一种降解尿素和氨基甲酸乙酯的双功能脲酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种降解尿素和氨基甲酸乙酯的双功能脲酶突变体及其应用，所述双功能脲酶突变体由野生型酶经过C亚基中G100L、A247I、V356N或I468C中的至少一个突变所得。本发明专利技术通过对来自Baci11us 1icheniformis9945A的脲酶进行突变，得到在高浓度乙醇条件下以及高温条件下依旧可以高效降解氨基甲酸乙酯的突变体，具有较高的工业应用价值。具有较高的工业应用价值。具有较高的工业应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种降解尿素和氨基甲酸乙酯的双功能脲酶突变体及其应用


[0001]本专利技术涉及一种降解尿素和氨基甲酸乙酯的双功能脲酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程


技术介绍

[0002]氨基甲酸乙酯(Urethane,Ethyl carbamate)，别名为尿烷，是一种有毒物质，对人体有潜在的致癌风险和遗传毒性。它会在多种发酵食品的储藏和运输过程中产生。最初，氨基甲酸乙酯被发现可以抑制细菌和小鼠肿瘤细胞的生长而作为一种抗肿瘤药物进行应用(Urethan(ethyl carbamate)as a cosolvent of drugs commonly used parenterally in humans)，然而，在1943年人们研究发现氨基甲酸乙酯会使小鼠细胞发生癌变，所以停止使用(Cytochrome P450 2E1(CYP2E1)is the principal enzyme responsible for urethane metabolism:comparative studies using CYP2E1/>‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种降解尿素和氨基甲酸乙酯的双功能脲酶突变体，其特征在于：所述双功能脲酶突变体由双功能脲酶突变得到，其中，所述双功能脲酶的基因簇包括结构基因，所述结构基因包括氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的ureA、氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的ureB和氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的ureC；所述的突变为将SEQ ID NO.3所示序列的第100位甘氨酸突变为亮氨酸，或将第247位丙氨酸突变为异亮氨酸，或将第356位缬氨酸突变为天冬酰胺，或将第468位异亮氨酸突变为半胱氨酸。2.根据权利要求1所述的双功能脲酶突变体，其特征在于：所述双功能脲酶的基因簇还包括辅助基因ureE、ureF、ureG、ureD和ureH。3.根据权利要求2所述的双功能脲酶突变体，其特征在于：辅助基因ureE的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，辅助基因ureF的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，辅助基因ureG的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示，辅助基因ureD的氨基酸序...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏小乐，昝其佳，高玲，郑楠，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：