X385L、X385M、X385N、X385P、X385Q、X385R、X385S、X385T、X385V、X385W、X385Y、X387C、X387E、X387N、X388E、X388F、X388H、X388I、X388M、X388R、X388V、X389G、X389H、X389K、X38N、X390D、X390F、X390M、X390N、X390P、X390R、X391A、X391F、X391G、X391K、X391M、X391N、X391Q、X391S、X391T、X391Y、X392C、X392V、X393E、X393H、X393P、X393S、X393V、X394A、X394C、X394E、X394H、X394I、X394L、X394M、X394N、X394R、X394S、X395A、X395H、X395M、X395V、X396H、X396P、X397D、X397H、X397P、X397S、X398M、X399P、X39E、X39K、X3A、X3F、X3G、X3I、X3K、X3L、X3Q、X3V、X400A、X400D、X400E、X400G、X400H、X400I、X400K、X400L、X400M、X400N、X400P、X400Q、X400R、X400S、X400V、X400W、X401I、X401K、X401M、X401T、X403N、X405C、X405H、X405M、X405T、X405V、X406P、X407D、X407R、X407S、X408E、X408I、X408Q、X40I、X40S、X410H、X410I、X410K、X410L、X410P、X410R、X410Y、X413S、X414C、X414E、X414S、X415E、X415I、X416S、X418C、X418N、X418P、X41C、X41D、X41E、X41G、X41Q、X41S、X41T、X421N、X421P、X424A、X426D、X426W、X427C、X427F、X427G、X427K、X427Q、X427R、X427S、X427T、X427V、X429A、X429D、X429E、X429F、X429G、X429I、X429M、X429N、X429P、X429Q、X429S、X429T、X429V、X429W、X42C、X42I、X42Q、X42V、X431I、X434S、X436E、X438F、X438P、X438Y、X439K、X439C、X439P、X440V、X442Q、X443H、X443T、X445A、X445C、X445D、X445F、X445G、X445H、X445K、X445M、X445Q、X445R、X445S、X445T、X445V、X446F、X446I、X446L、X446P、X446Q、X446R、X446V、X446W、X447V、X448D、X448E、X448H、X448N、X449A、X449F、X449G、X449K、X449L、X449M、X449N、X449P、X449Q、X449R、X449S、X449V、X449W、X449Y、X451L、X453G、X453I、X453N、X453P、X453Y、X455L、X456L、X456M、X456R、X456S、X456V、X456W、X456Y、X457A、X457C、X457E、X457F、X457G、X457K、X457L、X457M、X457R、X457S、X457T、X457V、X457W、X458I、X458K、X458V、X458W、X459C、X459D、X459E、X459I、X459K、X459N、X459Q、X459R、X459V、X459Y、X45G、X45N、X460A、X460D、X460E、X460G、X460Q、X460R、X460S、X460T、X460V、X461A、X461E、X461F、X461K、X461L、X461M、X461N、X461Q、X461R、X461S、X461V、X462K、X463L、X465H、X465P、X465R、X465V、X467A、X467E、X467H、X468D、X468H、X470A、X470Q、X470T、X471E、X474F、X474H、X474P、X478A、X478E、X47S、X480D、X480E、X480M、X480R、X480Y、X482C、X482T、X482W、X48F、X48I、X48M、X48Y、X4A、X4C、X4K、X4M、X4Q、X4R、X4S、X51Q、X51T、X51V、X54D、X54G、X54Q、X59T、X5A、X5C、X5D、X5E、X5F、X5H、X5I、X5K、X5L、X5M、X5N、X5P、X5Q、X5R、X5V、X5Y、X60T、X63C、X63V、X6A、X6C、X6E、X6F、X6G、X6H、X6K、X6L、X6M、X6P、X6Q、X6S、X6T、X6V、X6W、X6Y、X70F、X70H、X70L、X70M、X70N、X70Y、X71D、X72C、X72D、X72E、X72N、X72T、X73L、X73N、X73Q、X75A、X75G、X75I、X75L、X75P、X75T、X75W、X76C、X76E、X76G、X76L、X76T、X76V、X7C、X7E、X7F、X7H、X7K、X7N、X7P、X7Q、X7R、X7S、X7V、X7W、X7Y、X81H、X81L、X82K、X82M、X83A、X83D、X83E、X83G、X83R、X83S、X86K、X87D、X87R、X89A、X89C、X89F、X89G、X89L、X89M、X89R、X89S、X8A、X8C、X8F、X8I、X8M、X8P、X8S、X8V、X8W、X8Y、X90A、X90D、X90E、X90F、X90G、X90I、X90M、X90N、X90Q、X90R、X90S、X90V、X90Y、X91C、X91D、X91E、X91F、X91G、X91H、X91I、X91K、X91L、X91M、X91N、X91Q、X91S、X91T、X91V、X91W、X91Y、X92D、X92M、X92V、X93K、X93Q、X94A、X94D、X94E、X94K、X94M、X94V、X94Y、X95E、X95I、X95L、X95V、X96K、X96N、X96Q、X97V、X98E、X98G、X98N、X99H、X99K、X99N、X100W和X1G，优选选自X4Q、X25H、X100W、X135E、X135T、X135W、X135D、X160W、X176K、X193E、X251E、
X258Q、X276R、X299S、X323G、X363E、X363H、X382Q、X405M、X460G和X482W，并且其中该变体具有α
‑
淀粉酶活性。3.前述权利要求中任一项的α
‑
淀粉酶变体，其中该变体包含选自以下的取代组合：X25H+X176K、X25H+X176K+X186E、X25H+X176K+X186E+X251E+X405M、X25H+X176K+X186E+X251E+X405M+X482W、X25H+X176K+X186E+X251E+X405M+X439K、X25H+X176K+X186E+X251E+X405M+X439K+X482W、X25H+X176K+X251E+X405M、X25H+X176K+X251E+X405M+X482W、X25H+X176K+X251E+X405M+X439K、X25H+X176K+X251E+X405M+X439K+X482W、X176K+X186E、X251E+X405M、X251E+X405M+X439K、X251E+X405M+X482W、X251E+X405M+X439K+X482W、X405M+X439K、X405M+X482W、X405M+X439K+X482W、X4Q+X25H+X176K+X186E+X251E+X405M+X439K、X4Q+X25H+X176K+X186E+X251E+X405M+X439K+X482W、X4Q+X25H+X176K+X251E+X405M+X439K、X4Q+X25H+X176K+X251E+X405M+X439K+X482W、X116K+X181T+X225A、X181T+X225A+X320K、X116K+X181T+X225A+X320K、X25H+X176K+X186E+X206Y+X251E+X482W、X4Q+X25H+X176K+X186E+X206Y+X251E+X405M+X482W、X25H+X176K+X186E+X206Y+X482W、X25H+X186E+X206Y+X405M+X482W、X25H+X186E+X206Y+X482W、X25H+X176K+X186E+X193E+X206Y+X251E+X482W、X4Q+X176K+X186E+X193E+X206Y+X251E+X405M+X482W、X25H+X176K+X186E+X482W、X25H+X176K+X186E+X193E+X206Y+X482W、X4Q+X25H+X176K+X186E+X251E+X405M+X482W、X25H+X176K+X186E+X206Y、
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【专利技术属性】
技术研发人员：J，
申请(专利权)人：汉高股份有限及两合公司，
类型：发明
国别省市：