白介素2突变体及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种白介素2(IL

【技术实现步骤摘要】
白介素2突变体及其应用
本申请是申请日为2021年04月13日、中国申请号为202110387222.3、专利技术名称为“白介素2突变体及其应用”的专利技术申请的分案申请。


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及白介素2突变体、其制备方法、及构建白介素2突变体所需的核酸、质粒、宿主细胞，相应的药用组合物及其应用。

技术介绍

[0002]白介素－2(IL－2)于1976年被发现，当时也被称作T细胞生长因子(TCGF)。主要由活化的I型辅助淋巴细胞TH1细胞分泌，在白介素基因表达的由153残基组成的前体中，N端20个氨基酸残基组成信号肽，在分泌时被切除，产生成熟的分泌IL－2。IL－2具有4个反平行的、两亲性α螺旋，此4个α螺旋形成其功能必不可少的四级结构。
[0003]IL－2主要通过效应细胞膜上的IL－2受体发挥作用。IL－2受体(IL－2R)有P55，P75，P64这3个亚单位，分别命名为IL－2受体α(IL－2Rα，CD25)，IL－2受体β(IL－2Rβ，CD122)和IL－2受体γ(IL－2Rγ，CD132)。IL－2Rα与IL－2低亲和力结合(KD约1
×
10－8mol/L)，且不具备信号传递功能；IL－2Rγ不单独与IL－2结合，只有在IL－2R的α、β和γ三者结合(KD约1
×
10－11mol/L)或β和γ结合后(KD约1
×
10－9mol/L)才显示出与IL－2的高亲和性；信号传递功能与β和γ有关，更多的是与γ有关。IL－2Rα主要表达在抑制性调节T细胞(Treg)和一些内皮细胞表面，而IL－2Rβ和IL－2Rγ则高表达在效应T细胞(Teff)和NK细胞表面。由于静息状态的效应T细胞和NK细胞在细胞表面没有IL－2Rα，故对于IL－2相对不敏感，但是Treg细胞高表达IL－2Rα，对于低水平的IL－2更敏感。因此，正常情况下IL－2会优先刺激Treg细胞的增殖。在传统肿瘤免疫治疗过程中，为了激活更多的Teff细胞，必须使用高剂量IL－2，因此无可避免的激活了大量的Treg，导致严重的血管渗漏综合征(vascular leakag esyndrome，VLS)。

技术实现思路

[0004]本专利技术为解决上述技术问题，本专利技术公开了新型白介素2突变体(IL－2突变体)的改造方法及一系列新型白介素2突变体，并进一步公开了编码这些白介素2突变体的核酸序列和氨基酸序列，包含这些核酸的载体，包含这些载体的宿主细胞。本专利技术还公开了新型白介素2突变体的药用组合物。本专利技术公开的IL－2突变体和组合物可以用于疾病的诊断和治疗。在其它实施方案中，这些新型白介素2突变体，核酸，质粒，和载体被用来诊断或治疗自身免疫疾病或癌症等相关疾病。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0006]一种白介素2突变体，所述白介素2突变体包含SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列，其中，
[0007]X1选自L，M，E，G，S，D，Y中的任一种氨基酸；
[0008]X2选自D，E中的任一种氨基酸；
[0009]X3选自F，L，V，Y，I中的任一种氨基酸；
[0010]X4选自K，H，G，Q，R，N，S中的任一种氨基酸；
[0011]X5选自Y，F，D中的任一种氨基酸；
[0012]X6选自F，A，Q，S，G，L中的任一种氨基酸；
[0013]X7选自C，A中的任一种氨基酸。
[0014]上述所述的白介素2突变体，作为一种优选的实施方案，所述白介素2突变体包含SEQIDNO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为L，X2为D，X3为L，X4为H，X5为Y，X6为F，X7为C；优选地，所述白介素2突变体包含SEQIDNO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为M，X2为D，X3为V，X4为G，X5为F，X6为F，X7为C；更优选地，所述白介素2突变体包含SEQIDNO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为E，X2选自D，E中的任一氨基酸，X3为F，X4为K，X5为Y，X6选自A，G中的任一氨基酸，X7选自C，A中的任一种氨基酸。
[0015]上述所述的白介素2突变体，作为一种优选的实施方案，所述白介素2突变体包含SEQIDNO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为E，X2为D，X3为F，X4为K，X5为Y，X6为A，X7为C；优选地，所述白介素2突变体包含SEQIDNO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为E，X2为E，X3为F，X4为K，X5为Y，X6为A，X7为C；更优选地，所述白介素2突变体包含SEQIDNO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为E，X2为D，X3为F，X4为K，X5为Y，X6为G，X7为C；进一步优选地，所述白介素2突变体包含SEQIDNO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为E，X2为D，X3为F，X4为K，X5为Y，X6为A，X7为A；更进一步优选地，所述白介素2突变体包含SEQIDNO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为E，X2为D，X3为F，X4为K，X5为Y，X6为G，X7为A。
[0016]上述所述的白介素2突变体，作为一种优选的实施方案，所述白介素2突变体包含SEQIDNO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为G，X2为D，X3选自I，F，Y中的任一氨基酸，X4选自Q，N，S中的任一氨基酸，X5选自F，Y，D中的任一氨基酸，X6选自F，L中的任一氨基酸，X7选自C，A中的任一种氨基酸；优选地，所述白介素2突变体包含SEQIDNO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为G，X2为D，X3为I，X4为Q，X5为F，X6为F，X7为C；更优选地，所述白介素2突变体包含SEQIDNO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为G，X2为D，X3为F，X4为N，X5为Y，X6为F，X7为C；进一步优选地，所述白介素2突变体包含SEQIDNO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为G，X2为D，X3为Y，X4为S，X5为D，X6为L，X7为C；更进一步优选地，所述白介素2突变体包含SEQIDNO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为G，X2为D，X3为F，X4为N，X5为Y，X6为F，X7为A；
[0017]优选地，所述白介素2突变体包含SEQIDNO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为S，X2为D，X3为L，X4为Q，X5为Y，X6为F，X7为C；
[0018]优选地，所述白介素2突变体包含SEQIDNO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为D，X2选自D，E中的任一氨基酸，X3选自L，F中的任一氨基酸，X4选自R，K中的任一氨基酸，X5选自F，Y中的任一氨基酸，X6选自F，Q，S，A中的任一氨基酸，X7选自C，A中的任一种氨基酸；
[0019]优选地，所述白介素2突变体包含SEQIDNO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为D，X2为D，X3为L，X4为R，X5为F，X6为F，X7为C；
[0020]优选地，所述白介素2突变体包含SEQIDNO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为D，X2为E，X3为本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种白介素2突变体，其特征在于，所述白介素2突变体包含SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列，其中，X1选自L，M，E，G，S，D，Y中的任一种氨基酸；X2选自D，E中的任一种氨基酸；X3选自F，L，V，Y，I中的任一种氨基酸；X4选自K，H，G，Q，R，N，S中的任一种氨基酸；X5选自Y，F，D中的任一种氨基酸；X6选自F，A，Q，S，G，L中的任一种氨基酸；X7选自C，A中的任一种氨基酸。2.根据权利要求1所述的白介素2突变体，其特征在于，所述白介素2突变体包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，其中，X1为L，X2为D，X3为L，X4为H，X5为Y，X6为F，X7为C；优选地，所述白介素2突变体包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，其中，X1为M，X2为D，X3为V，X4为G，X5为F，X6为F，X7为C；更优选地，所述白介素2突变体包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，其中，X1为E，X2选自D，E中的任一氨基酸，X3为F，X4为K，X5为Y，X6选自A，G中的任一氨基酸，X7选自C，A中的任一种氨基酸。3.根据权利要求1所述的白介素2突变体，其特征在于，所述白介素2突变体包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，其中，X1为E，X2为D，X3为F，X4为K，X5为Y，X6为A，X7为C；优选地，所述白介素2突变体包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，其中，X1为E，X2为E，X3为F，X4为K，X5为Y，X6为A，X7为C；更优选地，所述白介素2突变体包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，其中，X1为E，X2为D，X3为F，X4为K，X5为Y，X6为G，X7为C；进一步优选地，所述白介素2突变体包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，其中，X1为E，X2为D，X3为F，X4为K，X5为Y，X6为A，X7为A；更进一步优选地，所述白介素2突变体包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，其中，X1为E，X2为D，X3为F，X4为K，X5为Y，X6为G，X7为A。4.根据权利要求1所述的白介素2突变体，其特征在于，所述白介素2突变体包含SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为G，X2为D，X3选自I，F，Y中的任一氨基酸，X4选自Q，N，S中的任一氨基酸，X5选自F，Y，D中的任一氨基酸，X6选自F，L中的任一氨基酸，X7选自C，A中的任一种氨基酸；优选地，所述白介素2突变体包含SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为G，X2为D，X3为I，X4为Q，X5为F，X6为F，X7为C；更优选地，所述白介素2突变体包含SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为G，X2为D，X3为F，X4为N，X5为Y，X6为F，X7为C；进一步优选地，所述白介素2突变体包含SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列，其中，X1为G，X2为D，X3为Y，X4为S，X5为D，X6为L，X7为C；更进一...

【专利技术属性】
技术研发人员：纪恩，王春雨，
申请(专利权)人：苏州复融生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：