肽类小分子化合物在制备抗炎药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了肽类小分子化合物在制备抗炎药物中的应用。本发明专利技术从海洋珊瑚共附生真菌Simplicillium sp.SCSIO41209的发酵培养物中分离得到如式(Ⅰ)所示的化合物1和2。本发明专利技术证明，化合物1和2对PD

【技术实现步骤摘要】
肽类小分子化合物在制备抗炎药物中的应用


[0001]本专利技术属于天然药物
，具体涉及肽类小分子化合物在制备抗炎药物中的应用。

技术介绍

[0002]在抗炎的临床治疗中，阿司匹林、布洛芬等非甾体抗炎药(NSAID)扮演了重要角色，然而，NSAIDs在达到抗炎镇痛目的的同时，也可能会引起广泛的不良反应，为了减轻相关副作用，寻找新的靶标，开发新一代抗炎药物成为研发重点。海洋来源的活性先导化合物具有结构新颖，作用机制独特等特点，是国际上药物研发的重要宝库。海洋微生物代谢能力更强，生命活动更复杂，并且与海洋中动植物有着非常复杂的生态关系，孕育着无穷无尽的新型活性代谢产物，是一块还没有充分发掘而又有极大潜力的新领域，因此从海洋微生物中发现新型抗炎类药物意义重大。

技术实现思路

[0003]本专利技术的第一个目的是提如式(Ⅰ)所示的任一肽类小分子化合物或其药用盐在制备抗炎药物中的应用；
[0004][0005]进一步的，所述的化合物sinulariapeptide C和sinulariapeptide E是从海洋珊瑚共附生真菌Simplicillium sp.SCSIO41209的发酵培养物中分离获得的。具体制备步骤如下：制备海洋珊瑚共附生真菌Simplicillium sp.SCSIO41209的发酵培养物，将发酵培养物用丙酮浸泡提取，乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩后得到提取物，提取物经硅胶柱层析和半制备HPLC纯化后，得到化合物sinulariapeptide C和sinulariapeptide E。
[0006]所述的发酵培养物是通过以下方法制备：将真菌Simplicillium sp.SCSIO41209接入种子培养基中，振荡培养，获得种子发酵液，将种子发酵液再接种到大米培养基中，静态发酵获得发酵培养物。
[0007]所述的种子培养基的配方为：麦芽浸膏15g，精海盐2.5g，蒸馏水1000mL，pH 7.4
‑
7.8；所述的大米培养基的配方为：大米200g，精海盐3g，蒸馏水200mL。
[0008]本专利技术的第二个目的是提供一种抗炎药物，包含如式(Ⅰ)所示的任一肽类小分子化合物或其药用盐作为活性成分。
[0009]优选的，所述的抗炎药物还包含药学上可以接受的辅料或载体。
[0010]优选的，所述抗炎药物的剂型为注射给药剂型、透皮给药剂型或口服给药剂型。
[0011]本专利技术具有以下有益效果：
[0012]本专利技术从一株海洋珊瑚共附生真菌Simplicillium sp.SCSIO41209的发酵培养物中分离获得的两个肽类小分子化合物sinulariapeptide C和sinulariapeptide E，该该化合物sinulariapeptide C和sinulariapeptide E能够抑制NO的释放，有效抑制LPS诱导的促炎细胞因子水平的趋势，同时也能有效促进M2极化，且可抑制FAS引起的细胞凋亡。在相同浓度下，对RAW264.7细胞无细胞毒活性，表明这两个化合物可以做为抗炎药物开发的先导化合物，对开发利用我国海洋微生物药物资源具有重要意义。
[0013]本专利技术的海洋珊瑚共附生真菌Simplicillium sp.SCSIO41209于2023年3月22日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，广东省微生物研究所，邮编：510070，保藏编号：GDMCC No：63288。
附图说明
[0014]图1为抗炎活性筛选结果；A：一氧化氮释放量数据结果；B：抗炎基因表达结果；C：炎症因子ELISA结果；D：Fas凋亡信号通路基因表达。
具体实施方式
[0015]以下实施例是对本专利技术的进一步说明，而不是对本专利技术的限制。
[0016]实施例1:化合物sinulariapeptide C和sinulariapeptide E的制备和结构鉴定
[0017]一、化合物sinulariapeptide C和sinulariapeptide E的制备
[0018]1.微生物培养条件：
[0019]将海洋珊瑚共附生真菌Simplicillium sp.SCSIO41209接入100mL三角瓶容器，每瓶含种子培养基(MB培养基)10mL，25℃，178rpm摇床震荡培养72h获得种子液，将10mL种子液接入1000mL装有大米培养基的锥形瓶中，共培养30瓶，在自然光照下，25℃静止培养60d，获得真菌Simplicillium sp.SCSIO41209的发酵产物。所述的种子培养基为MB培养基，其配方为：麦芽浸膏15g，精海盐2.5g，蒸馏水1000mL，pH 7.4
‑
7.8，配制步骤为：将各成分溶于水，搅拌混匀，调节pH，灭菌即得。大米培养基的配方为：大米200g，精海盐3g，蒸馏水200mL，配制步骤为：将各成分与水混合，搅拌混匀，灭菌即得。
[0020]2.提取分离：
[0021]发酵完毕后大米发酵产物用两倍体积丙酮浸泡2天，然后将大米捣碎，超声15分钟，用8层纱布进行减压过滤，滤液减压浓缩以除去丙酮。然后再用两倍体积乙酸乙酯萃取3次，浓缩后得到乙酸乙酯相粗浸膏。滤渣继续用乙酸乙酯提取3遍，浓缩后合并以上乙酸乙酯部分得总粗浸膏(56g)。将总粗浸膏采用中压色谱进行分离，用100～200目硅胶拌样，流动相为石油醚：乙酸乙酯(V:V＝100:0～1:1，流速50mL
·
min
‑1)梯度洗脱得到第一部分馏分，再用石油醚：乙酸乙酯：甲醇(V:V:V＝20:20:1～0:0:100，流速50mL
·
min
‑1)梯度洗脱得到第二部分馏分。两部分馏分通过薄层色谱法(TLC)检识合并得26个馏分。其中Fr.26(石油
醚：乙酸乙酯＝3:1～6:1洗脱馏分)经反相中压色谱(ODS)(V
MeOH
:V
H2O
＝10:90～100:0，流速30mL
·
min
‑1)梯度洗脱得18个子馏分，子馏分Fr.26
‑
12(甲醇：水＝60:40～70:30洗脱馏分)经半制备液相(V
MeOH
:V
H2O
＝65:35，流速3.0mL
·
min
‑1)洗脱得到化合物1(2.29mg，t
R
＝34min),使用YMC ODS半制备柱(YMC
‑
Pack ODS
‑
A,250
×
10mm I.D.,S
‑
5μm,12nm)，柱温27℃。Fr.20(石油醚：乙酸乙酯＝1:1～2:1洗脱馏分)经反相中压色谱(ODS)(V
MeOH
:V
H2O
＝20:80～100:0，流速30mL
·
min
‑1)梯度洗脱得17本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.如式(Ⅰ)所示的任一化合物或其药用盐在制备抗炎药物中的应用；2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的化合物sinulariapeptide C和sinulariapeptide E是从海洋珊瑚共附生真菌Simplicillium sp.SCSIO41209的发酵培养物中分离获得的。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的化合物sinulariapeptide C和sinulariapeptide E的制备步骤具体为：制备海洋珊瑚共附生真菌Simplicillium sp.SCSIO41209的发酵培养物，将发酵培养物用丙酮浸泡提取，乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩后得到提取物，提取物经硅胶柱层析和半制备HPLC纯化后，得到化合物sinulariapeptideC和sinulariapeptide E。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的发酵培养物是通过以下方法制备：将真菌Simplicil...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨斌，周雪峰，庞小艳，林秀萍，王俊锋，廖升荣，刘永宏，
申请(专利权)人：中国科学院南海海洋研究所，
类型：发明
国别省市：