一种功能化神经干细胞外泌体制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种功能化神经干细胞外泌体制备方法与应用。具体地公开了一种由重组干细胞产生、表面耦联有带正电荷的耦联物的外泌体，所述重组干细胞是通过增强目的干细胞的抗氧化酶基因表达量得到的重组干细胞。本发明专利技术利用基因工程技术对神经干细胞进行改造，使其过表达抗氧化酶CAT，提取兼有抗氧化和修复功能的外泌体，随后在外泌体表面耦联正电荷，获得了神经干细胞外泌体CataKNExo。本发明专利技术的CataKNExo性质稳定，平均粒径125nm，平均电势10mV，其表达的CAT蛋白活性为10U/mg prot，具有精准靶向、抗氧化与损伤修复协同作用，对视网膜缺血再灌注损伤具有显著的治疗效果。网膜缺血再灌注损伤具有显著的治疗效果。

【技术实现步骤摘要】
一种功能化神经干细胞外泌体制备方法与应用


[0001]本专利技术属于生物医学
，涉及一种功能化神经干细胞外泌体制备方法与应用，具体涉及一种基于神经干细胞外泌体(NExo)的靶向协同抗氧化药物制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]视网膜缺血再灌注损伤(Retinal Ischemia
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Reperfusion Injury，RIRI)主要发生于视网膜血管阻塞、糖尿病视网膜病变、青光眼等眼科疾病，全球约有4亿人患有此类疾病。临床上治疗RIRI的方式主要有抑制新生血管异常生长、激光封闭视网膜裂孔、手术复位视网膜脱离、药物降低眼压等，均是从外部进行干预。但视网膜内部的神经细胞具有不可再生性，细胞一旦凋亡就会导致视网膜功能永久受损。目前临床上缺少针对视网膜内部细胞损伤进行修复的手段，且现有的治疗方案无法很好地挽救患者视力。
[0003]已有文献证实干细胞具有细胞损伤修复的功能，其中，神经干细胞(Neural Stem Cell，NSC)含有丰富的神经生长因子和修复性蛋白，在神经细胞损伤修复中的作用受到越来越多的关注。虽本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.外泌体，其特征在于，所述外泌体由重组干细胞产生，命名为重组干细胞外泌体，所述重组干细胞是通过上调、增强或提高目的干细胞的抗氧化酶基因表达量得到的重组干细胞，所述重组干细胞外泌体的抗氧化酶活性高于所述目的干细胞产生的外泌体。2.根据权利要求1所述的外泌体，其特征在于，所述抗氧化酶基因包括过氧化氢酶基因、超氧化物歧化酶基因、谷胱甘肽过氧化物酶基因和硫氧还蛋白过氧化物酶基因。3.根据权利要求1或2所述的外泌体，其特征在于，所述干细胞为神经干细胞、间充质干细胞或诱导性多功能干细胞。4.根据权利要求1
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3中任一所述的外泌体，其特征在于，所述外泌体的表面耦联有带正电荷的耦联物。5.根据权利要求4所述的外泌体，其特征在于，所述带正电荷的耦联物为下述任一种：A1)含有赖氨酸和/或精氨酸和/或组氨酸的寡肽；A2)含有赖氨酸和/或精氨酸和/或组氨酸的多肽。6.权利要求1
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5中任一所述外泌体的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：B1)将抗氧化酶基因导入干细胞，得到表达抗氧化酶的重组干细胞；B2)从所述重组干细胞中提取外泌体，得到表达抗氧化酶的外泌体；优选地，所述抗氧化酶基因为过氧化氢酶基因；优选地，所述干细胞为神经干细胞。7.根据权利要求6所述的方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：陶勇，魏炜，王晓君，杨伟强，
申请(专利权)人：首都医科大学附属北京朝阳医院，
类型：发明
国别省市：